Montage von Adult Drosophila Brains: Eine Methode zur Vorbereitung von Dias für konfokale Bildgebung

Abstract

Quelle: Kelly, S.M., et al. Dissektion und Immunfluoreszenz Färbung von Pilzkörper und Photorezeptor Neuronen in Erwachsenen Drosophila melanogaster Gehirne. J. Vis. (2017).

Dieses Video beschreibt eine Methode zur Montage intakter Gehirne von erwachsenen Fliegen unter einer Brückenfolie und zeigt das Protokoll, das an immunbefleckten Gehirnen für die fluoreszierende Mikroskopie durchgeführt wird.

Protocol

Dieses Protokoll ist ein Auszug aus Kelly et al.,Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains, J. Vis. Exp. (2017). 1. Montage von Adult D. melanogaster Gehirnen auf Mikroskop-Dias und Imaging Erstellen Sie eine “Brücke”-Folie. Positionieren Sie zwei “Basis” Abdeckungen etwa 1 cm voneinander entfernt auf einem positiv geladenen Schlitten. Stellen Sie sicher, dass die p…

Representative Results

Abbildung 1: Montage von Gehirnen zur Vorbereitung der Immunfluoreszenz-Bildgebung. (A) Gehirne sind auf SuperFrost Plus-Dias mit einer Brückenabdeckung montiert, um eine Abflachung des Gehirns zu verhindern. Zwei “Basis”-Abdeckungsslips werden auf einem Superfrost Plus positiv aufgeladenen Schlitten mit klarem Fingernagellack aufgehängt und sezierte Gehirne werden dann auf die Folie zwischen ihnen gele…

Materials

Microdissection forceps/tweezers	Ted Pella	505-NM
VectaShield	Vector Labs	H-1000
SuperFrost Plus Slides	ThermoFisher	99-910-01
Coverslips	ThermoFisher	12-553-454
fingernail polish	Electron Microscope Services (EMS)	72180
stereomicroscope	Leica S6D with KL300 LED light source
Kimwipe	Fisher	06-666