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Methodenartikel

Murine Modell der zentralen venösen Stenose mit Aortocaval Fistel mit einem Abfluss Stenose

7.2K Aufrufe

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DOI:

10.3791/59540

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11. Juli 2019

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In diesem Artikel

Zusammenfassung

Eine aortocavale Fistel wurde durch Daspunktieren der murinen Infra-Nieren-Aorta durch beide Wände in die untere Vena cava geschaffen und es folgte die Schaffung einer Stenose in ihrem Abfluss durch partielle Ligation der unteren Vena cava. Dieses reproduzierbare Modell kann verwendet werden, um zentrale venöse Stenose zu studieren.

Zusammenfassung

Zentrale venöse Stenose ist eine wichtige Einheit, die zum Versagen der arteriovenösen Fisteln (AVF) beiträgt. Ein murines AVF-Modell wurde modifiziert, um eine partielle Ligation der unteren Vena cava (IVC) im Abfluss der Fistel zu erzeugen, die zentrale venöse Stenose imitiert. Technische Aspekte dieses Modells werden eingeführt. Die Aorta und IVC sind nach einem Bauchschnitt exponiert. Die infrarenale Aorta und IVC werden für die proximale Klemmung seziert, und die distale Aorta wird für die Punktion ausgesetzt. Das IVC in der Mitte zwischen der linken Nierenvene und der Aortenverzweigung wird sorgfältig seziert, um eine 8-0 Unter dem IVC. Nach dem Spannen der Aorta und IVC entsteht ein AVF, indem die infrarenale Aorta durch beide Wände mit einer 25 G Nadel durch beide Wände in das IVC punktiert wird, gefolgt von der Zusammenligaung eines 22 G intravenösen (IV) Katheters und IVC. Der Katheter wird dann entfernt, wodurch eine reproduzierbare venöse Stenose ohne Okklusion entsteht. Die Aorta und IVC werden nach der Bestätigung der primären Hämostase nicht eingeklemmt. Dieses neuartige Modell der zentralen Venenstenose ist einfach durchzuführen, reproduzierbar und erleichtert Studien über AVF-Versagen.

Einleitung

Arteriovenöse Fisteln (AVF) sind die häufigsten Zugänge für Hämodialyse, mit überlegener Durchgängigkeit und reduzierter Infektion im Vergleich zu anderen Zugängen wie Transplantaten oder zentralen Venenkathetern. Jedoch, bis zu 60% der AVF nicht reifen1,2,3; eine kürzlich durchgeführte systematische Überprüfung hat berichtet, dass die Primärdurchgängigkeitsraten bei 1 Jahr nur 60%4betrugen. Stenose entlang des venösen Abflusses verursacht überwiegend das Versagen der AVF-Reifung5,6. Es gibt be....

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Protokoll

Alle Experimente wurden mit Genehmigung des Yale University Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) durchgeführt.

1. Anästhesie und präoperative Verfahren

  1. Sterilisieren Sie alle chirurgischen Instrumente und Materialien durch Autoklavieren. Schalten Sie die Wärmeunterstützungsvorrichtung ein, um sicher zu sein, dass es warm ist (40–42 °C).
  2. Legen Sie eine 9–11 Wochen alte C57BL/6-Maus in eine Acryl-Induktionskammer und befeuchten Sie sie mit verdampftem 2,5% Isofluran und 0,8 l/min Sauerstoff. Anästhesie Induktion dauert ca. 3 min.
  3. Entfernen Sie die Maus aus der Kammer. Bestätigen Sie eine tiefe Anäs....

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Ergebnisse

Männliche Mäuse unterliefen der oben genannten Operation, um sowohl eine AVF- als auch eine IVC-Stenose zu erzeugen. Kontrollmäuse wurden nur laparotomie und Zerlegung des Gewebes rund um das IVC, z. B. ein Scheinverfahren, oder nur die Schaffung einer IVC-Stenose ohne gleichzeitige Schaffung einer AVF.

Das IVC wurde mit Doppler-Ultraschall am 7. Tag nach dem chirurgischen Eingriff beobachtet (Abbildung 2

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Diskussion

Das murine AVF-Modell wurde verwendet, um die grundlegenden Mechanismen und molekularen Ereignisse zu untersuchen, die zur AVF-Reifung13,14führen. In dieser Studie modifizierten wir ein etabliertes murines AVF-Modell, um ein neuartiges murines aortokasvales Fistelmodell mit einer IVC-Stenose im Abflusstrakt der Fistel zu erstellen. Unser Ligationsmodell ähnelt mehreren zuvor beschriebenen murinen Modellen, die Gefäßligation verwenden. Ein murines Modell der tiefe.......

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Offenlegungen

Die Autoren haben nichts zu verraten.

Danksagungen

Diese Arbeit wurde vom US National Institute of Health (NIH) Grant R01-HL128406 unterstützt; das United States Department of Veterans Affairs Biomedical Laboratory Research and Development Program Merit Review Award I01-BX002336; sowie mit den Ressourcen und der Nutzung von Einrichtungen im VA Connecticut Healthcare System, West Haven, CT.

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
20-60 Mhz ScankopfVisualSonics Inc.RMV-704
8-0 Steriles Mikronaht, 6 mm (140 & Mikro;), 3/8 Kreis, TAP Point NadelAROSutureT06A08N14-13Polyamid Monofil Nahtmaterial
Induktionskammer, 2 Liter
3,75" B x 9,00" T x 3,75" H
VetEquip941444
Isoflo, Isofluran flüssigZoetis26675-46-7
Mäuse, C57BL/6JDer Jackson Labor664
Haustierbett Mikrowellen-HeizkissenSnuggle Safe6250
PrecisionGlide Nadel 25GBD305122
Surflo I.V. Katheter 22GTerumoSR-OX2225CA0,85 mm Außendurchmesser
GefäßklemmeRoboz Chirurgisches InstrumentRS-5424
Vevo770 Hochauflösendes BildgebungssystemVisualSonics Inc.770

Referenzen

  1. Dember, L. M., et al. Effect of clopidogrel on early failure of arteriovenous fistulas for hemodialysis: a randomized controlled trial. JAMA. 299 (18), 2164-2171 (2008).
  2. Dixon, B. S. Why don't fistulas mature? Kidney International. 70....

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Nachdrucke und Genehmigungen

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