Abstract
elektriksel uyarıların içine ışık dönüşümü dış retina oluşur ve çubuk ve koni fotoreseptör ve retina pigment epiteli (RPE) hücreleri tarafından büyük ölçüde gerçekleştirilir. RPE fotoreseptör ve ölüm ya da RPE hücrelerinin disfonksiyonu yaşa bağlı makula dejenerasyonu (YBMD), insanlar yaş 55 ve üzeri kalıcı görme kaybının önde gelen nedeni karakteristik için kritik destek sağlamaktadır. AMD için bir tedavi tespit edilmiş olmakla birlikte, hasta göze sağlıklı RPE implantasyonu etkili bir tedavi olduğu ortaya çıkabilir ve RPE hücreleri, çok sayıda hali hazırda, pluripotent kök hücreleri elde edilebilir. RPE hücre teslim ve güvenliğine ilişkin birçok ilginç sorular hala hayvan modellerinde incelenebilir ve RPE enjekte için kullanılan kabul görmüş protokoller geliştirilmiştir. Burada açıklanan teknik çeşitli çalışmalarda çoklu gruplar tarafından kullanılan ve ilk keskin iğne ile göz delik oluşturarak içerir. Bir blu ile daha sonra bir şırıngaHücre yüklü nt iğne deliğinden sokulur ve hafifçe RPE temas edene kadar vitröz geçirilir. Nispeten basittir ve çok az ekipman gerektirmektedir, bu enjeksiyon yöntemi kullanarak, hayvan modellerinde fotoreseptör dejenerasyonu önemli miktarda önleyen ana RPE arasında kök hücre türetilmiş RPE hücreleri, tutarlı ve etkili bir entegrasyon sağlamak. Gerçek protokolünün bir parçası değildir, biz de enjeksiyon, ve nasıl hücreler in vivo görüntüleme yöntemleri kullanarak subretinal boşluğa enjekte edildi doğrulamak için neden olduğu travmanın boyutlarını belirlemek için nasıl açıklar. Son olarak, bu protokolün kullanılması RPE hücreleri ile sınırlı değildir; Bu retina altına doğru herhangi bir bileşik ya da bir hücre enjekte etmek için kullanılabilmektedir.
Protocol
NOT: Tüm hayvanlar Scripps Araştırma Enstitüsü tarafından kurulan etik kurallara uygun olarak tedavi edildi.
Enjeksiyon için Materyallerin hazırlanması 1. (~ 20 dk)
- Ön sıcak hücre ayrışma çözeltisi (tercihen serumu ile seyreltme yoluyla durdurulmuş olduğu bir), steril PBS ve kültür ortamı (Tablo 1).
- Demontaj ve 15 dakika için su içinde parça kaynatılmasıyla bir kör iğne ile şırınga sterilize edin.
Enjeksiyon için RPE Hücreler 2. Hazırlık (30 dakika saat 1)
- 37 ° C'de 5-8 dakika boyunca ön ısıtılmış hücre ayrışma çözeltisi kullanılarak RPE hücreleri ayırmak.
- Hala bağlı olduğu herhangi bir serbest bırakmak için hafifçe kazıyın hücreleri.
- Kültür ortamı büyük bir hacmi (15 ml tüp doldurmak) ayrışma çözümü inaktive ve onları saymak hücreleri seyreltin.
- Pelet hücreleri 5 dakika boyunca 800 x g'de santrifüjleyin.
- Steril, önceden ısıtılmış PBS / ml 200,000 hücreleri (0.5 ul hacim içinde 100,000 hücre sağlamak için) hücreleri yeniden süspanse edin ve bir 1.5 ml mikrosantrifüj tüpü içine transfer edin.
- İsteğe bağlı olarak, bir canlı hücre geçici floresan markörü ekleyebilir ve 30-45 dakika boyunca 37 ° C'de inkübe edin.
- Hücrelerden 0.5 ul, kör bir iğne şırınga yerleştirin. Kısa sürede hücreleri enjekte edilir.
3. Alt-retinal Enjeksiyon (~ Enjeksiyon başına 5 dakika)
NOT: Mümkünse Limbustan damarları görselleştirmek için çok daha kolay olduğundan, erişkin albino sıçanlar ile tekniğini öğrenmek. Daha kolay enjeksiyon yerinde görülmesini kolaylaştırmak için (hücreleri enjekte denemeden önce) öğrenme sırasında Hızlı Yeşil çözüm enjekte edilir.
- Kemirgen anestezisi. 100 mg / ml ketamin ve 10 mg / ml ksilazin (20 ul / 10 g vücut ağırlık intraperitoneal enjeksiyon kullanınizofluoran inhalasyon üzerinde sekiz) bu kemirgen manevra ve inhaler içinde burnu ile göz içine enjekte etmek zor olduğundan.
- Hayvan derinden pençeleri birini kısma anestezi emin olun. O geri çekildiğinde ise, birkaç dakika daha bekleyin ve subretinal enjeksiyon başlamadan önce tekrar deneyin.
- Enjekte edilecek göz tavan bakacak şekilde onun yüzüne kemirgen yerleştirin.
- Göz soketi (geçici propitozisin) biraz dışarı açılır ve sadece kulak üstünde ve çene ile ve yavaşça göz kapaklarının deri paralel germek iki parmak ile başını tutarak daha erişilebilir hale böylece mikroskop altında cildi nazikçe germek çok göz hafifçe soketten açılır ki (Şekil 1C bakınız). Boğaz çok yakın kemirgen tutmayın.
- 30 G keskin tek ön-sterilize iğne ile, gemiler isabet eğer, kanama olacak b (hemen limbusun altında bir delik yapmakönemli e ve daha sonra delik bulmak zor olabilir) ve bir açıyla iğne (Şekil 1D) ile lensi dokunmamak için. Meydana gelecek keskin (ya da künt) iğne veya acil katarakt oluşumu ile lensi dokunmaktan kaçının.
NOT: Enjeksiyon iki kişi ile daha iyi çalışır. Bu şekilde bir kişi onlar delik olduğu odaklanmak korumak için keskin tek iğne ile ilk delik oluşturduktan sonra enjeksiyon yapan kişiye künt iğne ile şırınga iletebilirsiniz. - Kafasına kavrama korurken göz atılabilir keskin iğne geri çekin. Delik tam olarak nerede unutmayın.
- Ya bir micromanipulator bir künt bir iğne ile ön-yüklü şırınga montaj veya elle tutarak, lensi dokunma ve hafifçe göz aracılığıyla itmek için değil yine dikkat çekici, delikten künt iğne ile şırınga ucu ekledikten sonra çok yavaşça duygu direnci (Şekil 1D) kadar.
- Kminimumda tüm hareketleri eeping, dikkatle yavaş yavaş subretinal boşluğa RPE hücreleri enjekte.
NOT: RPE / retinanın ayrılması bağlı olacak; Bu kaçınılmazdır. Bununla birlikte, daha temiz bir enjeksiyon dekolmanı en aza indirir ve büyük ölçüde yeniden takılması (Şekil 1E) şansını arttırır. Herhangi abartılı hareketler retina geri iğneyi hareket edebilir, ve yanlara hareketler retinaya zarar edebilirsiniz. bir enjeksiyon pompasının kullanılması isteğe bağlıdır fakat çok hassas bir teslimat sağlar. - Yavaş yavaş şırınga geri çekin. Göz nemlendirici uygulayın hidrate göz tutmak düşer.
- Sternal yatma kavuşur kadar hayvan izlemeye devam edin. Gözetimsiz bırakmayın hayvan veya sternum yatma kavuşur kadar diğer uyarı hayvanlarla bir kafes iade etmeyin.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Biz bu yazıda anlatılan tekniği kullanarak hızlı ve tutarlı kemirgenler subretinal boşluğa RPE hücrelerinin bir süspansiyon sunabilirsiniz. Gerekli olmamakla beraber, travmalar büyük ölçüde Şekil 1A ve B, bir mikromanipülatör ile gösterilen düzeneği kullanılarak en aza indirilebilir. Geçici propitozlar Şekil 1C'de gösterildiği gibi, kemirgen tutun. mikromanipülatör veya elle yapıldığı takdirde adımlar aynıdır; Bu Şekil 1D karikatür tasvir edilir. Etiketli RPE hücreleri temiz yapılan floresan zaman bir cSLO ve Ekim sistemi (Şekil 2) kullanılarak görülebilir kaynaklı retina dekolmanı kullanılarak tespit edilebilir. Şekil 3'te, bir cSLO (retina altı, enjeksiyondan hemen sonra yakalanmış Şekil 2 ve Şekil 3 ile ilgili görüntüler) birden çok, tüm enjeksiyon ve ürün çevresinde görüntü yakalamak için kullanılmıştır. M dekolmanı Notmerkez görüntüleri (3-5) derin (ama şiddetli) ost.
Şekil 1. subretinal enjeksiyon platformu ve enjeksiyon tekniği bir karikatür tasviri. (A) Delik diseksiyon mikroskobu tutturmak için metal bir plakaya açılmıştır. (B) manyetik stand A mikromanipülatör ve enjeksiyonlar sırasında konumunun dışına hareket ettirilebilir. (C) kemirgen tutun geçici propitozlar için gösterildiği gibi. ( Gözün temel yapılardan D) tasvir (D;. Bir delik sadece limbus ve mercek altında keskin bir tek iğne ile göz yapılır) 3,4 basamak (d,. 3.6 Adım), kör bir iğne deliğine sokulur ve taban tabana zıt retina boyunca yavaşça RPE dokunana kadar (D, adım 3.8). hücrelerinin enjeksiyonu, geçici bir ret indüklerinal dekolmanı. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Şekil 2. fundus görüntüleri subretinal enjeksiyondan sonra doğrudan alınan. (A) Sağ panelde (IR ve FAF görüntülerin bindirme) gözlenen yeşil floresan (B) nöral retinanın Retina dekolmanı. Geçici floresan işaretleyici ile etiketlenmiş iPS-RPE hücreleri yayılan ve RPE enjeksiyon yakın görülmektedir (ok ile işaretli) subretinal enjeksiyondan sonra site. (A) yıldız optik sinir etiketler. (Bu rakam KROHNE ark orijinal formatında yayınlanamaz ediliyor. 21) Ölçek çubuğu = 200 mikron h tıklayınızere bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için.
Biz enjeksiyon yeri çevresinde birden fazla görüntü yakalayabilir bir Ekim aygıtı kullanma doğrudan enjeksiyondan sonra enjeksiyon yerinde çevresindeki Ekim kullanılarak in vivo görüntüleme. Şekil 3. dekolmanı enjeksiyonu ve ölçüde etkinliğini hem de belirlemek için. Bu örnekte en az dekolmanı görülür (görüntülerin 3-5 özellikle şişme olarak görülen). Ölçek barlar = 200 mikron
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Bu yazıda sıçanlarda ve farelerde süspansiyon RPE hücrelerinin subretinal enjeksiyonları gerçekleştirmek için nispeten basit bir yöntem tarif. protokol az travmalarda tercüme edecek tekniği ile öğrenmesi kolay ve daha deneyim (Şekil 3, bu iyi enjeksiyon birini temsil) bir mikromanipülatör (Şekil 1A) kullanıldığında, özellikle. Herhangi bir travma, bir cSLO ve Ekim sistemi (Şekil 2) varsa in vivo izlenebilir. Yüksek çözünürlük ve daha az gürültülü görüntüler istenirse, sanat görüntüleme platformları devlet kemirgen hastalık modellerinde 39-41 OCT gerçekleştirmek için mükemmel protokolleri ile birlikte mevcuttur.
Bu teknik ile ilgili en sık görülen komplikasyonlar koroid kanamalar neden aşırı retina dekolmanı uyaran, ameliyat sırasında hayvanın uygunsuz konumlandırma kaynaklanan ve iğneden RPE hücrelerinin reflü. Konumlandırılmış iseuygunsuz, ilk delik oluşturmak için zor olacak, hatta zor sonra bulmak için. Gözün kaydırılması imkansız künt iğne ile penetrasyon yapma, delik belirsiz olabilir. O keskin iğne ile bir delik yapmak mümkün olsa da, bu daha travmayı yaratır. Seslendirilmiş retina dekolmanı ciddi görme kaybına neden olabilir. Müfrezeler retina nöronlar ve glia karakteristik morfolojik değişikliklere neden; reaktif gliozis ve retina yeniden bu kombinasyonları fotoreseptör hücre ölümünü 42 teşvik edebilir. Çok fazla baskı künt ucu ile şırınga ile uygulanır Son olarak, eğer koroid kanaması kaynaklı olabilir. Çok fazla basınç uygulanırsa bu örnekleri nadir olmasına rağmen, RPE ve oluşabilir Bruch membran ve bazı iPS-RPE atılım, koroid görülebilir. Retina ve vitreus içine enjekte RPE hücrelerinin Reflü daha sık görülür ve önlemek zordur. Bu enjektörler geri çekilmesi ile en aza indirilebilirge enjeksiyonundan sonra çok yavaş bir şekilde kör iğne ile (bu konuda mikromanipülatör son derece yararlıdır).
Alanında kullanılan diğer teknikler daha sofistike ama (inceleme için Ramsden ark. 30), aynı zamanda çok daha zorlu. Bu sklera, koroid ve RPE ile ters yönde keskin bir iğne sokarak retina altına süspansiyon hücreleri enjekte etmek mümkündür. Bu teknik önemli ölçüde daha fazla uygulama ve uzmanlık gerektirir; hakim kadar, RPE hücrelerinin çoğu koroid veya retina içine enjekte ve subretinal alana entegre asla olacak. (Aynı zamanda, gözün sınırlı erişimi nedeniyle, bu yaklaşım, insan hastalarda kullanım için uygun değildir.) Bu, polarize RPE 43 bozulmamış tek tabakaları implante edilmesi de mümkündür. Bu yarık içinden retina altında, ya da suni bir gözenekli alt-tabaka ve insertin üzerinde büyüyen hücreler tarafından RPE hücreleri bir tabakanın unrolling yoluyla yapılırsubretinal boşluğa gr hem hücreler ve protez. Bu tekniklerin avantajları RPE hücreleri implantasyon üzerine "tekrar polarize" gerek yok gibi ortada, ve retina içine kaçmak RPE hücrelerinin pigmente alanlarda potansiyel oluşumu büyük ölçüde 16,44 önlenebilir. Ancak, bu cerrahi teknikler doğal daha karmaşıktır. Bundan başka, insanlarda, RPE ve protez, bir lazer ile dağlanmış gereken bir yarık içinden makula altında eklenir gerekir. Bu koterize bölgenin etrafında retina dejenerasyonu neden olur.
Burada açıklanan protokol kullanılarak avantajı, güvenilirlik gerçekleştirilen bilgi edinmek için en kolay ve RPE yanı sıra diğer bileşikler ya da hücre sunmak için kullanılabilir olmasıdır. Ayrıca, (hücreleri sunmak için künt iğne yerine keskin iğne kullanarak) hafif değişiklikler, bu aynı tekniği intravitral hücreleri veya ilaç sunmak için kullanılabilir. BizBu teknikle tutarlı sonuçlar Chieve ve deneyim yoluyla ve in vivo görüntüleme izleme yoluyla tekniği ile ilgili travmayı en aza indirmek için öğrendim.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 2-Mercaptoethanol (55 mM) | Gibco | 21985-023 | 50 ml x 1 |
| Cell Scapers | VWR | 89260-222 | Case x 1 |
| CellTracker Green CMFDA | Molecular Probes | C34552 | 50 µg x 20 |
| DPBS, no calcium, no magnesium | Gibco | 14190-144 | 500 ml x 1 |
| Fast Green | Sigma-Aldrich | F7258 | 25 g x 1 |
| Genteal Geldrops Moderate to Severe Lubricant Eye Drops | Walmart | 4060941 | 25 ml x 1 |
| Hamilton Model 62 RN SYR | Hamilton | 87942 | Syringe x 1 |
| Hamilton Needle 33 G, 0.5", point 3 (304 stainless steel) | Hamilton | 7803-05 | Needles x 6 |
| Knockout DMEM | Gibco | 10829-018 | 500 ml x 1 |
| KnockOut Serum Replacement | Gibco | 10828-028 | 500 ml x 1 |
| L-Glutamine 200 mM | Gibco | 25030-081 | 100 ml x 1 |
| Magnetic Stand | Leica Biosystems | 39430216 | Stand x 1 |
| MEM Non-Essential Amino Acids Solution 100X | Gibco | 11140-050 | 100 ml x 1 |
| Micromanipulator | Leica Biosystems | 3943001 | Manipulator x 1 |
| Penicillin-Streptomycin (10,000 U/ml) | Gibco | 15140-122 | 100 ml x 1 |
| Slip Tip Syringes without Needles BD (3 ml) | VWR | BD309656 | Pack x 1 |
| Specialty-Use Needles BD (30 G, 1") | VWR | BD305128 | Box x 1 |
| TrypLE Express Enzyme (1X), no phenol red | Gibco | 12604013 | 100 ml x 1 |
References
- Bird, A. C. Therapeutic targets in age-related macular disease. The Journal of Clinical Investigation. 120 (9), 3033-3041 (2010).
- Jong, P. T. Age-related macular degeneration. Med, N. . E. ngl. J. . 355 (14), 1474-1485 (2006).
- Abe, T. Auto iris pigment epithelial cell transplantation in patients with age-related macular degeneration: short-term results. The Tohoku Journal Of Experimental Medicine. 191 (1), 7-20 (2000).
- Algvere, P. V., Berglin, L., Gouras, P., Sheng, Y. Transplantation of fetal retinal pigment epithelium in age-related macular degeneration with subfoveal neovascularization. Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. 232, 707-716 (1994).
- Binder, S. Outcome of transplantation of autologous retinal pigment epithelium in age-related macular degeneration: a prospective trial. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 45 (11), 4151-4160 (2004).
- Binder, S. Transplantation of autologous retinal pigment epithelium in eyes with foveal neovascularization resulting from age-related macular degeneration: a pilot study. Am. J. Ophthalmol. 133 (2), 215-225 (2002).
- Juan, E., Loewenstein, A., Bressler, N. M., Alexander, J. Translocation of the retina for management of subfoveal choroidal neovascularization II: a preliminary report in humans. Am. J. Ophthalmol. 125 (5), 635-646 (1998).
- Falkner-Radler, C. I. Human retinal pigment epithelium (RPE) transplantation: outcome after autologous RPE-choroid sheet and RPE cell-suspension in a randomised clinical study. British Journal of Ophthalmology. 95 (3), 370-375 (2011).
- Joussen, A. M. How complete is successful 'Autologous retinal pigment epithelium and choriod translocation in patients with exsudative age-related macular degeneration: a short-term follow-up' by Jan van Meurs and P.R. van Biesen. Graefes. Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. 241 (12), 966-967 (2003).
- Lai, J. C. Visual outcomes following macular translocation with 360-degree peripheral retinectomy. Arch. Ophthalmol. 120 (10), 1317-1324 (2002).
- Machemer, R., Steinhorst, U. H. Retinal separation, retinotomy, and macular relocation: II. A surgical approach for age-related macular degeneration? Graefes. Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. 231 (11), 635-641 (1993).
- MacLaren, R. E. Autologous transplantation of the retinal pigment epithelium and choroid in the treatment of neovascular age-related macular degeneration. Ophthalmology. 114 (3), 561-570 (2007).
- Peyman, G. A. A technique for retinal pigment epithelium transplantation for age-related macular degeneration secondary to extensive subfoveal scarring. Ophthalmic Surgery. 22 (2), 102-108 (1991).
- Buchholz, D. E. Derivation of functional retinal pigmented epithelium from induced pluripotent stem cells. Stem Cells. 27 (10), 2427-2434 (2009).
- Carr, A. J. Molecular characterization and functional analysis of phagocytosis by human embryonic stem cell-derived RPE cells using a novel human retinal assay. Mol. Vis. 15 (4), 283-295 (2009).
- Carr, A. J. Protective effects of human iPS-derived retinal pigment epithelium cell transplantation in the retinal dystrophic rat. PLoS One. 4 (12), e8152 (2009).
- Hirami, Y. Generation of retinal cells from mouse and human induced pluripotent stem cells. Neurosci Lett. 458 (3), 126-131 (2009).
- Idelson, M. Directed differentiation of human embryonic stem cells into functional retinal pigment epithelium cells. Cell Stem Cell. 5 (4), 396-408 (2009).
- Klimanskaya, I. Derivation and comparative assessment of retinal pigment epithelium from human embryonic stem cells using transcriptomics. Cloning Stem Cells. 6 (3), 217-245 (2004).
- Kokkinaki, M., Sahibzada, N., Golestaneh, N. Human Induced Pluripotent Stem-Derived Retinal Pigment Epithelium (RPE) Cells Exhibit Ion Transport, Membrane Potential, Polarized Vascular Endothelial Growth Factor Secretion, and Gene Expression Pattern Similar to Native RPE. Stem Cells. 29 (5), 825-835 (2011).
- Krohne, T. Generation of retinal pigment epithelial cells from small molecules and OCT4-reprogrammed human induced pluripotent stem cells. Stem Cells Translational Medicine. 1 (2), 96-109 (2012).
- Lund, R. D. Human embryonic stem cell-derived cells rescue visual function in dystrophic RCS rats. Cloning Stem Cells. 8 (3), 189-199 (2006).
- Meyer, J. S. Modeling early retinal development with human embryonic and induced pluripotent stem cells. Proceedings of the National Academy of Sciences. 106 (39), 16698-16703 (2009).
- Osakada, F. In vitro differentiation of retinal cells from human pluripotent stem cells by small-molecule induction. J. Cell Sci. 122 (17), 3169-3179 (2009).
- Vugler, A. Elucidating the phenomenon of HESC-derived RPE: anatomy of cell genesis, expansion and retinal transplantation. Exp. Neurol. 214 (2), 347-361 (2008).
- Westenskow, P. D. Using flow cytometry to compare the dynamics of photoreceptor outer segment phagocytosis in iPS-derived RPE cells. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 53 (10), 6282-6290 (2012).
- Zarbin, M. A. Current concepts in the pathogenesis of age-related macular degeneration. Arch. Ophthalmol. 122 (10), 598-614 (2004).
- Li, Y., et al. Long-term safety and efficacy of human-induced pluripotent stem cell (iPS) grafts in a preclinical model of retinitis pigmentosa. Molecular Medicine. 18, 1312-1319 (2012).
- Wang, N. K. Transplantation of reprogrammed embryonic stem cells improves visual function in a mouse model for retinitis pigmentosa). Transplantation. 89 (8), 911-919 (2010).
- Ramsden, C. M. Stem cells in retinal regeneration: past, present and future. Development. 140 (12), 2576-2585 (2013).
- Schwartz, S. D. Embryonic stem cell trials for macular degeneration: a preliminary report. The Lancet. 379 (9817), 713-720 (2012).
- Carr, A. J. Development of human embryonic stem cell therapies for age-related macular degeneration. Trends in Neurosciences. 36 (7), 385-395 (2013).
- Westenskow, P., Friedlander, M. Ch. 111. The New Visual Neurosciences. Werne, J. S., Chalupa, L. M. , The MIT Press. Cambridge, MA. 1611-1626 (2013).
- Westenskow, P., Sedillo, Z., Friedlander, M. Efficient Derivation of Retinal Pigment Epithelium Cells from iPS. J. Vis. Exp. , Forthcoming Forthcoming.
- Furhmann, S., Levine, E. M., Friedlander, M. Extraocular mesenchyme patterns the optic vesicle during early eye development in the embryonic chick. Development. 127 (21), 4599-4609 (2000).
- Lu, B. Long-Term Safety and Function of RPE from Human Embryonic Stem Cells in Preclinical Models of Macular Degeneration). Stem Cells. 27 (9), 2126-2135 (2009).
- Zhao, T., Zhang, Z. -N., Rong, Z., Xu, Y. Immunogenicity of induced pluripotent stem cells. Nature. 474 (7350), 212-215 (2011).
- Eberle, D., Santos-Ferreira, T., Grahl, S., Ader, M. Subretinal transplantation of MACS purified photoreceptor precursor cells into the adult mouse retina. Journal Of Visualized Experiments. , e50932 (2014).
- Huber, G. Spectral domain optical coherence tomography in mouse models of retinal degeneration. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 50, 5888-5895 (2009).
- Kim, K. H. Monitoring mouse retinal degeneration with high-resolution spectral-domain optical coherence tomography. Journal of Vision. 53 (8), 4644-4656 (2008).
- Pennesi, M. E. Long-term characterization of retinal degeneration in rd1 and rd10 mice using spectral domain optical coherence tomography. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 53, 4644-4656 (2012).
- Fisher, S. K., Lewis, G. P., Linberg, K. A., Verardo, M. R. Cellular remodeling in mammalian retina: results from studies of experimental retinal detachment. Progress in Retinal And Eye Research. 24 (3), 395-431 (2005).
- Hu, Y. A novel approach for subretinal implantation of ultrathin substrates containing stem cell-derived retinal pigment epithelium monolayer. Ophthalmic Research. 48 (4), 186-191 (2012).
- Diniz, B. Subretinal implantation of retinal pigment epithelial cells derived from human embryonic stem cells: improved survival when implanted as a monolayer. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 54 (7), 5087-5096 (2013).
