Montering av vuxna Drosophila-hjärnor: En metod för att förbereda bilder för konfokal avbildning
Published: April 30, 2023
Abstract
Källa: Kelly, S.M., et al. Dissekering och immunofluorescerande färgning av svamp kropp och fotoreceptor nervceller i vuxna Drosophila melanogaster hjärnor. J. Vis. Exp. (2017).
Denna video beskriver en metod för montering av intakta hjärnor från vuxna flugor under en brobild och visar protokollet som utförs på immunostained hjärnor för fluorescerande mikroskopi.
Protocol
Detta protokoll är ett utdrag från Kelly et al., Dissekering och Immunofluorescent Staining of Mushroom Body och Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains, J. Vis. Exp. (2017). 1. Montering av vuxna D. melanogasterhjärnor på mikroskopbilder och bildbehandling Bygg en “bridge”-bild. Placera två “bas” täcken ungefär 1 cm från varandra på en positivt laddad glidning. Se till att den positivt laddade sidan av bilden är vä…
Representative Results
Figur 1: Montering av hjärnor som förberedelse för immunofluorescensavbildning. (A) Hjärnor är monterade på SuperFrost Plus-diabilder med ett broskydd för att förhindra platta till hjärnan. Två “bas” täckslipsar följs på en Superfrost Plus positivt laddad bild med klar nagellack och dissekerade hjärnor placeras sedan på glidningen mellan dem. En tydlig “bro” täckslip placeras ovanför hjä…
Materials
| Microdissection forceps/tweezers | Ted Pella | 505-NM | |
| VectaShield | Vector Labs | H-1000 | |
| SuperFrost Plus Slides | ThermoFisher | 99-910-01 | |
| Coverslips | ThermoFisher | 12-553-454 | |
| fingernail polish | Electron Microscope Services (EMS) | 72180 | |
| stereomicroscope | Leica S6D with KL300 LED light source | ||
| Kimwipe | Fisher | 06-666 |
Cite This Article
Mounting Adult Drosophila Brains: A Method to Prepare Slides for Confocal Imaging. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20106, doi: (2023).