Denne video beskriver en teknik til at forberede brystkræft celleprøver til metabolit profilering. Brystkræftceller behandles med østradiol, som binder sig til østrogenreceptoren alpha og forårsager ændringer i metabolittens sammensætning.
Protocol
1. Metabolomics Assay Prøve Forberedelse Cellekultur og -behandling Frø 400.000 MCF7 celler pr 10 cm plade i vækstmedium. Til hver behandling forberedes tre prøver. Brug to plader i hver prøve til at modtage nok celler til detektionen. På dag 3 fjernes mediet og tilsættes 5 ml frisk medium med eller uden 10-8 M Østradiol eller E2 til cellerne. Cellerne behandles i 24 timer (37 °C i befugtet 5% CO2-atmosfære). Eksempel på indsamling Der tils…
Sample Preparation for Metabolomics: A Method to Prepare Cell Samples for Metabolite Profiling. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20227, doi: (2023).