Montaggio di cervelli drosofili adulti: un metodo per preparare diapositive per l'imaging confocale
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Kelly, S.M., et al. J. Vis. Exp. (2017).
Questo video descrive un metodo per montare cervelli intatti da mosche adulte sotto una diapositiva del ponte e mostra il protocollo eseguito su cervelli immunososteniati per microscopia fluorescente.
Protocol
Questo protocollo è un estratto da Kelly et al., Dissezione e colorazione immunofluorescente del corpo dei funghi e dei neuroni fotorecettori nei cervelli adulti drosofilia melanogaster, J. Vis. Exp. (2017). 1. Montaggio di cervelli D. melanogaster adulti su diapositive al microscopio e imaging Costruisci una diapositiva “ponte”. Posizionare due copripasci “base” distanti circa 1 cm su uno scivolo caricato positivamente. Assicurarsi che il lato ca…
Representative Results
Figura 1: Montaggio di cervelli in preparazione per l’imaging ad immunofluorescenza. (A) I cervelli sono montati su diapositive SuperFrost Plus con una copertura del ponte per evitare l’appiattimento del cervello. Due slip di copertura “base” vengono aderito a una diapositiva caricata positivamente Superfrost Plus con smalto chiaro per unghie e cervelli sezionati vengono quindi posizionati sullo scivolo t…
Materials
| Microdissection forceps/tweezers | Ted Pella | 505-NM | |
| VectaShield | Vector Labs | H-1000 | |
| SuperFrost Plus Slides | ThermoFisher | 99-910-01 | |
| Coverslips | ThermoFisher | 12-553-454 | |
| fingernail polish | Electron Microscope Services (EMS) | 72180 | |
| stereomicroscope | Leica S6D with KL300 LED light source | ||
| Kimwipe | Fisher | 06-666 |
Cite This Article
Mounting Adult Drosophila Brains: A Method to Prepare Slides for Confocal Imaging. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20106, doi: (2023).