Summary
Forståelse af de cellulære og molekylære mekanismer i re-endotelialisering efter arteriel blotlægning skade er af afgørende betydning for at forebygge blodpropper og restenose af arterierne. Her beskriver vi en protokol for reproducerbar arteriel blotlægning skade af den infrarenale abdominale aorta. Proceduren blev udviklet for at undersøge de underliggende mekanismer, der regulerer endotel regenerering under anvendelse musemodeller.
Abstract
Perkutane vaskulære indgreb ensartet medføre arterielle blotlægning skader, der efterfølgende fører til trombose og restenose. Disse komplikationer kan tilskrives nedskrivninger i re-endothelialisering inden sårkanterne. Men de cellulære og molekylære mekanismer i re-endotelialisering mangler at blive defineret. Mens flere dyremodeller til at studere igen endotelialisering efter arteriel blotlægning er til rådighed, er få udført i mus på grund af kirurgiske begrænsninger. Dette underminerer mulighed for at udnytte transgene muselinjer og undersøge bidraget fra specifikke gener til processen med re-endotelialisering. Her præsenteres en trin-for-trin-protokol til at skabe en meget reproducerbar musemodel af arteriel blotlægning skade i infrarenale abdominale aorta brug af ekstern vaskulær fastspænding. Immuncytokemisk farvning af beskadigede aorta for fibrinogen og β-catenin demonstrerer eksponeringen af en pro-thrombotisk overflade etd grænsen af intakt endotel, hhv. Fremgangsmåden præsenteres her har fordelene ved hastighed, fremragende samlede overlevelsesraten, og relativ tekniske problemer, hvilket skaber en enestående praktisk redskab til at pålægge arteriel blotlægning skade i transgene musemodeller. Ved hjælp af denne metode, kan efterforskerne belyse mekanismerne i re-endothelialisering under normale eller patologiske tilstande.
Introduction
Trombose og restenose er alvorlige tidlige og sene komplikationer hos patienter, der gennemgår perkutan vaskulære indgreb, såsom endovaskulær ballonudvidelse og stent 1,2. Adskillige strategier er blevet ansat til at løse disse komplikationer, især dobbelt trombocythæmmende terapi og narkotikarelaterede stents. Imidlertid har lidt fokus blevet placeret på den underliggende årsag til trombose og restenose, nemlig tabet af endothelcelledækning (blotlægning). Blotlægning skade er en uundgåelig konsekvens af interventionelle procedurer på grund af mekaniske traumer til blodkarvæggen. Denne mekaniske traumer kan resultere i skader og fjernelse af beskyttende endotel lag og eksponering af basalmembranen og vaskulære glatte muskulatur til cirkulerende blod 3. Tabet af endotelceller i disse områder skaber en pro-trombotiske eller pro-inflammatorisk miljø, der fremmer ikke blot blodpladeadhæsion og efterfølgende trombose, men enLSO stimulerer migration og proliferation af vaskulære glatte muskelceller, hvilket resulterer i neointimal fortykkelse og restenose 4. Disse komplikationer, og deres tilknyttede behandlinger, føre til betydelig sygelighed, især tilbagevendende iskæmisk sygdom og blødende begivenheder, der påvirker menneskers sundhed.
Re-endothelialisering af det blottede skade fra sårkanterne er af afgørende betydning for at forebygge blodpropper og restenose fem. Obduktionen resultater og dyremodeller har effektivt demonstreret nedsatte satser på trombose med dækningen af stent stivere 6,7. Drug-stents, udtænkt for at mindske satser restenose ved at hæmme den glatte muskulatur spredning og neointimahyperplasi, medføre betydelige nedskrivninger i arteriel re-endotelialisering og stigende satser for sent trombose 3. Desværre, forstå mekanismerne for re-endotelialisering har været en langsom proces, stort set begrænset af manglen på apmæssig dyremodeller 8.
Adskillige dyremodeller for at forstå de roller endotelceller og vaskulære glatte muskelceller følgende arteriel skade er blevet oprettet 7,9,10. Rotte carotidarterie ballonbeskadigelse model er bedst karakteriseret og er blevet anvendt til at undersøge virkningerne af blotlægning skade på brutto, cellulære og molekylære niveau 11. Ikke desto mindre er en særdeles reproducerbar musemodel af arteriel blotlægning skade med fremragende overlevelsesrater mangler og tiltrængt at drage fordel af flere transgene linier til rådighed for bedre at belyse vaskulær regeneration i flere indstillinger.
Dette håndskrift præsenterer en murin model for arteriel blotlægning skade, som er reproducerbar og enkel at udføre. Den fremgangsmåde har vist minimal sygelighed og dødelighed i flere transgene linjer. På grund af den brede antal genetisk modificerede mus linjer, kan denne model anvendes til atbelyse de molekylære mekanismer bag re-endothelialisering efter blotlægning skade.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
BEMÆRK: Denne protokol er godkendt af Udvalget for Animal Research ved University of California Los Angeles.
1. Præoperativ Forberedelse og Anæstesi
- Sørg for at overholde steril teknik under hele proceduren.
- Sterilisere alle kirurgiske forsyninger ved hjælp af en damp autoklave.
- Slå opvarmet gnaver kirurgisk platform før anæstesi induktion således at den kan opvarme til passende temperatur (37 ° C) og anbringes under stereomikroskop til visualisering under kirurgisk procedure.
- Placer musen i anæstesi induktion kammer og inducere med 4% isofluran ved en strømningshastighed på 1 l / min.
- overvåge forsigtigt respirationsfrekvens og trædepuden hudfarve af mus under induktion.
- Efter en nedgang af den respirationsfrekvens, fjerne musen fra induktion kammeret og sted på opvarmet pude til kirurgisk forberedelse med ansigtet i separat næsekegle og vedligeholdelse isofluran koncentration på 2,5%.
- Udfør tå knivspids for at vurdere tilstrækkeligheden af bedøvelsesmiddel.
- Påfør oftalmisk salve til hornhinderne og administrere præoperativ carprofen (5 mg / kg) subkutant.
- Placer mus liggende og bruge neglesaks til at fjerne hår fra maven.
- Forbered kirurgiske område med tre alternerende scrubs af povidon jod og 70% isopropylalkohol anvendes med sterile gaze puder.
- Placer musen liggende på opvarmet gnaver kirurgisk platform med ansigtet i næsekegle og sikre alle ekstremiteter og omhyggeligt stilling musen sådan at maven er synlig med stereomikroskop.
- Placer sterile, hæfteplastre langs hver kant af den fremstillede kirurgiske område.
- Titreres isofluran koncentration til at opretholde tilstrækkelig anæstesi under operationen og samtidig opretholde spontane respirations.
2. infrarenale aorta Fastspænding
- Foretag en 3 cm incision ned midterlinjen af maven ved anvendelse af en skalpel, startende approximately 0,5 cm ringere end den formet som et sværd proces.
- Forsigtigt trække huden med en pincet og dissekere hud væk fra bugvæggen ved hjælp fine saks til at klippe den fine bindevæv.
- Påfør 0,05-0,1 ml 0,5% bupivacain til musklen væg og lave en 2 cm indsnit i abdominalvæggen at blotlægge de abdominale organer.
- Hvis blødning opstår langs bugvæggen, tryk forsigtigt med en bomulds-spids applikator.
- Løft forsigtigt tarmene ved hjælp af saltvand-gennemblødt bomuld spids applikatorer.
BEMÆRK: Vær omhyggelig med at undgå traume til jejunum og ileum arterier og sted på en varm, sterilt saltvand gennemblødt gaze svamp uden bughulen.- Dæk tarmene med en anden varm, sterilt saltvand gennemblødt gaze svamp for at undgå fugttab.
- Placer en retractor til lateralize endetarmen og eksponere retroperitoneum.
- Placer små gaze puder som er nødvendigt for visualisering af retroperitoneum holde styr på antallet anvendes.
- På niveau med den nedre pol af højre nyre, bruge skarpe Dissecting pincet til at gøre en retroperitonotomy lateral til aorta.
BEMÆRK: Pas på ikke at skade den inferior vena cava eller de omkringliggende skibe.- Ligeud dissekere retroperitoneal væv fra aorta pas på ikke at perforere inferior vena cava eller omgivende kar.
- Placer vaskulære klemme over aorta i mindst 1 minut, eller en anden specificeret tid, og verificere okklusion ved visuelt at observere manglende pulsatility i distal aorta.
- Fjern den vaskulære klemme og kontrollere hæmostase. Hæmostase opnås og sikret, når der ikke aktivt ekstravasation af blod ses.
- Bekræft ekstravasation ved at tilsætte 0,5 ml saltvand i bughulen og vurdere, om saltvand bliver stadig blod-farvet. Hvis dette er tilfældet, tryk forsigtigt under anvendelse af saltvand-gennemblødt applikator i 1 minut for at sikrehæmostase.
- Fjern eventuelle gaze puder placeret til at hjælpe med visualisering af retroperitoneum og erstatte tarmene in situ i maven.
- Skyl bughulen under anvendelse forvarmet sterilt saltvand.
3. Lukning af Laparotomi og hud
- Luk bugvæggen muskel lag ved hjælp af en 5-0 flettet, absorberbar enkelt kører sutur.
- Tæt hud med 1-3 dråber polymerklæbemiddel og efterfølgende med sårklips når klæbemidlet er indstillet.
4. Inddrivelse og Postoperativ Assessment
- Overfør musen til et opsving bur på en varmepude med mad og vand på gulvet i buret.
- Nøje overvåge musen for tegn på åndedrætsbesvær. Indgiv carprofen (5 mg / kg) dagligt i 48 timer postoperativt pr institutionens retningslinjer.
- Lad ikke et dyr uden opsyn, indtil det har genvundet tilstrækkelig bevidsthed til at opretholde brystbenet recumBency.
- Retur musen til en normal bur med foder og vand.
- Må ikke returnere et dyr, der har gennemgået kirurgi til selskab med andre dyr, indtil fuldt tilbagebetalt.
- Vurdere sår på daglig basis for opspringning og fjern klip på postoperative dag 14.
5. aorta dissektion og farvning
- Vælg mus til offer baseret på den specifikke tid interessepunktet efter blotlægning skade.
- Sacrifice mus via isofluran inhalation og straks injicere med 5 mg methacholin chlorid til at forårsage vaskulær afslapning glatte muskulatur.
- Efter bekræftelse af døden ved respiratorisk ophør, manglende corneal refleks og mangel på bevægelse, perfundere med 4% paraformaldehyd i phosphatpufret saltvand ved en perfusionstryk på 100 mm Hg via venstre hjerte ventrikel i 10 min.
- Brug en dissekere stereomikroskop til omhyggeligt adskille det intakte abdominale aorta frade omgivende væv.
- Transekt aorta rostralt nyrearterierne og kaudalt for bækkenforgreningen og åbnes via en langsgående indsnit langs den dorsale overflade.
- Pin aorta fladt på en 35 mm silicone overtrukket skål med den luminale side op til fiksering i ikke mindre end 2 timer, men ikke mere end 12 timer. Efterfølgende kan vævet være enten indlejret til sektionering eller anvendes i en face hel-mount immuncytokemi.
- Mount farvede aorta med luminale side vender dækglasset på objektglas til konfokal mikroskopi.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Firs-fem mus har gennemgået overlevelsen kirurgisk teknik er beskrevet i denne rapport for infrarenal abdominal aorta fastspænding. Den samlede overlevelsesrate var 85,9%. Operative komplikationer inkluderet intestinal blødning og store kar perforering, hvilket resulterer i 5,9% og 3,5% mortalitet (Tabel 1). Efter restitution fra anæstesi, mus gå normalt og viser ingen tegn på iskæmisk skade ringere lemmer. Ingen vægttab eller manglende appetit blev noteret.
Figur 1A og 1B viser billeder af den infrarenale abdominale aorta følgende laparotomi og retroperitoneal dissektion under stereomikroskop uden (A) og med (B) aorta fastspænding. Som vist, er det afgørende at spænde aorta bredde i sin helhed for at sikre blotlægning langs bredden af aorta. Vores protokol fandt, at brug af skarpe sving Schwartz Micro Serrebøder med en kæbe bredde på 1,75 mm og "stærk" klemme tryk producerede den største sammenhængende sår over hele bredden af aorta med minimal clamp tid. Imidlertid blev klemme testet på flere okklusion tidsintervaller med variabel størrelser skade (figur 1C). Resten af resultaterne præsenteret blev fremstillet under anvendelse af ovennævnte klemme.
Histologisk evaluering af aorta viser fuldstændig blotlægning af endothelbeklædning med moderat skade på underliggende glatte muskelceller lag som vist ved H & E farvning. Blotlægning af endothelium forekommer ved både 10 sek og 10 min, om end i forskellig grad (figur 2). At bestemme den optimale aorta fastspænding tidsinterval, der kræves til fuldstændig arteriel blotlægning, mus undergik fastspænding i 10 sek, 1 min og 10 min og blev straks aflivet til analyse som beskrevet i ovennævnte protokol. AREen af blotlægning steg med stigende clamp tidsindstillinger (figur 3). Ved 10 sek, en ufuldstændig og fragmentarisk blotlægning skade på ca. 0,75 mm2 blev identificeret ved pletvis fibrinogen-farvning, hvor fibrinogen tjener som en markør for blotlægning skade. Ti minutter af aorta fastspænding produceret en helt blottet endotelareal på ca. 1,2 mm2, men denne mængde tid for fastspænding blev anset høj risiko for iskæmi i lemmerne og reperfusionsbeskadigelse. Som sådan, vi anså 1 min af aorta fastspænding tilstrækkelig, der producerede en 0,88 mm 2 område blotlægning gennemsnitligt, at resultere i næsten fuldstændig arteriel blotlægning skade uden tegn på iskæmisk skade.
Omfanget af blotlægning skade med 1 min på aorta fastspænding er yderst reproducerbar og producerede en 600 um diameter og 0,88 mm 2 areal på blotlægning (figur 3 og 4). Detintensiteten af fibrinogen farvningen er tilstrækkelig til at identificere den oprindelige skade på senere tidspunkter. Figur 4 viser fibrinogen farvning af tre mus, der undergik 1 min af aorta fastspænding 24 timer inden aflivning, hvilket skaber en meget reproducerbar skade. Måling af fibrinogen farvning 24 timer efter skaden på seks aorta er ca. 0,81 mm2 (figur 5A), statistisk ligner 0,88 mm2 skade noteret umiddelbart efter skaden (p = 0,14). Sammenlignet med uskadt endotel, såret margin 24 timer efter skaden shows migrerer endotelceller med overliggende fibrinogen farvning, mærkning r-endothelialisering i blotlægning skade (figur 5B). I gennemsnit komplet re-endotelialisering af 0,88 mm2 blotlægning skade tog ca. 3 dage. Men denne fremgangsmåde kan endvidere indrettet til at producere endnu større blotlægning kvæstelser. Fastspænding flere gange, hveri 1 min, fra rostralt til kaudal langs den infrarenale aorta produceret en 3,7 mm 2 blotlægning skade. Selv om denne fremgangsmåde også skader tunica media, har vi aldrig observeret dissektion af den abdominale aorta som følge af klemmen skade.
Denne protokol viser, at infrarenal abdominal aorta fastspænding kan sikkert udføres i en musemodel med henblik på at skabe en arteriel blotlægning skade og måle endotel regenerering.
Figur 1:. Isoleret infrarenale abdominale aorta Isoleret infrarenale abdominale aorta er vist uden (A) og med (B) en vaskulær klemme. Adskillige klemmer af forskellige længder og klemme tryk styrke blev anvendt til at vælge den, der tilbyder konsekvent skade (C). Schwartz Micro Serrefine (pil) producerede den største sammenhængende såret. Klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 2: Effektivitet af endotel blottelse H & E-farvning af en infrarenale abdominale aortiske sektion i en ikke-skadet mus (A) og efter 10 sek (B) og 10 min af aorta fastspænding (C).. Vaskulær fastspænding fuldstændigt denudes endothellaget, som kan verificeres ved fravær af kerner farvning. Også tab af glatte muskel cellekerner viser skader på tunica medier. Klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 3:. Forholdet mellem Clamp Tid til sårbehandling Længde infrarenale abdominale aorta fastspænding blev udført i 10 sek, 1 min og 10 min. Umiddelbart efter skade, blev immunocytokemi udført en face for en fingeret kirurgi og disse tidspunkter som vist (A) og ved højere opløsning (B). Fibrinogen (i lilla) identificerer området for skader. β-catenin (i rødt) identificerer endotel grænser. Stjernen (*) markerer klemmen anvendelsesområdet. Fravær af β-catenin betegner mangel på endotelceller inden for skade. (C) anvender fibrinogen farvning som en markør for blotlægning skade område til at vise, at en forøgelse fastspænding tid forøger blotlægning område (n = 2 for hvert tidspunkt). Fejl søjler repræsenterer standardafvigelsen. Klik hførend at se en større version af dette tal.
Figur 4:. Identifikation af Skade Area Fireogtyve timer efter aorta fastspænding i 1 minut, blev aorta dissekeret og skåret til at eksponere tunica intima. Efter fiksering i 4% paraformaldehyd blev immunocytokemi udført en face. Fibrinogen (i lilla) identificerer området af skade (A). Højere forstørrelse af såret margin (B) og i såret (C) er vist. Klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 5: Reproducerbarhed af blotlægningSkade og Identifikation af Re-endothelialisering. Fireogtyve timers efter skade, blev aorta dissekeret som anført og gennemgik immunocytokemi en face. Brug af fibrinogen som markør for blotlægning skade, der observeres en meget reproducerbar skade i (A) med en gennemsnitlig blotlægning areal på 0,81 mm2 (n = 6). Højere opløsning billeder viser, at såret margin udviser fibrinogen-farvning og migrerende endotelceller (pile, lilla farvning) (B) sammenlignet med uskadt endotel (C). Fejl søjler repræsenterer standardafvigelsen. Klik her for at se en større version af dette tal.
Tabel 1:. Operative og Postoperativ Dødelighed I alt 85 mus undertøjent overlevelse infrafrenal abdominal aorta fastspænding med en overlevelsesrate på 85,9%. Otte mus (9,4%) overlevede ikke kirurgi på grund af intestinal blødning eller store kar perforering. Fire mus døde postoperativt.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Arteriel blotlægning skade som følge af perkutan interventioner, såsom ballonudvidelse og vaskulær stent, resultere i tidlig og sen vaskulær trombose og restenose og bidrager til tilbagevendende iskæmiske hændelser 3,12. Interessant, har kirurgisk vaskulær fastspænding også været impliceret som en årsag til arteriel blotlægning, udvidelse af problemet til patienter, der gennemgår enhver vaskulær procedure, uanset om perkutan eller åben 13. Mens svækket re-endotelialisering er en ret anerkendt årsag til trombose og restenose, har de molekylære mekanismer omgivende re-endotelialisering været vanskeligt at belyse. Dyremodeller er blevet en nødvendighed for at opnå yderligere forståelse af re-endotelialisering efter arteriel blotlægning skade.
Eksisterende dyremodeller for at studere de cellulære og molekylære effekter af arteriel blotlægning skade indbefatter dem i svin, kaniner og gnavere 7,9-11. gnaver models hyppigt anvendes, indbefatter rotte carotidarterie ballonbeskadigelse model, muse wire skade model, og rotte og mus ligerings- modeller 14,15. Mens rotte carotidarterie ballonbeskadigelse model er bedst karakteriseret og mest almindeligt anvendte, har carotidlæsionen procedurerne beskrevet af Lindner i mus udvidet mulighederne for at anvende transgene stammer 16,17. Genetisk modificerede musemodeller faldt forekomsten af potentielle off-target effekter og specificitet spørgsmål i forbindelse med farmakologiske hæmmere, og kan give mulighed for vævsspecifik og betinget ablation af specifikke elementer af interesse. Alligevel carotidlæsionen i musen er ekstremt udfordrende og vanskelig at udføre.
Den murine arterielle blotlægning model af den infrarenale abdominale aorta beskrevet her er relativt let at anvende og gør det muligt for studier af re-endothelialisering af en stor kaliber arterie in vivo. Kirurgiske indgreb udviste en acceptabel surVival sats på 85,9%. Viklet længde er afhængig af klemmekæbe dimension, styrke af klemmen pressen, og længden af tid den vaskulære klemme okkluderende fartøjet. Denne model anvender en 10 x 1,75 mm kæbe dimension og "stærk" clamp tryk i 1 min for at fremstille en 0,88 mm 2 blotlægning skade, som er meget reproducerbar. Variation i sår længde blev observeret med forskellige kæbe dimensioner og længden af fartøj okklusion. Desuden kan området for blotlægning udvides ved serielt at klemme den infrarenale abdominale aorta fra rostral til kaudal. Som sådan er denne model tilbyder alsidighed i blotlægning skade størrelse, der kan manipuleres til at passe en undersøgelse sigter.
For at vurdere omfanget af skade og endotel lukning satser efter skaden, blev immunocytokemi udført på forskellige tidspunkter med antistoffer rejst mod β-catenin at identificere endotel celle vejkryds eller ERG at identificere endotel cellekerner og fibrinogen til at identificere than skadede område. Som re-endothelialisering forekom, blev fibrinogen-farvning anvendes til at identificere den oprindelige skade sammenlignet med omfanget af re-endotelialisering. Mens den stærke farvning af fibrinogen signifikant svækket efter genvækst af endotelet, er der stadig tilstrækkelig intensitet til at identificere den oprindelige skade, selv efter mindst 4 dage efter operationen.
Denne model er ikke uden begrænsninger. Som med enhver dyremodel, murine kirurgi kræver god kirurgisk teknik og indebærer en indlæringskurve. Mus kan hurtigt bukke under for fartøj perforering hvis dissektion ikke udføres med omhu, hvilket er nogle gange umuligt at kontrollere. De mest almindelige årsager til operativ død inkluderet tarm blødning og stor fartøj perforering, på 5,9% og 3,5%, henholdsvis. Men med omhyggelig dissektion, blødning er sjælden og blodtab kan normalt holdes på under 0,1 ml i vores erfaringer. Desuden tilstrækkelig dissektion af aorta og korrekt klemmeplacering er integreret til en reproducerbar skade. Når de undersøger distale aorta pulsatility kan anvendes til at bekræfte fuldstændig aortaokklusion, fjerne alle retroperitoneal væv klæbende til aorta er afgørende for opnåelse af en ren, uafbrudt sår. Som tidligere nævnt, er beskadigelse af tunica media noteret med denne procedure af aorta fastspænding. Men mediale glatte muskulatur døden er en velkendt konsekvens af langvarig eller kronisk vaskulær udvidelse på grund af stent implantation, og resulterer i efterfølgende neointimahyperplasi 18. Medial skade i vores model synes ikke at have patologisk mén, da vi ikke har nogen postoperativ død og disse mus har overlevet op til 2 måneder postoperativt.
Vi præsenterer et alsidigt musemodel af arteriel blotlægning skade af den infrarenale abdominale aorta, der er reproducerbar med gode overlevelsesrater. Denne model udfylder et behov for at studere arteriel skade med et væld af transgene musemodeller. Vedtagelse of denne murine model kan anvendes til at belyse de molekylære mekanismer i re-endotelialisering under normale og patologiske tilstande.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har intet at afsløre.
Acknowledgments
Dette arbejde blev støttet af tilskud fra Eli og Edythe Bred Center regenerativ medicin og stamcelleforskning på UCLA træningsprogram til ASS og AIM, Philip J. Whitcome Fellowship til AIM, og National Institutes of Health (HL130290) til MLIA.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Zeiss Discovery.V12 Stereomicroscope | Zeiss | 495037-9904-000 | |
| Rodent Heated Surgical Platform | Protech International | RES4000 | Heated platform for body temperature maintenance with nosecone for anesthestic maintenance and on which surgical procedure is performed |
| Isoflurane | Henry Schein | 50033 | 4% Induction; 2.5% Maintenance |
| Isoflurane Vaporizer | Summit Medical Equipment | 470062 | |
| Stryker T/Pump Warm Water Recirculator | Kent Scientific | TP-700 | |
| Artifical Tears Lubricant Opthalmic Ointment | Akorn Animal Health | 17478-162-35 | |
| Carprieve (Carprofen) | Norbrook Laboratories | NDC 55529-131-01 | |
| Oster™ A5 Professional Animal Clipper | M.Schneider & Sons Inc. | 78005010 | Use with animal clipper size 40 |
| Adjustable Wire Retractor | Fine Science Tools | 17004-05 | |
| Schwartz Micro Serrefines - Sharp Bend | Fine Science Tools | 18052-03 | |
| Surgical Instruments | Fine Science Tools | sharp dissecting forceps, blunt forceps, fine scissors, spring scissors, hemostat | |
| 0.5% Marcaine | Hospira | 0409-1610-50 | |
| 5-0 Suture, Vicryl | Fisher Scientific | NC0189890 | tapered needle |
| Vetbond | Fisher Scientific | NC0304169 | |
| Falcon® 35 mm Not TC-Treated Easy-Grip Style Bacteriological Petri Dish | Corning | 351008 | |
| Sylgard 184 Silicone Elastomer Kit | Dow Corning | 3097358-1004 | |
| Dissecting pins | Fisher Scientific | NC9681411 |
References
- Farooq, V., Gogas, B. D., Serruys, P. W. Restenosis: delineating the numerous causes of drug-eluting stent restenosis. Circ Cardiovasc Interv. 4, 195-205 (2011).
- Tada, T., et al. Risk of stent thrombosis among bare-metal stents, first-generation drug-eluting stents, and second-generation drug-eluting stents: results from a registry of 18,334 patients. JACC Cardiovasc Interv. 6, 1267-1274 (2013).
- Otsuka, F., et al. The importance of the endothelium in atherothrombosis and coronary stenting. Nat Rev Cardiol. 9, 439-453 (2012).
- Kipshidze, N., et al. Role of the endothelium in modulating neointimal formation: vasculoprotective approaches to attenuate restenosis after percutaneous coronary interventions. J Am Coll Cardiol. 44, 733-739 (2004).
- Finn, A. V., et al. Pathological correlates of late drug-eluting stent thrombosis: strut coverage as a marker of endothelialization. Circulation. 115, 2435-2441 (2007).
- Joner, M., et al. Pathology of drug-eluting stents in humans: delayed healing and late thrombotic risk. J Am Coll Cardiol. 48, 193-202 (2006).
- Joner, M., et al. Endothelial cell recovery between comparator polymer-based drug-eluting stents. J Am Coll Cardiol. 52, 333-342 (2008).
- McDonald, A. I., Iruela-Arispe, M. L. Healing arterial ulcers: Endothelial lining regeneration upon vascular denudation injury. Vascul Pharmacol. 72, 9-15 (2015).
- Fingerle, J., Tina Au, Y. P., Clowes, A. W., Reidy, M. A. Intimal Lesion Formation in Rat Carotid Arteries after Endothelial Denudation in Absence of Medial Injury. Arteriosclerosis. 10, 1082-1087 (1990).
- Granada, J. F., et al. Vascular response to zotarolimus-coated balloons in injured superficial femoral arteries of the familial hypercholesterolemic Swine. Circ Cardiovasc Interv. 4, 447-455 (2011).
- Tulis, D. A. Rat carotid artery balloon injury model. Methods Mol Med. 139, 1-30 (2007).
- Bavry, A. A., Bhatt, D. L. Appropriate use of drug-eluting stents: balancing the reduction in restenosis with the concern of late thrombosis. Lancet (London, England). 371, 2134-2143 (2008).
- Gucu, A., et al. Effects of temporary vascular occluder poloxamer 407 Gel on the endothelium. J Cardiothorac Surg. 8, (2013).
- Holt, A. W., Tulis, D. A. Experimental Rat and Mouse Carotid Artery Surgery: Injury & Remodeling Studies. ISRN Minim Invasive Surg. 2013, (2013).
- Nam, D., et al. Partial carotid ligation is a model of acutely induced disturbed flow, leading to rapid endothelial dysfunction and atherosclerosis. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 297, 1535-1543 (2009).
- Lindner, V., Fingler, J., Reidy, M. A. Mouse Model of Arterial Injury. Circ Res. 73, 792-796 (1993).
- Kumar, A., Lindner, V. Remodeling with neointima formation in the mouse carotid artery after cessation of blood flow. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 17, 2238-2244 (1997).
- Hehrlein, C., Weinschenk, I., Metz, J. Long period of balloon inflation and the implantation of stents potentiate smooth muscle cell death. Possible role of chronic vascular injury in restenosis. Int J Cardiovasc Intervent. 2, 21-26 (1999).
