성인 Zebrafish의 생물 화학 분석을위한 혈액 수집
Summary
본 논문은 Zebrafish의 지느러미 대동맥에서 혈액을 수집하는 기술을 선물한다. 그것은 또한 콜레스테롤과 트리 글리세 라이드 수준을 결정하기위한 시험과 같은 생화 학적 분석에 사용을 위해 혈청을 얻기위한 지침을 제공합니다.
Abstract
zebrafish는 여러 인간의 질병 연구를위한 동물 모델로 사용되었습니다. 그것은 분자 이벤트 및 치료 전략의 공부뿐만 아니라 일부 pathologies 1의 생리적 메커니즘을 평가하기위한 강력한 잠복기 플랫폼으로 검색할 수 있습니다.
연구자들이 zebrafish 시스템의 탐사를 허용하는 데 필요한 기본적인 기법 3 부족한 것을 추측하는 위험성이있다 장기 및 시스템 2의 성인 zebrafish의 생리학에 관련된 상대적으로 몇 가지 간행물이 있습니다. zebrafish의 Hematologic 생화학 값은 첫 번째 1999 년 Jagadeeswaran 및 동료에 의해 기술된 혈액 수집 기술을 채용 Murtha 및 동료의 사에 의해 2003 년에보고되었다. 간단히, 혈액은 길이 약 0.3 cm는 지느러미 대동맥 5 지역에서, 가로 절개를 통해 micropipette 팁 통해 수집되었다. 참여하는 순간 차원이 때문에고도로 숙련된 실천을 요구하는 고정밀도의 기술이다. 동일한 기술은 같은 해에 6에있는 다른 간행물에 동일한 그룹에 의해 사용되었다. 2010 년에는 Eames와 동료 zebrafish 7 전체 혈당 수준을 평가. 그들은 가위로 해고당하는 것까지을 수행하고 가슴 분절로 heparinized microcapillary 수거 튜브를 삽입하여 혈액에 접속할 수있었습니다. 그들은 작품 Kilpatrick 외 토대로 적절한 보관 온도로 해결되었다 용혈 어려움을 언급. 8. 저희 연구실에서 Jagadeeswaran의 기술을 사용하려고 시도하면, 우리는 모음이 시작되기 전에 손실되는 혈액의 상당량을 허용하지 않기로 정확하게 올바른 장소에 절개를 만들기 위해 어려운 것으로 나타났습니다.
최근 굽타 외 9.는 성인 zebrafish 기관, Kinkle 외 해부하는 방법을 설명했다. 10 intraperiton을 수행하는 방법을 설명eal 주사, 그리고 Pugach 외. 11 역전사 궤도 주사를 수행하는 방법을 설명했다. 그러나, 더 많은 작품은보다 완벽하게 zebrafish 연구를위한 기본적인 기술을 탐구하는 데 필요합니다.
zebrafish의 작은 크기는 실험 모델로 이용하여 연구자에 대한 도전을 선물한다. 또한 규모의이 소 주어, 그것은 단순한 기술이 연구자들이 zebrafish 모델의 장점을 탐험 수 있도록 개발된 것이 중요합니다.
Protocol
Discussion
본 논문은 zebrafish 실험에 더 이상 혈액 및 혈청 분석을 수있는 간단한 방법을 제공합니다. 이 기술은 혈액 매개 변수 데이터를 필요로하는 미래의 zebrafish hematologic 연구에 기여할 수있는 잠재력을 가지고 있습니다. 그것은 또한 실험적인 모델로서 zebrafish의 큰 어플 리케이션을 위해 허용해야합니다.
이 기술은 특별한 기술이나 정밀한 기술의 구현을 필요로하지 않습니다. 또…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
FIPE / HCPA – Fundo 드 Incentivo Pesquisa 전자 Eventos
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
| Low retention tips | Applied Biosystems | 022493020 | |
| Eppendorf Centrifuge 5415D | Eppendorf | Discontinued |
References
- Schneider, A. C. R., dos Santo, J. L., Porawski, M., Schaefer, P. G., Maurer, R. L., Matte, U., da Silveira, T. R. Implementação de um novo modelo de experimentação animal Zebrafish. Rev. HCPA. 29, 100-103 (2009).
- Briggs, J. P. The zebrafish: a new model organism for integrative physiology. Am. J. Physiol. Regulatory Integrative Comp. Physiol. 282, 3-9 (2002).
- Menke, A. L., Sptsbergen, J. M., Wolterbeek, A. P. M., Woutersen, R. A. Normal anatomy and histology of adult Zebrafish. Toxicologic Pathology. 000, 1-16 (2011).
- Murtha, J. M., Qi, W., Keller, E. T. Hematologic and serum biochemical values for Zebrafish. Comp. Med. 53, 37-41 (2003).
- Jagadeeswaran, P., Sheehan, J. P., Craig, F. E., Troyer, D. Identification and characterization of zebrafish thrombocytes. Br. J. Haematol. 107, 731-738 (1999).
- Jagadeeswaran, P., Sheehan, J. P. Analysis of blood coagulation in the zebrafish. Blood Cells Mol. Dis. 25, 239-249 (1999).
- Eames, S. C., Philipson, L. H., Prince, V. E., Kinkel, M. D. Blood sugar measurement in zebrafish reveals dynamics of glucose homeostasis. Zebrafish. 7, 205-213 (2010).
- Kilpatrick, E. S., Rumley, A. G., Rumley, C. N. The effect of haemolysis on blood glucose meter measurement. Diabet. Med. 12, 341-343 (1995).
- Gupta, T., Mullins, M. C. Dissection of Organs from the Adult Zebrafish. J. Vis. Exp. (37), e1717 (2010).
- Kinkel, M. D., Eames, S. C., Philipson, L. H., Prince, V. E. Intraperitoneal Injection into Adult Zebrafish. J. Vis. Exp. (42), e2126 (2010).
- Pugach, E. K., Li, P., White, R., Zon, L. Retro-orbital Injection in Adult Zebrafish. J. Vis. Exp. (34), e1645 (2009).
