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Medicine

पूर्व नैदानिक मॉडल पश्च अंग के Ischemia मधुमेह खरगोशों में

Published: June 2, 2019 doi: 10.3791/58964
Automatic Translation
1, 2, 3, 2, 1, 2,4, 1,5,6,7
1Department of Biomedical Engineering, University of Texas at Austin, 2Division of Cardiology, University of Texas McGovern Medical School, 3Center for Laboratory Animal Medicine and Care, UT Health Science Center at Houston, 4Memorial Herman Heart and Vascular Center, Texas Medical Center, 5Institute for Cellular and Molecular Biology, University of Texas at Austin, 6The Institute for Computational Engineering and Sciences, University of Texas at Austin, 7Institute for Biomaterials, Drug Delivery and Regenerative Medicine, University of Texas at Austin

Summary

हम एक शल्य चिकित्सा hyperlipidemia और मधुमेह के साथ खरगोशों में परिधीय ischemia प्रेरित करने के लिए इस्तेमाल किया प्रक्रिया का वर्णन । यह सर्जरी रोगियों में परिधीय धमनी की बीमारी में अनुभवी स्थितियों के लिए एक पूर्व नैदानिक मॉडल के रूप में कार्य करता है । एंजियोग्राफी भी एक साधन के रूप में वर्णित है ischemia शुरू की हद तक और perfusion की वसूली को मापने के लिए ।

Abstract

परिधीय संवहनी रोग एक व्यापक नैदानिक समस्या है कि दुनिया भर में लाखों रोगियों को प्रभावित करता है । परिधीय संवहनी रोग का एक प्रमुख परिणाम ischemia के विकास है । गंभीर मामलों में, रोगियों को महत्वपूर्ण अंग ischemia जिसमें वे लगातार दर्द और अंग अंगच्छेदन का एक बढ़ा जोखिम का अनुभव विकसित कर सकते हैं । परिधीय ischemia के लिए वर्तमान चिकित्सा बाईपास सर्जरी या ऐसे स्टेंटिंग या atherectomy के साथ एंजियोप्लास्टी के रूप में त्वचा के हस्तक्षेप के लिए रक्त के प्रवाह को बहाल शामिल हैं । हालांकि, इन उपचार अक्सर संवहनी रोग या restenosis के निरंतर प्रगति करने के लिए असफल या रोगी के समग्र गरीब स्वास्थ्य के कारण contraindicated कर रहे हैं । एक होनहार संभावित दृष्टिकोण के इलाज के लिए परिधीय ischemia चिकित्सकीय neovascularization शामिल शामिल करने के लिए रोगी संपार्श्विक वाहिकन्यास विकसित करने की अनुमति है । यह नवगठित नेटवर्क प्रभावित क्षेत्र को छिड़काव बहाल द्वारा परिधीय ischemia alleviates । सबसे अक्सर परिधीय ischemia के लिए पूर्व नैदानिक मॉडल कार्यरत है ऊरु धमनी लिगेशन के माध्यम से स्वस्थ खरगोशों में हिंद अंग ischemia के निर्माण का इस्तेमाल करता है । अतीत में, तथापि, वहां पूर्व नैदानिक अध्ययन की सफलता और परिधीय ischemia के लिए उपचार के बारे में नैदानिक परीक्षणों की विफलता के बीच एक मजबूत काट दिया गया है । स्वस्थ पशुओं को आम तौर पर शल्य चिकित्सा प्रेरित ischemia के जवाब में मजबूत संवहनी उत्थान है, कम vascularity वृद्धि और पुरानी परिधीय ischemia के साथ रोगियों में उत्थान के विपरीत । यहां, हम खरगोश में परिधीय ischemia के लिए एक अनुकूलित पशु मॉडल का वर्णन है कि hyperlipidemia और मधुमेह भी शामिल है । इस मॉडल के संपार्श्विक गठन कम है और एक उच्च कोलेस्ट्रॉल आहार के साथ एक मॉडल की तुलना में रक्तचाप वसूली । इस प्रकार, मॉडल आम सह से समझौता angiogenesis के साथ मानव रोगियों के साथ बेहतर संबंध प्रदान कर सकते है कि परिधीय संवहनी रोग के साथ ।

Introduction

परिधीय धमनी रोग (पैड) एक आम परिसंचरण विकार है जिसमें atherosclerotic पट्टिका गठन की प्रगति शरीर के अंगों में रक्त वाहिकाओं के संकुचन की ओर जाता है । Atherosclerosis के लिए जोखिम कारकों में हाल ही में वृद्धि, मधुमेह सहित, मोटापा, और निष्क्रियता, संवहनी रोग के प्रसार में वृद्धि हुई है1। वर्तमान में, यह अनुमान लगाया गया है कि 12%-20% से अधिक ६० वर्ष की आयु की सामान्य जनसंख्या में परिधीय धमनीय रोग2है । परिधीय कोरोनरी रोग का एक प्रमुख परिणाम परिधीय ischemia के विकास, सबसे अधिक निचले अंगों में पाया जाता है । गंभीर मामलों में, रोगियों को महत्वपूर्ण अंग ischemia, एक राज्य है जिसमें वहां लगातार रक्त प्रवाह की कमी के कारण दर्द विकसित कर सकते हैं । गंभीर अंग ischemia के साथ रोगियों को एक अंग होने के एक ५०% संभावना है निदान के एक वर्ष के भीतर काटना । इसके अलावा, मधुमेह के रोगियों के एक उच्च घटना परिधीय धमनी रोग और गरीब revascularization3,4के लिए हस्तक्षेप के बाद परिणाम है । परिधीय ischemia के लिए वर्तमान चिकित्सा ऐसे atherectomy और स्टेंटिंग या सर्जिकल बाईपास के रूप में percutaneous हस्तक्षेप शामिल हैं । हालांकि, कई रोगियों के लिए इन उपचार केवल अल्पकालिक लाभ प्रदान करते है और कई प्रमुख शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं के लिए पर्याप्त स्वस्थ नहीं हैं । इस काम में, हम नए परिधीय संवहनी रोग है कि मधुमेह की बीमारी राज्य के संदर्भ में शल्य चिकित्सा लिगेशन के माध्यम से खरगोशों में परिधीय ischemia की पीढ़ी को शामिल करने को लक्षित उपचार के परीक्षण के लिए एक पूर्व नैदानिक पशु मॉडल का वर्णन ।

है हिंद अंग खरगोश में ischemia मॉडल प्रतिरोधी संवहनी रोग और मानव अध्ययन के लिए पूर्व नैदानिक अग्रदूत के लिए एक शारीरिक मॉडल के रूप में इस्तेमाल किया गया है पर आधी सदी5,6। खरगोश अक्सर परिधीय ischemia टखने और बछड़े की मांसपेशी के विकसित मांसपेशियों के कारण पर अध्ययन के लिए एक पसंदीदा प्रजातियों रहे हैं, आम बड़े जानवर मॉडल है कि ungulates (hooves के साथ जानवरों) कर रहे है के विपरीत में । हाल ही में कई समीक्षाएं मानव7,8में परिधीय संवहनी रोग मॉडलिंग में इस मॉडल और दूसरों के उपयोग को संबोधित किया है । इसी तरह के मॉडल का उपयोग कर हिंद अंग के ischemia खरगोशों में विकास कारकों9,10,11,12,13,14के पूर्व नैदानिक अध्ययन में इस्तेमाल किया गया, 15,16,17,18,19,20, जीन थेरेपी21,22,23, 24,25,26,27,28,29,30,31,३२, ३३,३४,३५,३६,३७,३८,३९, ४०, ४१, ४२,४३,४४, और स्टेम सेल४५,४६,४७, ४८,४९,५० ,हाथ पैरों में चिकित्सीय नियोवैस्कूराइजेशन के लिए५१। दुर्भाग्य से, नैदानिक परीक्षणों कि इन सफल पशु अध्ययन के बाद रोगियों५२के लिए महत्वपूर्ण लाभ नहीं दिखा था ।

एक इस अनुवाद विफलता के लिए कारण की व्याख्या का सुझाव दिया है कि मानव रोगियों में परिधीय ischemia की हालत एक है कि एंजियोजेनिक संकेतों के लिए प्रतिरोध शामिल है५३,५४,५५, ५६ , ५७ , ५८ , ५९. कई अध्ययनों से मधुमेह और hyperglycemia में एंजियोजेनिक संकेतन रास्ते में दोष दिखाया गया है. डायबिटीज और हाइपरलिपिडेमिया के कारण हेपरन सल्फेट प्रोटोग्लायकंस का नुकसान होता है और एंजाइम में वृद्धि होती है जो हीरन सल्फेट को काटते हैं, जो वृद्धि कारकों के साथ चिकित्सीय एंजियोजेनेसिस/आर्टीनोजेनेसिस के प्रतिरोध के लिए एक संभावित तंत्र पेश करते हैं६० , ६१. इस प्रकार, परिधीय ischemia के लिए एक मॉडल की एक प्रमुख विशेषता चिकित्सकीय प्रतिरोध का एक पहलू तो शामिल है कि चिकित्सा रोग मानव रोगियों में मौजूद राज्य के संदर्भ में मूल्यांकन किया जा सकता है चाहिए ।

इस काम में, हम ऊरु धमनियों के सर्जिकल लिगेशन के माध्यम से परिधीय ischemia के एक खरगोश मॉडल का वर्णन । मधुमेह और हाइपरलिपिडेमिया के प्रेरण के साथ एक नेतृत्व अवधि में मॉडल में शामिल किया गया है । हम एक और मॉडल है कि मधुमेह के बिना एक उच्च वसा आहार शामिल करने के लिए इस मॉडल की तुलना में और पाया कि मधुमेह और hyperlipidemia के निचले स्तर के साथ मॉडल रक्त वाहिका वृद्धि को कम करने में अधिक प्रभावी था । हमारे मॉडल प्रगति है कि अलग समूहों द्वारा इस्तेमाल किया गया है को जोड़ती है, एक व्यावहारिक और मानकीकृत पद्धति प्रदान करने के लिए परिधीय संवहनी रोग अनुसंधान में लगातार परिणाम प्राप्त करने के लक्ष्य के साथ ।

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Protocol

पशुओं को शामिल अध्ययन ऑस्टिन में टेक्सास विश्वविद्यालय के अनुमोदन के साथ प्रदर्शन किया और UTHealth विज्ञान केंद्र में ह्यूस्टन संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति (IACUC), पशु देखभाल और उपयोग की समीक्षा कार्यालय (ACURO) संयुक्त राज्य अमेरिका सेना के चिकित्सा अनुसंधान और सामग्री अनुसंधान सुरक्षा के आदेश कार्यालय, और अनुसार पशु देखभाल के लिए NIH दिशा निर्देशों के साथ ।

1. मधुमेह और हाइपरलिपिडेमिया की प्रेरण

  1. परिवर्तन ंयूजीलैंड खरगोशों (4-6 महीने पुराने) मानक अल्फला चाउ के एक कप से ०.१% कोलेस्ट्रॉल के लिए चार दिनों के पाठ्यक्रम पर चाउ । 1-5 दिनों के लिए, मानक चाउ का उपयोग 1:0, 3:1, 1:1, 1:3, और 0:1, क्रमशः । ०.१% कोलेस्ट्रॉल चाउ पर दो सप्ताह के बाद, खरगोश पैदा करने के लिए निम्न चरणों में वर्णित के रूप में एलोक्सा इंजेक्शन का उपयोग कर मधुमेह है
  2. 35-75 मिलीग्राम/एमएल केटामाइन और 1-2 मिलीग्राम/एमएल एसीप्रोजाइज़ीन के माध्यम से चमड़े के नीचे इंजेक्शन और एक चतुर्थ इंजेक्शन के लिए प्रस्तुत करने का उपयोग कर खरगोश
  3. बेसलाइन रक्त शर्करा स्तर (बीजीएल) माप के लिए कान शिरा कैथेटर के हब के माध्यम से खरगोशों से रक्त की एक बूंद ले लीजिए । किसी भी मानक ग्लूकोमीटर इस्तेमाल किया जा सकता है । एक खरगोश के लिए सामान्य ग्लूकोज का स्तर आम तौर पर ८० से १५० मिलीग्राम/डीएल की रेंज में हैं ।
  4. एक सिरिंज पंप का उपयोग कर एक 8 मिनट की अवधि पर धीरे से कान कैथेटर के माध्यम से 8 मिलीलीटर की एक मात्रा के लिए नमकीन में १०० मिलीग्राम/किग्रा पर एलोक्सा इंजेक्शन ।
  5. Bgl अगले 12 के लिए हर घंटे की जांच करें h एक मानक ग्लूकोमीटर का उपयोग करने के लिए hypoglycemia के लिए निगरानी ।
    1. खरगोश को एक निरोधक में रखें ।
    2. २.५% lidocaine/2.5% prilocaine क्रीम के साथ कान anesthetize ।
    3. एक 27 ग्राम सुई का उपयोग पार्श्व कान नस से रक्त ले लो और एक मानक मीटर का उपयोग कर बीजीएल उपाय ।
  6. बीजीएल को पहले 7 दिनों के लिए दिन में दो बार मापें । खरगोशों को इंसुलिन का एक इंजेक्शन दें यदि बीजीएल पहुंचता है या ३५० मिलीग्राम/डीएल से अधिक हो जाता है ।
  7. सर्जरी के दिन से पहले एंजियोग्राम के दौरान एक आकार मार्कर के रूप में प्रत्यारोपण के लिए एक 3 मिमी स्टेनलेस स्टील गेंद तैयार करें ।
    1. एक बायोप्सी पंच का उपयोग कर एक बड़ा चादर से बाहर silastic चादर का एक 10 मिमी परिपत्र टुकड़ा काट ।
    2. स्पष्ट सिलिकॉन सीलेंट का उपयोग शीट के केंद्र में गेंद माउंट ।
    3. पूरी तरह से सीलेंट के साथ गेंद को कवर । सीलेंट 24 ज की एक ंयूनतम के लिए इलाज करने की अनुमति दें ।
    4. एक खुला 2 इंच x 3 इंच कम घनत्व polyethylene बैग में गेंद प्लेस और एक नसबंदी बैग में जगह एथिलीन ऑक्साइड गैस के साथ निष्फल हो ।

2. शल्य चिकित्सा के लिए खरगोश की तैयारी

  1. कम से कम 20-40 मिलीग्राम/किलो केटामाइन और चमड़े के नीचे इंजेक्शन के माध्यम से 2 मिलीग्राम/किलो मिदाजोलम का उपयोग कर खरगोश 1.5% पर खरगोश प्लेस-3% isoflurane (आमतौर पर 2%) एक मुखौटा का उपयोग कर प्रारंभिक बेहोश करने की क्रिया के दौरान । 3 मिलीग्राम/किलो के एक इंट्रामस्क्युलर इंजेक्शन के माध्यम से संज्ञाहरण बनाए रखने के लिए alfaxalone का एक इंजेक्शन दे ।
  2. एक बार निश्चेतक, मुखौटा हटाने और एक कफ endotracheal ट्यूब डालने के लिए, airway में और एक वेंटीलेटर से कनेक्ट । 1.5%-3% पर isoflurane प्रशासन जारी रखें ।
  3. एक बेसलाइन रसायन पैनल के लिए या तो कान से केंद्रीय धमनी से रक्त ले लीजिए ।
  4. शल्य प्रक्रिया भर में लैक्टेड घंटी समाधान ड्रिप के लिए पार्श्व कान नस में एक 22 ग्राम कान शिरा कैथेटर प्लेस । वैकल्पिक रूप से, सामान्य खारा (०.९% सोडियम क्लोराइड) का उपयोग किया जा सकता है ।
  5. विपरीत कान में पार्श्व शिरा का उपयोग करना, नस में एक कैथेटर जगह और 6 मिलीग्राम/किलो/एच में alfaxalone देने के लिए क्रमशः 8 मिलीग्राम/किलो ०.६/
  6. दर्द और संक्रमण के जोखिम को सीमित करने के लिए, बुप्रेनोरफिन (०.०१ मिलीग्राम/किलो) और enrofloxacin (5 मिलीग्राम/किलो) एक 25 ग्राम सुई के साथ एक चमड़े के नीचे इंजेक्शन का उपयोग कर प्रशासित ।
  7. गर्दन पर बाल ट्रिम कर दीजिए, सही और बाएं भीतरी जांघों, और वापस कतरनी (#40 ब्लेड) का उपयोग कर । बाल वापस से हटा दिया है ग्राउंडिंग पैड के साथ संपर्क बनाए रखने के लिए ।
  8. प्रत्येक पश्च अंग पर एक रक्तचाप कफ रखें और आरंभिक रक्तचाप को मापें । बस घुटने के नीचे पार्श्व सतह पर ओल के ऊपर जांच के साथ कफ रखें ।
  9. अपनी पीठ पर सर्जरी मेज पर खरगोश की स्थिति और हाथ धोने और शल्य चिकित्सा साइटों कपड़ा । इस ऊरु धमनी का उपयोग करने के लिए ग्रीवा धमनी का उपयोग और भीतरी दाहिने जांघ के लिए गर्दन भी शामिल है । 2% chlorhexidine और ७०% एथिल शराब की बारी scrubs के साथ नसबंदी स्क्रब प्रदर्शन । इस तीन बार दोहराएं, तो 2% chlorhexidine समाधान के साथ एक अंतिम स्प्रे लागू होते हैं ।
  10. एक 3 मिमी स्टेनलेस स्टील की गेंद है कि सही (scrubbed) जांघ के ऊपरी हिस्से के पास पैर के शीर्ष पर एक कम घनत्व पॉलीथाइलीन बैग के अंदर रोगाणुरहित किया गया है एंजियोग्राम माप के दौरान एक आकार के संदर्भ के रूप में सेवा प्लेस । सर्जरी के समय तक पैर पर एक बाँझ कपड़ा रखें । पहले एंजियोग्राम के दौरान प्लास्टिक बैग के अंदर गेंद को छोड़ दें ।

3. एंजियोग्राफी

  1. सही आम कैरोटिड धमनी का पर्दाफाश
    1. एक 4-5 सेमी लंबा बस एक #15 ब्लेड के साथ एक स्केलपेल का उपयोग श्वासनली के पार्श्व चीरा बनाओ ।
    2. मंया धमनी का पर्दाफाश और छोटे Weitlaner retractors का उपयोग कर चीरा खोलने के लिए कुंद विच्छेदन का प्रयोग करें । ध्यान से ग्रीवा नस और वेगस तंत्रिका से मन्या धमनी को अलग । आमतौर पर, एक घुमावदार Metzenbaum कैंची और एक घुमावदार मच्छर hemostat कुंद विच्छेदन के लिए उपयोग किया जाता है । तंत्रिका और गले की नस से मन्या धमनी के पूर्ण जुदाई प्राप्त करने के लिगेचर्स केवल धमनी लिगेचर्स करने के लिए सुनिश्चित करें ।
  2. उजागर धमनी के समीपस्थ और बाहरी छोर पर एक 4-0 रेशम सीवन का उपयोग कर एक संयुक्ताक्षर रखें । एक सर्जन गांठ चार वर्ग समुद्री मील के बाद के साथ बंद कैरोटिड के बाहर अंत टाई । समीपस्थ अंत पर, एक ligaloop का उपयोग करने के लिए यह सख्त या जरूरत के रूप में ढीला करने की अनुमति है । एक ligaloop उजागर धमनी के समीपस्थ अंत में रखा का उपयोग कर सकते है परिचायक और कैथेटर सुरक्षित मदद करते हैं ।
  3. हेपरिन के चतुर्थ के माध्यम से ५०० iu प्रशासन । का प्रयोग करें लगभग ०.५ मिलीलीटर की 1% lidocaine उजागर मन्या के साथ बर्तन चौड़ा करने के लिए लागू किया । एक उपचार आमतौर पर पर्याप्त है, लेकिन यह जरूरत के रूप में दोहराया जा सकता है । एक स्केलपेल या आईरिस कैंची का उपयोग कर मन्या धमनी के माध्यम से लगभग आधा रास्ता काट, तो धमनी में 4 इंच के तार प्रविष्टि उपकरण जगह है ।
  4. एक ०.०१४ इंच x १८५ मुख्यमंत्री guidewire के माध्यम से प्रविष्टि उपकरण के माध्यम से महाधमनी विभाजन में श्रोणि शिखर पर उतरते महाधमनी में । प्रविष्टि उपकरण निकालें और एक 3F बेनी एंजियोग्राफिक कैथेटर तार पर डालें ।
  5. इस बेनी कैथेटर अग्रिम 2 सेमी समीपस्थ महाधमनी द्विभाजन में श्रोणि शिखर पर उतरते महाधमनी में.
  6. सातवें काठ और पहले त्रिक कशेरुकी के बीच कैथेटर की नोक स्थिति । मैंयुअल रूप से एक 2-4 मिलीलीटर के विपरीत एजेंट के इंजेक्शन द्वारा कैथेटर के स्थान का परीक्षण ।
  7. Vasodilation बढ़ाने के लिए कैथेटर के माध्यम से १०० माइक्रोग्राम नाइट्रोग्लिसरीन के एक इंट्राधमनी इंजेक्शन प्रशासन ।
  8. एंजियोग्राम के दौरान vasodilation के साथ सहायता करने के लिए कैथेटर के माध्यम से खरगोश के लिए 1% lidocaine के ०.८ मिलीलीटर प्रशासन । इंजेक्टर के लिए ट्यूबिंग कैथेटर के लिए देते हैं और लाइन में किसी भी हवा बुलबुले को दूर । इसके विपरीत मीडिया के 8-9 मिलीलीटर इंजेक्षन कैथेटर के माध्यम से स्वचालित एंजियोग्राफिक सुई लगानेवाला का उपयोग कर ।
  9. एंजियोग्राफी का उपयोग कर हिंद अंगों के रिकॉर्ड धारावाहिक छवियों ।
    1. पावर इंजेक्टर सेट करने के लिए 3 मिलीलीटर पर इसके विपरीत सुई 8-9/ 6 फ्रेम प्रति सेकंड पर डिजिटल घटाव एंजियोग्राफी करते हैं ।
    2. धारावाहिक बनाया छवियों का चयन करें और लगभग-४०% हड्डी की उपस्थिति को कम करने और इसके विपरीत के साथ पोत छिड़काव की पूरी तस्वीर पर कब्जा करने के लिए सेटिंग का उपयोग कर प्रत्येक एंजियोग्राम की एक तस्वीर को बदलने । एक उदाहरण के लिए ऊरु धमनी का युग्मन/उच्छेदन के बाद संवहनी प्रवाह के एंजियोग्राम चित्र 1में दिखाया गया है.

4. ऊरु धमनी का अलगाव

  1. एक स्केलपेल (#15 ब्लेड) का उपयोग कर सही ऊरु धमनी पर त्वचा में एक अनुदैर्ध्य चीरा बनाओ । सुनिश्चित करें कि चीरा (लगभग 6 सेमी) पटेला करने के लिए बस समीपस्थ क्षेत्र में समाप्त वंक्षण स्नायु से inferiorly फैली हुई है ।
  2. ऊरु धमनी का पर्दाफाश करने के लिए घुमावदार मेजेंबॉम कैंची या एक घुमावदार मच्छर हेमोस्टेट के साथ कुंद विच्छेदन का उपयोग करें ।
  3. Weitlaner retractors का प्रयोग करें चीरा खुला पकड़ो ।
  4. तंत्रिका जलन को कम करने और vasodilation को बढ़ावा देने के लिए स्थानीय रूप से 1% lidocaine के ०.५ मिलीलीटर जोड़ें ।
  5. जारी रखने के ऊतकों के कुंद विच्छेदन ऊरू धमनी की सभी शाखाओं, अवर अधिजठर, गहरी ऊरु, पार्श्व circumflex, और सतही अधिजठर धमनियों सहित के साथ ऊरु धमनी की पूरी लंबाई मुक्त करने के लिए (चित्रा 2a) .
  6. जानुपृष्ठीय और saphenous धमनियों के साथ-साथ बाहरी श्रोणि धमनी (चित्रा 2a) के साथ आगे काटना । ऊतकों को नुकसान से बचाने के लिए लवणीय के साथ क्षेत्र को आवधिक रूप से गीला करें । यदि कुंद विच्छेदन ऊरु नाली (मांसपेशियों के बीच) के साथ किया जाता है कोई मांसपेशी में कटौती की जरूरत है ।
  7. चित्र 2ण्2, ब्में दर्शाए अनुसार शिरा तथा तंत्रिका से धमनी को सावधानीपूर्वक पृथक करें । लिगेट धमनी को काटने के लिए उनके बीच पर्याप्त जगह के साथ दो संबंध रखकर ४.० रेशम टांके के साथ आरेख द्वारा संकेत दिया धमनियों । इन संबंधों को एक सर्जन के चार वर्ग समुद्री मील के बाद गांठ के साथ प्रदर्शन कर रहे हैं ।
  8. छोटे Metzenbaum कैंची का उपयोग ligated धमनियों पर दो संबंधों के बीच कट. उत्पाद बाह्य श्रोणी धमनी की एक शाखा के रूप में उसके समीपस्थ मूल से ऊरु धमनी को उस बिंदु तक, जहाँ यह सफ़लयुक्त और पूलीय धमनियां बनाती है

5. दोहराना एंजियोग्राफी

  1. का प्रयोग करें 4-0 रेशम सीवन silastic चादर संलग्न करने के लिए, 3-mm स्टेनलेस स्टील गेंद के साथ quadriceps मांसपेशियों के ऊपरी भाग के लिए । गेंद के बाद यह जगह में है पर त्वचा खींचो ।
  2. Vasodilation बढ़ाने के लिए कैथेटर के माध्यम से १०० माइक्रोग्राम नाइट्रोग्लिसरीन के एक इंट्राधमनी इंजेक्शन प्रशासन ।
  3. यदि आवश्यक हो, तो एंजियोग्राम के दौरान vasodilation के साथ सहायता करने के लिए कैथेटर के माध्यम से खरगोश के लिए 1% lidocaine के एक और ०.८ मिलीलीटर प्रशासन ।
  4. इसके विपरीत एक स्वचालित एंजियोग्राफिक सुई लगानेवाला का उपयोग कर मीडिया के 8-9 मिलीलीटर सुई ।
  5. चरण ३.९ में वर्णित के रूप में एंजियोग्राफी करते हैं ।

6. घाव बंद करने और वसूली

  1. कैथेटर को दाईं धमनी से निकालें । 4-0 रेशम सीवन कि धमनी के आसपास पहले से ही जगह में है का उपयोग धमनी टाई ।
  2. सीवन दोनों घाव बंद कर दिया । बंद मांसपेशी और अवोपत्वचीय परतों का उपयोग 4-0 polydioxanone या 3-0 polyglactin ९१० एक टेपर सुई पर ( सामग्री तालिकादेखें) एक सतत सीवन पैटर्न में । एक दफन लगातार अवोपत्वचीय सीवन पैटर्न में ( सामग्री की तालिकादेखें) एक रिवर्स काटने सुई पर 4-0 polydioxanone या 4-0 polyglactin ९१० का उपयोग कर त्वचा को बंद करें ।
    नोट: यदि उपलब्ध हो, polydioxanone दोनों के लिए पसंद किया जाता है ।
  3. एक 25 ग्राम सुई के साथ एक सिरिंज का उपयोग कर चीरों के पास ०.२५% bupivacaine के intradermal इंजेक्शन प्रशासन । सुई डालें और सुई वापस खींच लिया है, जबकि ०.५ मिलीलीटर सुई । गर्दन पर चीरा के लिए घाव के प्रति एक इंजेक्शन दे (गर्दन पर दो इंजेक्शन) और पैर पर चीरा (पैर पर चार इंजेक्शन के लिए घाव के प्रति साइड दो इंजेक्शन, कुल में छह इंजेक्शन) । कुल इंजेक्शन मात्रा 3 मिलीलीटर (०.५ मिलीलीटर एक्स 6 इंजेक्शन) है ।
  4. ०.५ मिग्रा/किग्रा मेलऑक्सेकम और सतत् रिलीज बुप्रेनोमॉर्फिन के चमड़े के नीचे के इंजेक्शन ०.१२ मिग्रा/किग्रा में प्रशासित करें ।
  5. यह संज्ञाहरण से ठीक के रूप में खरगोश की निगरानी । जब यह संज्ञाहरण से जाग खरगोश स्वचालित रूप से निगल करने के लिए शुरू कर देंगे । निगलने की प्रतिक्रिया होती है एक बार, अंत: श् वासनली नली को हटा दें । बंद निगरानी और थर्मल समर्थन प्रदान जब तक खरगोश को हृदय समारोह और शरीर के तापमान को बनाए रखने में सक्षम है । एक बार जब यह प्रदक्षिणा करने में सक्षम हो जाए तो खरगोश को अपने बाड़े में लौटा दे ।
  6. नए सिरे से सब्जियां और/या एक क्रिटिकल केयर आहार के चमड़े के नीचे खारा इंजेक्शन के साथ खिला यदि खरगोश सर्जरी के बाद चाउ बर्दाश्त नहीं करता है । मौसमी सब्जियों में बंदगोभी, ब्रोकली, फूलगोभी, गाजर या अन्य का इस्तेमाल किया जा सकता है । सब्जियों shred और उंहें एक साथ मिश्रण करने के लिए खाने के लिए लौट खरगोश में सहायता ।

7. मॉनिटरिंग

  1. दोनों पैरों पर रक्तचाप के अधिग्रहण के लिए कदम २.८ में वर्णित के रूप में हर दो सप्ताह खरगोशों को संवेदनीकरण । रक्त रसायन में उपयोग के लिए कान की केंद्रीय धमनी से फसल रक्त assays हैं । वैकल्पिक रूप से, saphenous नस या शिरस्य नस से रक्त ले लो । प्रत्येक समय बिंदु पर लगभग 2 मिलीलीटर लें । विश्लेषण के लिए एक मानक रक्त रसायन विज्ञान पैनल का उपयोग करें । यदि आवश्यक हो, तो कम घनत्व लिपोप्रोटीन (एलडीएल), उच्च घनत्व लिपोप्रोटीन (एचडीएल), या हीमोग्लोबिन A1c (HbA1c) के लिए परीक्षण जोड़ें ।
  2. बीजीएल मापन के लिए बहुत कम मात्रा में रक्त लें ।

8. उपचार

  1. इलाज, कैरियर, और crosslinker के साथ दस सीरिंज तैयार करते हैं । प्रत्येक सिरिंज बस से पहले १०० μL कैल्शियम सल्फेट घोल के साथ उपयोग करने के लिए और फिर वृद्धि कारकों या अन्य उपचार के साथ 2% सोडियम alginate के १०० μL इस तरह है कि alginate सिरिंज के टिप निकटतम है ।
  2. अगली तैयारी से पहले एक तैयार इंजेक्शन को पेशी में व्यवस्थापित करे । इससे वह समय कम हो जाता है, जब ऐल्जिनेट सिरिंज में कैल्शियम सल्फेट के साथ इंटरैक्ट करता है । अंतरिक्ष इंजेक्शन समान रूप से जांघ पर ऊरु धमनी के दोनों किनारों के साथ । एक समान इंजेक्शन प्राप्त करने के लिए, छेद के साथ एक सिलिकॉन शीट बनाने के लिए इंजेक्शन गाइड, के रूप में अंय अध्ययनों में वर्णित19। यह आसानी से व्यावसायिक रूप से उपलब्ध सिलिकॉन कनवास में छेद बनाने के लिए एक बायोप्सी पंच का उपयोग करके तैयार किया जा सकता है ।

9. समापन बिंदु एंजियोग्राफी, इच्छामृत्यु, छिड़काव निर्धारण और ऊतक हार्वेस्ट

  1. समापन बिंदु दिनांक पर, चरण 3 में वर्णित के रूप में एंजियोग्राफी करते हैं लेकिन उपयोग के लिए बाईं कैरोटिड धमनी का प्रयोग करें ।
  2. एंजियोग्राफी के बाद, जानवर necropsy मेज पर ले जाएँ और पश्च अंग के ऊतकों को संरक्षित करने के लिए छिड़काव निर्धारण करते हैं:
    1. 3% – 4% करने के लिए isoflurane बढ़ाएँ और संज्ञाहरण की पुष्टि करने के लिए एक पैर की अंगुली चुटकी प्रदर्शन पर्याप्त गहरी है.
    2. 1000-2000 के IU हेपरिन अंतःशिरा प्रशासन ।
    3. Ribcage के मिडलाइन के साथ एक चीरा बनाने और एक #20 ब्लेड के साथ एक स्केलपेल का उपयोग कर डायाफ्राम की लंबाई में फैले ।
    4. रिब पिंजरे के साथ उजागर, पसलियों सिर्फ मिडलाइन के बाएं रिब कटर का उपयोग कर काट दिया । दिल का पर्दाफाश करने के लिए Weitlaner retractors का प्रयोग करें ।
    5. 1/8 इंच के एक भीतरी व्यास और अंत में एक 18G सुई के साथ उत्पादन टयूबिंग के साथ पंप सेट करें । लाइन को लवणीय से प्रीलोड करें और इसके लिए पर्फ्यूजन के लिए अलग कंटेनर में कम से ६०० एमएल का नमकीन और फॉर्मेलिन तैयार किया है ।
    6. 18 जी सुई पंप करने के लिए दिल के शीर्ष के माध्यम से बाईं वेंट्रिकल में जुड़ा डालें । एक और 18 ग्राम सुई डालें (कुछ भी करने के लिए unअनुलग्नित) सही atrium में और रक्त necropsy मेज के downdraft में बाहर बहने के लिए अनुमति देते हैं ।
    7. दिल में लगभग ५०० मिलीलीटर खारा के प्रवाह को नियंत्रित करने के लिए एक छिड़काव पंप का प्रयोग करें । एक पंप सेटिंग का उपयोग करने के लिए प्रवाह ११० मिलीलीटर/
    8. एक बार दिल से आ द्रव स्पष्ट है, एक 10% फॉर्मेलिन समाधान के साथ भरा करने के लिए खारा जलाशय से टयूबिंग हटो । अगर छिड़काव ठीक से काम कर रहा है तो चारों अंगों में हिल जाएगा । बाएं वेंट्रिकल में फॉर्मेलिन समाधान के लगभग ५०० मिलीलीटर पंप ।
    9. पंप बंद और दिल से सुई हटा दें ।
  3. #20 ब्लेड के साथ एक स्केलपेल के साथ कूल्हे के जोड़ के चारों ओर काटने के द्वारा कूल्हे पर दोनों हिंद अंग निकालें । हाथ-पैरों को हटाने के लिए एक छोटा सा रिब कटर का इस्तेमाल करें । एक नियंत्रण के रूप में गैर ischemic अंग का प्रयोग करें ।
  4. इन अंगों को 4 ° ब् पर 24 ज के लिए फार्मेलिन में संग्रहित करें और फिर ७०% एथेनॉल में 4 ° ब् पर भंडारित किया जाए ।
  5. हिस्टोलॉजिकल विश्लेषण के लिए, हाथ पैरों से कई बायोप्सी ले । हम दोनों अंगों में जांघ और बछड़े के पार क्षेत्रों में लिया आठ 6 मिमी बायोप्सी का इस्तेमाल किया है ।
    नोट: जबकि टखने रक्तचाप माप और एंजियोग्राफी रक्त के प्रवाह की वसूली को मापने के लिए सबसे अधिक इस्तेमाल किया तरीके हैं, अन्य तरीकों डॉपलर अल्ट्रासाउंड, लेजर डॉपलर इमेजिंग, अवरक्त सहित जानवरों की वसूली को ट्रैक करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता थर्मोग्राफी६२, माइक्रोस्फीयर निर्धारित छिड़काव६३,६४, गणना टोमोग्राफी (सीटी) इमेजिंग, और चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग (एमआरआई)६५।

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Representative Results

मधुमेह और ०.१% कोलेस्ट्रॉल आहार की दीक्षा के प्रेरण के बाद, खरगोशों के लिए मधुमेह और कोलेस्ट्रॉल आहार के साथ कुल कोलेस्ट्रॉल था १२३.३ ± ३५.१ मिलीग्राम/डीएल (n = 6 नर खरगोशों) औसत कुल समय अंक और खरगोशों । इन खरगोशों के लिए बीजीएल स्तर २४८.३ ± ५०.४ mg/dL (n = 6 नर खरगोश) था । एक ठेठ खरगोश में रक्त chemistries और पैर रक्तचाप अनुपात के लिए एक समय पाठ्यक्रम में एक उच्च कोलेस्ट्रॉल आहार (1% कोलेस्ट्रॉल) के तहत खरगोशों की तुलना में चित्रा 3 में दिखाया गया है । गैर में मधुमेह जानवरों, यहां तक कि उच्च कोलेस्ट्रॉल के साथ, हमने पाया है कि वहां इस्कीमिक अंग में रक्तचाप की वसूली में वृद्धि हुई थी और अंतिम समय बिंदु पर एंजियोग्राम में vascularity वृद्धि (चित्रा 3) । उच्च कोलेस्ट्रॉल/वसा आहार पर पशुओं को भी लिपोप्रोटीन के स्तर में वृद्धि दिखाई, जिगर पर तनाव का सुझाव । इस प्रकार, कोलेस्ट्रॉल के एक निचले स्तर के साथ मधुमेह अध्ययन के समापन बिंदु पर अधिक समझौता छिड़काव के लिए नेतृत्व किया । Histologically, वहां मांसपेशी संरचना में सूजन और कुछ स्थानों में इस्कीमिक नुकसान 4 चित्राके साथ संगत में परिवर्तन कर रहे हैं । कुछ मामलों में, एक परिवर्तन का पालन कर सकते हैं/पेशी ischemia के कारण फाइबर में नुकसान । यह नुकसान या ऊतकीय विश्लेषण में मांसपेशी फाइबर के विघटन के रूप में मनाया जा सकता है, कुछ हिंद अंग में चूहों में ischemia मॉडल में देखा गया है । हालांकि, ऊतक प्रसंस्करण के ऊतकीय कलाकृतियों से इन परिवर्तनों को अलग करने के लिए देखभाल की जरूरत है । एक प्रकार का अखरोट और α Sma के लिए immunostaining जहाजों और ऊतक वर्गों में बड़े जहाजों की संख्या की पहचान करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है (चित्रा 4). कुल मिलाकर, एक निचले स्तर के कोलेस्ट्रॉल आहार के साथ मधुमेह का उपयोग मॉडल मधुमेह के बिना उच्च कोलेस्ट्रॉल आहार मॉडल पर रक्त दबाव और वाहिकीयकरण में repeatable घाटे का उत्पादन किया ।

Figure 1
चित्र 1: एक मधुमेह और गैर-मधुमेही खरगोश पूर्व शल्य चिकित्सा के पश्च अंग के लिए एंजियोग्राम, सर्जरी के बाद और ऊरु धमनी निषेध और काटना के बाद ७० दिनों के लिए वसूली के बाद. (क) इस्कीमिक अंग (बाएं) और contralateral नियंत्रण अंग (दाएं) की एंजियोग्राम । (ख) लिगेशन स्थल पर इस्कीमिक अंग की बढ़ी हुई छवि । इस आंकड़े का बड़ा संस्करण देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें ।

Figure 2
चित्रा 2: हेमोरल धमनी निषेध और उच्छेदन के माध्यम से खरगोश में हिंद अंग ischemia के प्रेरण । (क) खरगोश हिंद अंग के संवहनी एनाटॉमी का चित्रण । धमनियों ligate करने के लिए चिह्नित सभी बिंदुओं पर जगह संबंधों. संशोधित और७१अनुमति के साथ प्रयुक्त । (ख) लिटिगेशन से पूर्व ऊरु धमनी में कट को दिखाते हुए शल्यक्रियात्मक क्षेत्र । (ग) हिंद अंग के ischemia के लिए प्रेरित करने के लिए जगह में ligations के साथ ऊरु धमनियों । इस आंकड़े का बड़ा संस्करण देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें ।

Figure 3
चित्रा 3: ठेठ रक्तचाप और हिंद अंग मॉडल के पाठ्यक्रम पर ischemia के साथ खरगोश के लिए रक्त chemistries । मधुमेह के लिए प्रेरित किया गया था और मधुमेह के लिए एक ०.१% कोलेस्ट्रॉल आहार दिया । नॉन-डायबिटिक/एचसी ग्रुप को 1% कोलेस्ट्रॉल डाइट दी गई । बीजीएल = रक्त शर्करा का स्तर. टीसी = कुल कोलेस्ट्रॉल । LIPA = Lipoprotein (ए) । बीपी = इस्कीमिक और गैर इस्कीमिक अंग के बीच रक्तचाप अनुपात । इस आंकड़े का बड़ा संस्करण देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें ।

Figure 4
चित्र 4: मधुमेह खरगोशों में हिंद अंग की मांसपेशी का हिस्टोलॉजिकल विश्लेषण ७० दिनों के बाद ऊरु धमनी लिगेशन । H & E के रूप में अच्छी तरह से endothelial मार्कर के लिए immunohistochemical धुंधला, PECAM, और संवहनी चिकनी मांसपेशी सेल मार्कर, α Sma, किया गया धुंधला । ऊतक के नमूनों इस्कीमिक अंग और गैर-इस्कीमिक contralateral नियंत्रण अंग से biopsied किया थे । इस आंकड़े का बड़ा संस्करण देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें ।

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Discussion

हम मधुमेह और hyperlipidemia के साथ खरगोशों में हिंद अंग ischemia उत्प्रेरण के लिए एक पूर्व नैदानिक मॉडल प्रस्तुत किया है । कई अध्ययनों में, वहां की तकनीक को खरगोशों में हिंद अंग ischemia बनाने के लिए इस्तेमाल किया अस्पष्टता है । चूहों में, गंभीरता और हिंद अंग ischemia से वसूली स्थान बंधाव और तकनीक को ischemia प्रेरित इस्तेमाल पर अत्यधिक निर्भर है । इस काम में प्रस्तुत तकनीक का महत्व यह है कि यह ischemia के लगातार प्रेरण के लिए अनुमति देता है कि पूरी तरह से ठीक नहीं है 8 सप्ताह के बाद मधुमेह पशुओं में । विशेष रूप से, जब पशुओं के एक उच्च कोलेस्ट्रॉल और वसा आहार दिया गया, वे अंग रक्तचाप अनुपात के आधार पर आधारभूत स्तर को ठीक करने में सक्षम थे । इसके अतिरिक्त, उच्च वसा वाले आहार पर पशुओं जिगर की क्षति का सुझाव जिगर एंजाइमों में परिवर्तन किया था । इस प्रकार, कोलेस्ट्रॉल के एक निचले स्तर के साथ मधुमेह के मॉडल/वसा को अंग में पुरानी ischemia की एक अधिक सुसंगत और प्रासंगिक मॉडल प्रतीत होता है ।

मधुमेह की प्रेरण, एंजियोग्राफी, ऊरु धमनियों का सर्जिकल लिटिगेशन और इलाज के आवेदन सहित इस मॉडल के भीतर चार आवश्यक कदम उजागर किए जा सकते हैं । इन कदमों में, मधुमेह की प्रेरण एक सबसे महत्वपूर्ण कदम है और प्रत्येक प्रयोगशाला के लिए और अधिक अनुकूलन की आवश्यकता हो सकती है कि एक था । ऐलोक्शन इंजेक्शन की दर एक प्रमुख कारक है जो खरगोशों के लिए एलोक्सा द्वारा विषाक्तता और मधुमेह के प्रेरण की प्रभावशीलता को बदल करता है । जब भी जल्दी इंजेक्शन, alloxan BGL में अस्थिरता और खरगोशों में मौत का कारण बना । इस हाइपोग्लाइसीमिया के रूप में मनाया जा सकता है कि डेक्सट्रोज समाधान के इंजेक्शन के माध्यम से हल नहीं है या अन्य मामलों में अत्यंत उच्च bgl. अगर इंजेक्शन भी धीरे खरगोशों अक्सर मधुमेह हो असफल हो । यह संभव है कि इस पैरामीटर के लिए विभिंन स्रोतों से खरगोश के लिए अनुकूलित करने की आवश्यकता होगी । खरगोश आमतौर पर 1-3 h के लिए hyperglycemic हो जाएगा, लेकिन BGL तो ड्रॉप करने के लिए शुरू हो जाएगा । इसलिए, आमतौर पर कोई इंसुलिन मधुमेह प्रेरण के दिन प्रशासित है । हालांकि, यदि bgl नीचे गिरता है १०० mg/dL पहले 24 एच में, यह 5% डेक्सट्रोज समाधान के १०.० एमएल इंजेक्शन द्वारा बढ़ाया जा सकता है subcuके द्वारा या एक 10% डेक्सट्रोज समाधान के लिए पानी की आपूर्ति को बदलने से (आमतौर पर रात भर पर्याप्त है) । जब भी इंसुलिन एक अतिरिक्त BGL परीक्षण प्रशासित किया जाता है यह सुनिश्चित करने के लिए ग्लूकोज का स्तर बहुत कम बूंद नहीं है । इंसुलिन जवाबदेही अक्सर प्रत्येक खरगोश के लिए बदलता है. इस प्रकार, व्यक्तिगत खुराक रेजिडेंस कैसे खरगोश इंसुलिन का जवाब के आधार पर बीजीएल सामान्य करने के लिए उपयोग किया जाता है. मधुमेह आम तौर पर एलोक्शन इंजेक्शन के बाद 2-3 दिनों के बाद प्रेरित है.

परिधीय संवहनी रोग और अंग ischemia के एक पूर्व नैदानिक मॉडल के रूप में, प्रस्तुत मॉडल है कुछ संभावित सीमाएं हैं । एलोक्शन के साथ मधुमेह के प्रेरण प्रकार मैं मधुमेह का तेजी से विकास होता है । इस प्रकार द्वितीय मधुमेह है कि मानव रोगियों में सबसे अधिक प्रचलित है की पुरानी विकास के विपरीत है । इसके अलावा, ischemia तीव्रता से शल्य चिकित्सा के कारण के बजाय संवहनी रोग और atherosclerotic सजीला टुकड़े के जीर्ण विकास के कारण विकसित की है । खरगोश का उपयोग करने की एक मौलिक सीमा एक पशु मॉडल के रूप में उनकी कमजोरी है । जानवरों केवल प्रकार मैं मधुमेह के साथ संयोजन में hyperlipidemia की एक सीमित मात्रा में बर्दाश्त करेंगे और पशु मरने के बिना रोग की अधिकतम राशि का अनुकूलन इस प्रोटोकॉल बनाने में एक प्रमुख लक्ष्य था. हमारे समूह hypothesized है कि परिधीय ischemia के साथ रोगियों एंजियोजेनिक वृद्धि कारकों के लिए चिकित्सीय प्रतिरोध का विकास और यह है कि यह विकास कारक की विफलता में एक प्रमुख भूमिका निभा सकता है ischemia६६के लिए चिकित्सा विज्ञान आधारित है । यह अंत करने के लिए, हम कोशिका की सतह proteoglycans और पशु और मानव ऊतक नमूनों में heparanase में वृद्धि में एक नुकसान दिखाया गया है५५,५८,६७,६८,६९,७० . यह अज्ञात है कि खरगोश मॉडल यहां वर्णित वृद्धि कारक प्रतिरोध को दर्शाता है, हालांकि अवलोकन है कि वहां अब मधुमेह के साथ शब्द ischemia और उच्च hyperlipidemia मॉडल की तुलना में उदारवादी hyperlipidemia मॉडल का सुझाव होगा रेवेस्कलेजेशन प्रक्रिया में कुछ कमी है ।

मॉडल में उपचार के शामिल करने के लिए, यह एक वसूली ischemia के प्रेरण के बाद की अवधि के लिए महत्वपूर्ण है के लिए तीव्र चिकित्सा चरण के हस्तक्षेप के बिना होने की अनुमति है । यदि चिकित्सा इस समय के दौरान दिया जाता है, प्रतिक्रिया अधिक तीव्र ischemia के बजाय पुरानी ischemia कि परिधीय संवहनी रोग विशेषता प्रतिक्रिया बढ़ाने के लिए प्रासंगिक होगा । इस तरह के एक मॉडल आघात या घनास्त्रता में तीव्र इस्कीमिक चोट के लिए प्रासंगिक हो सकता है, लेकिन संभावना पुराने इस्कीमिक के साथ अच्छा संबंध प्रदान नहीं करेगा । स्वस्थ पशुओं और नैदानिक परीक्षणों के परिणामों में ischemia के पूर्व नैदानिक मॉडल में सकारात्मक परिणाम के बीच गरीब सहसंबंध को देखते हुए, मधुमेह या एक और पहलू है कि संवहनी उत्थान कम कर देता है के लिए प्रयास करने के लिए आवश्यक है की शामिल मानव में अंग ischemia भविष्य के उपचार के निर्माण के लिए संक्षेप ।

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Disclosures

लेखकों के पास खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।

Acknowledgments

लेखक कृतज्ञता रक्षा विभाग कांग्रेसतौर पर निर्देशित अनुसंधान कार्यक्रम (DOD CDMRP के माध्यम से धन की पुष्टि; W81XWH-16-1-0582) और लेखक भी अमेरिकन हार्ट एसोसिएशन (17IRG33410888) के माध्यम से धन स्वीकार करते हैं, DOD CDMRP (W81XWH-16-1-0580) और स्वास्थ्य के राष्ट्रीय संस्थानों (1R21EB023551-01, 1R21EB023551-01A1; 1R01HL141761-01) ABB करने के लिए ।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
0.9% Sodium Chloride Henry Schein Medical 1537468 / 1531434 250 mL bag / 1000 mL irrigation btl
1 mL Syringe VWR BD309628
10 mL Syringe VWR BD309695
10% Formalin Fisher-Scientific 23-245684
18G Needle VWR 89219-294
20G Needle VWR 89219-340
25G Needle VWR 89219-290
27G Needle VWR 89219-288
5 mL Syringe VWR BD309646
5% Dextrose Patterson Veterinary 07-800-9689
Acepromazine Patterson Veterinary VEDC207
Alfaxalone Patterson Veterinary 07-891-6051
Alginate Sigma-Aldrich PHR1471-1G
Alloxan Monohydrate Sigma-Aldrich A7413
Angiography Equipment Toshiba Infinix-i
Angiography Injector Medrad
Anti-Mouse Ab Alexa 594 Thermo Fisher Scientific A-11032 Secondary Antibody for IHC
Anti-Rabbit Ab Alexa 488 Thermo Fisher Scientific A-11008 Secondary Antibody for IHC
a-SMA Antibody Abcam ab5694 Primary Antibody for IHC
Baytril Bayer Animal Health 724089904201 Enrofloxacin
Blood Chemistry Panel IDEXX 2616 Rabbit Panel
Blood Pressure Cuff WelchAllyn Flexiport Disposable BP Cuff-infant size 7
Blood Pressure Monitor Vmed Technology Vmed Vet-Dop2
Bupivacaine Henry Schein Medical 6023287
Buprenorphine Patterson Veterinary 42023017905
Buprenorphine SR ZooPharm
Calcium Sulfate CB Minerals Food and Pharmaceutical Grade USP and FCC
Chlorhexidine Scrub Patterson Veterinary 07-888-4598
Chloroform Fisher-Scientific C298-4
Cholesterol Sigma-Aldrich C8503
DAPI Thermo Fisher Scientific 62248
Ear Vein Catheter Patterson Veterinary SR-OX165 Surflo IV catheters
Endotracheal tube Patterson Veterinary Sheridan Brand, Depends on Rabbit Size
Glucometer Amazon B001A67WH2 Accu-Chek Aviva
Glucometer Test Strips McKesson Medical-Surgical 788222 Accu-Chek Aviva Plus
Guidewire Boston Scientific 39122-01
Hair Clippers Amazon B000CQZI3Q Oster #40 blade
Heating Pad Cincinnati Subzero 273
Heating Pad Pump Gaymar Gaymar T/Pump
Hemostat Fine Science Tools 13009-12 Curved Mosquito Hemostat
Heparin Patterson Veterinary
Insertion Tool Merit Medical Systems MAP550 metal wire insertion tool
Insulin HPB Pharmacy Novalin R & Novalin N
Insulin Syringes McKesson Medical-Surgical 942674
Introducer Cook Medical G28954 3F Check Flo Performer Introducer
Isoflurane Henry Schein Medical 1100734
Ketamine Patterson Veterinary 856440301
Lactated Ringers McKesson Medical-Surgical 186662
Lidocaine McKesson Medical-Surgical 239936
Lidocaine/Prilocaine cream McKesson Medical-Surgical 761240
Ligaloop V. Mueller CH117 / CH116 White Mini / Yellow Mini
Mazola Corn Oil Amazon B0049IIVCI
Medrad Syringe McKesson Medical-Surgical 346920 150 mL
Meloxicam Patterson Veterinary
Metal ball sutures Ethicon-Johnson & Johnson K891H 4-0 silk C-1 30"
Metzenbaum Scissors Fine Science Tools 14019-13
Midazolam Henry Schein Medical 1215470
Nitroglycerin McKesson Medical-Surgical 927528
PECAM Antibody Novus Biologicals NB600-562 Primary Antibody for IHC
Perfusion Pump Masterflex
Pigtail Catheter Merit Medical Systems 1310-21-0053 3F pigtail
Polydioxanone (PDS II) suture McKesson Medical-Surgical 129271 4-0 taper RB-1 (needle comes on suture)
Polydioxanone (PDS II) suture McKesson Medical-Surgical 129031 4-0 reverse cutting FS-2
Polyglactin 910 (Vicryl) suture Butler 7233-41 3-0 taper RB-1
Polyglactin 910 (Vicryl) suture McKesson 104373 4-0 reverse cutting FS-2
Rabbit Chow (Alfalfa) LabDiet 5321
Rabbit Restrainer VWR 10718-000
Rib Cutters V. Mueller
Scalpel Fine Science Tools 10003-12
Scalpel Blade Fine Science Tools 10015-00 #15 blade
Silk Sutures Ethicon-Johnson & Johnson A183H 4-0 silk ties 18"
Stainless Steel Ball McMaster-Carr 1598K23 3-mm diameter
Surgical Drapes Gepco 8204S
Syringe Pump DRE Veterinary Versaflow VF-300
Visipaque contrast media McKesson Medical-Surgical 509055
Weitlaner Retractor Fine Science Tools 17012-13

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References

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दवा मुद्दा १४८ हिंद अंग ischemia परिधीय धमनी रोग परिधीय संवहनी रोग खरगोश मधुमेह hyperlipidemia एंजियोग्राफी
पूर्व नैदानिक मॉडल पश्च अंग के Ischemia मधुमेह खरगोशों में
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Sligar, A. D., Howe, G., Goldman, J., Felli, P., Karanam, V., Smalling, R. W., Baker, A. B. Preclinical Model of Hind Limb Ischemia in Diabetic Rabbits. J. Vis. Exp. (148), e58964, doi:10.3791/58964 (2019).

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