Encyclopedia of Experiments: Biology
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- 해부 접시에 마취 성인 비행으로 시작. 집게와 흉부에 의해 비행을 잡고 집게의 두 번째 쌍을 사용하여 복부의 후면 끝을 엽니 다. 성인 파리에는 일반적인 요관을 통해 용기에 수렴하는 두 쌍의 말피기안 튜블러 또는 MT가 있기 때문에, MT를 풀어주기 위해 비행장에서 뒷다리를 잡아 당깁니다.
튜블러를 장착하려면 유리 막대를 요관 아래에 밀어 넣고 MT를 폴리 L-L-리신 코팅 슬라이드로 옮기습니다. 요관을 누르고 조심스럽게 MTs 를 통해 막대를 쓸어 넣어 해부 된 장기를 부착. 슬라이드에 폴리 L-lysine 바인딩 튜벌의 음전하 세포에 사용할 수있는 양충전 된 사이트의 수를 증가시켜 첨부 파일을 촉진합니다.
- 이 절차를 시작하려면, 각 면에 하나의 클램프와 이미징 현미경 단계에 납땜 도움 손 클램프의 두 세트를 배치. 다음, 유입 선과 진공 연결 유출 라인에 각각의 구부러진 유리 모세 혈관을 삽입.
진공 그리스를 천장 테이프에 퍼뜨리고 접착제 관류를 테이프에 잘 분배하여 그리스로 바닥을 코팅합니다. 그 다음, 각 표본 우물을 소수성 그리스로 추적상태로 두는 관류 우물을 제거합니다. 그 후, 200 마이크로리터의 실온 iPBS 또는 곤충 인산염 완충식 살린살을 폴리 L-리신 코팅 슬라이드에 잘 둘러싸고 있는 기름에 놓습니다. 그리고 마취 된 단일 여성 비행을 전송합니다.
집게 세트로 흉부로 날아가서 다른 쪽을 사용하여 후방 복부를 부드럽게 잡습니다.
그런 다음 두 번째 MT 세트가 복부에서 자유로울 때 미세한 집게로 우터의 내부 MT를 꼬집습니다. 튜벌레가 양쪽으로 떨어질 수 있도록 우레 아래 막대를 슬라이딩하여 유리 막대를 밀어 당겨 유리 막대로 무료 전방 MT를 집어 들십시오.
우레를 슬라이드 위로 똑바로 내려놓고, 요관을 유리 슬라이드에 더 눌러 MT의 탈순 렌즈의 순서와 씰을 부착합니다. 유리 막대의 미세한 끝을 사용하여 슬라이드 표면을 가로질러 각 튜블러를 부드럽게 쓸어 버립니다.
- 이 기술의 성공은 전적으로 전방 말피기안 튜블러의 정확한 식별 및 신중한 처리에 달려 있습니다.
- 다음으로, 접착제 관류를 슬라이드에 다시 배치하여 작은 유체로 채워진 작은 튜브를 형성합니다. 그 후, 현미경 단계에 표본을 배치합니다.
