Overview
यह वीडियो बताता है कि कैसे स्वतंत्र रूप से चलने मक्खियों को ट्रैक करने के लिए उनके सामांय लोकोमोशन क्षमता का आकलन । विशेष रुप से प्रदर्शित प्रोटोकॉल वीडियो ट्रैकिंग सॉफ्टवेयर का उपयोग करके परख के सेटअप और डेटा विश्लेषण को दर्शाता है।
Protocol
यह प्रोटोकॉल सूर्य और चेन से एक अंश है, जो ड्रोसोफिला, जे विस एक्सपी (2017) में क्रोनिक ट्रॉमेटिक एंसेफेलोपैथी मॉडल के लिए एक उपन्यास विधि है।
1. वीडियो-असिस्टेड मूवमेंट ट्रैकिंग
- ट्रैकिंग अखाड़ा बनाने के लिए पारदर्शी सिलिकॉन इलास्टोमर के साथ 6-सेमी व्यास पेट्री डिश भरें। मक्खियों को स्वतंत्र रूप से चलने की अनुमति देने के लिए सिलिकॉन और डिश ढक्कन के बीच 3 मिमी जगह छोड़ दें लेकिन उड़ने की अनुमति दें।
- हर बार नकली या इलाज समूह से चार मक्खियों को एनेस्थेटाइज करें और उन्हें अखाड़े में रखें। मक्खियों को 1 घंटे के लिए 22 डिग्री सेल्सियस पर छोड़ दें।
- एरेनास के ऊपर चार्ज-युग्मित डिवाइस (सीसीडी) कैमरा रखें और 5 मिनट के लिए रिकॉर्ड करें।
- सीटीएएक्स सॉफ्टवेयर (कैलटेक से स्वतंत्र रूप से उपलब्ध) का उपयोग करके रिकॉर्ड किए गए आंदोलन प्रक्षेप पथ का विश्लेषण करें। एक प्रोग्रामिंग भाषा (जैसे, Matlab) संगत प्रारूप में ट्रैक डेटा निर्यात और प्रति फ्रेम कूच दूरी के आधार पर डेटा का विश्लेषण । प्रत्येक मक्खी के लिए मतलब चलने की दूरी की गणना करें और इसे अन्य सभी रिकॉर्ड की गई मक्खियों/समूह के साथ गठबंधन करें ताकि एक ही समूह में फाइलों की आबादी द्वारा यात्रा की गई एक औसत संचयी दूरी प्राप्त की जा सके ।
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Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
60 mm Petri Dishes | Fisher Scientific | FB0875713A | Used as a tracking arenas |
Flow Regulator | Genesee Scientific | 59-122WC | |
Fine Brush | Genesee Scientific | 59-204 | |
Flypad | Genesee Scientific | 59-114 | |
Sylgard Silicone Elastomer | Dow Corning | 4019862 | |
CCD Camera | Microsoft | HD-5000 | |
Ctrax Walking Fly Tracker | Caltech | Ctrax 0.2.11 | |
MATLAB Image Processing Toolbox | MATLAB | R2015b |