Montering av voksne Drosophila-hjerner: En metode for å forberede lysbilder for konfokal avbildning
Published: April 30, 2023
Abstract
Kilde: Kelly, S.M., et al. Disseksjon og immunfluorescent Farging av sopplegeme og fotoreseptor Neurons i voksen Drosophila melanogaster Hjerner. J. Vis. Utt. (2017).
Denne videoen beskriver en metode for montering av intakte hjerner fra voksne fluer under en brosklie og viser protokollen som utføres på immunosterte hjerner for fluorescerende mikroskopi.
Protocol
Denne protokollen er et utdrag fra Kelly et al.,Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains, J. Vis. Exp. (2017). 1. Montering av voksne D. melanogasterhjerner på mikroskopsklier og bildebehandling Bygg et “bro”-lysbilde. Plasser to “base”-deksler omtrent 1 cm fra hverandre på et positivt ladet lysbilde. Kontroller at den positivt ladede siden av lysbildet vender opp…
Representative Results
Figur 1: Montering av hjerner som forberedelse til immunfluorescensavbildning. (A) Hjerner er montert på SuperFrost Plus lysbilder med et brodeksel for å forhindre sammenslåing av hjernen. To “base” cover slips er festet til en Superfrost Plus positivt ladet lysbilde med klar neglelakk og dissekerte hjerner blir deretter plassert på lysbildet mellom dem. En klar “bro” dekkslipp er plassert over hjerne…
Materials
| Microdissection forceps/tweezers | Ted Pella | 505-NM | |
| VectaShield | Vector Labs | H-1000 | |
| SuperFrost Plus Slides | ThermoFisher | 99-910-01 | |
| Coverslips | ThermoFisher | 12-553-454 | |
| fingernail polish | Electron Microscope Services (EMS) | 72180 | |
| stereomicroscope | Leica S6D with KL300 LED light source | ||
| Kimwipe | Fisher | 06-666 |
Cite This Article
Mounting Adult Drosophila Brains: A Method to Prepare Slides for Confocal Imaging. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20106, doi: (2023).