Summary
एक कर्णकवाल नालव्रण दोनों दीवारों के माध्यम से मरिन इन्फ्रा-रेनल ऑर्टा को अवर वेना कैवा में puncturing द्वारा बनाया गया था और इसके बाद अवर वेना cava के आंशिक लिगेशन के माध्यम से इसके बहिर्वाह में एक स्टेनोसिस के निर्माण के बाद किया गया था। इस reproduible मॉडल केंद्रीय शिरापरक स्टेनोसिस का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.
Abstract
केंद्रीय शिरापरक स्टेनोसिस एक महत्वपूर्ण इकाई है जो धमनी नालव्रण (एवीएफ) विफलता में योगदान देती है। एक murine AVF मॉडल नालव्रण के बहिर्वाह में अवर वेना cava (आईवीसी) का एक आंशिक लिगेशन बनाने के लिए संशोधित किया गया था, केंद्रीय शिरापरक स्टेनोसिस नकल. इस मॉडल के तकनीकी पहलुओं को पेश कर रहे हैं. एक पेट चीरा के बाद, aorta और आईवीसी उजागर कर रहे हैं। इन्फ्रा-रेनल ऑर्टा और आईवीसी को समीपस्थ क्लैम्पिंग के लिए विभाजित किया जाता है, और डिस्टल ऑर्टा पंचर के लिए उजागर होता है। बाएं गुर्दे की नस और महाधमनी विभाजन के बीच मध्य बिंदु पर आईवीसी ध्यान से एक 8-0 जगह करने के लिए विच्छेदन है आईवीसी के नीचे सीवन. aorta और आईवीसी clamping के बाद, एक AVF एक 25 जी सुई के साथ आईवीसी में दोनों दीवारों के माध्यम से बुनियादी-renal aorta puncturing द्वारा बनाया जाता है, एक 22 जी इंट्रा-शिरा (IV) कैथेटर और आईवीसी एक साथ ligating द्वारा पीछा किया. कैथेटर तो occlusion के बिना एक reproduible शिरापरक स्टेनोसिस बनाने, हटा दिया जाता है. प्राथमिक हेमोस्टेसिस की पुष्टि के बाद ओर्टा और आईवीसी को हटा दिया गया है। केंद्रीय नस एक प्रकार का रोग के इस उपन्यास मॉडल प्रदर्शन करने के लिए आसान है, reproduible, और AVF विफलता पर अध्ययन की सुविधा होगी.
Introduction
Arteriovenous नालव्रण (AVF) hemodialysis के लिए सबसे आम accesses हैं, बेहतर पेटेंसी और कम संक्रमण के साथ इस तरह के grafts या केंद्रीय शिरापरक कैथेटर के रूप में अन्य accesses की तुलना में. हालांकि, AVF के 60%तक 1 ,2,3परिपक्व करने में विफल; हाल ही में एक व्यवस्थित समीक्षा में बताया गया है कि 1 वर्ष में प्राथमिक पैटेंसी दर केवल 60%4थी . शिरापरक बहिर्वाह के साथ स्टेनोसिस मुख्य रूप से एवीएफ परिपक्वता5,6की विफलता का कारण बनता है . कुछ विशिष्ट स्थानों को फिस्टुला के निकट एक प्रकार का रोग होने की संभावना है: रेडियोसेफेलिक फिस्टुला के लिए जक्सटाएनास्टोमोटिक स्विंग खंड, ब्रैकियोसेफेलिक फिस्टुला के लिए शिरस्य चाप क्षेत्र और पहले के साथ फिस्टुला के लिए केंद्रीय नस स्थित इपिसिपार्श् व उपक्लेवी या आंतरिक जुगल नस कैथेटर7,8.
केंद्रीय शिरापरक स्टेनोसिस अक्सर एक AVF के बिना रोगियों में स्पर्शोन्मुख है, लेकिन शिरापरक उच्च रक्तचाप के साथ ही नालव्रण परिपक्वता की विफलता जब नालव्रण प्रवाह9द्वारा चुनौती दी द्वारा ipsilateral extremity edema पैदा कर सकता है. केंद्रीय शिरापरक स्टेनोसिस के पैथोफिजियोलॉजी सबसे अधिक संभावना डिवाइस प्लेसमेंट के बाद सूजन और सक्रिय जमावट झरना से संबंधित है। इसके अलावा, कैथेटर टिप के निरंतर आंदोलन के साथ ही नालव्रण से बढ़ते प्रवाह कतरनी तनाव को बदल सकते हैं, जिसके परिणामस्वरूप प्लेटलेट जमा और शिरापरक दीवार10को मोटा कर सकती है। केंद्रीय शिरापरक स्टेनोसिस की वजह से AVF विफलता अंतर्निहित बुनियादी तंत्र को समझने के लिए, एक एवीएफ के साथ केंद्रीय शिरापरक स्टेनोसिस नकल एक पशु मॉडल की आवश्यकता है।
हम एक murine aortocaval नालव्रण मॉडल है कि प्रदर्शन करने के लिए आसान है और मास्टर और मानव AVF के नैदानिक पाठ्यक्रम recapitulates की स्थापना की है. 11 हमने शिरापरक स्टेनोसिस के साथ एक उपन्यास म्यूरीन AVF मॉडल बनाने के लिए पहले से स्थापित कई murine मॉडल की अवधारणाओं और तकनीक को लागू किया। हम बहिर्वाह नालव्रण में एक आईवीसी स्टेनोसिस के साथ एक murine aortocaval नालव्रण मॉडल है कि केंद्रीय शिरापरक स्टेनोसिस के अध्ययन के लिए इस्तेमाल किया जा सकता परिचय.
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Protocol
सभी प्रयोगों येल विश्वविद्यालय संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति (IACUC) से अनुमोदन के साथ प्रदर्शन किया गया.
1. संज्ञाहरण और पूर्व ऑपरेटिव प्रक्रियाओं
- autoclaving द्वारा सभी शल्य चिकित्सा उपकरणों और सामग्री बाँझ. थर्मल समर्थन डिवाइस को चालू करने के लिए निश्चित है कि यह गर्म है (40-42 डिग्री सेल्सियस)।
- एक एक्रिलिक प्रेरण कक्ष में एक 9-11 सप्ताह पुराने C57BL/6 माउस प्लेस और यह वाष्पीकृत 2.5% आइसोफ्लुरेन और 0.8 एल / संज्ञाहरण प्रेरण के बारे में 3 मिनट लगते हैं.
- कक्ष से माउस निकालें. एक टो चुटकी, एक कान चुटकी और एक पूंछ चुटकी द्वारा संज्ञाहरण के एक गहरे विमान की पुष्टि करें. सर्जिकल क्षेत्र पर सुपाच्य स्थिति में माउस प्लेस और सिलिकॉन मुखौटा का उपयोग कर 2.5% isoflurane उद्धार. 0.1 mg/kg एनाल्जेसिक पर buprenorphine प्रदान करें और आंखों के लिए नेत्र मरहम लागू करें।
- नायर, एक बाल पदच्युत का उपयोग कर निचले पेट के लिए गर्दन के अधर पक्ष से फर निकालें।
- 10% povidone-आयोडीन और 70% आइसोप्रोपेनोल के साथ एक दो कदम साफ़ का उपयोग करके शल्य साइट को साफ और कीटाणुरहित करें। एक शल्य पर्दे लागू करें.
2. सक्रिय प्रक्रियाओं
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क्लैम्प और पंचर साइटों का एक्सपोजर
- बाँझ उपकरणों तैयार करने और बाँझ दस्ताने पहनने के लिए सर्जरी के दौरान बाँझपन बनाए रखने के.
- पब्लिस के ऊपर निचले जिगर के किनारे के स्तर से एक स्केलपेल के साथ एक त्वचा-गहरी मिडलाइन पेट चीरा बनाएं। पेट की गुहा खोलने के लिए कैंची से पेशी के माध्यम से कट।
- पेट में एक आकुंचक डालें और आंत को दाईं ओर खींचें। नमकीन से लथपथ धुंध में लपेटकर उन्हें नम रखें। मूत्राशय और मौलिक vesicles (पुरुष चूहों में) को पीछे हटा दें और उन्हें पुच्छल पक्ष के लिए बाहर खींच लें। एक माइक्रो-नेडल धारक के साथ मलाशय और retroperitoneum के बीच आंत्रक्रम को दूर करने के लिए aorta और आईवीसी का एक पूरा दृश्य प्राप्त करने के लिए.
- एक माइक्रो-नेडल धारक के साथ retroperitoneal ऊतकों के आसपास पार्श्व और पृष्ठीय से बुनियादी-रीनल ऑर्टा और आईवीसी एन ब्लॉक को अलग करें ताकि उन्हें एक साथ क्रॉस-क्लैम्प किया जा सके।
- आसपास के ऊतकों को विभाजित करने के लिए महाधमनी पंचर साइट के लगभग तीन चौथाई पर छोड़ दिया गुर्दे की नस से महाधमनी विभाजन के लिए दूरी का पर्दाफाश.
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आईवीसी विच्छेदन
- इन्फ्रा-रेनल आईवीसी और ओर्टा के बीच तुरंत बाएं गुर्दे की नस को अलग कर दें। बाएँ गुर्दे की नस और महाधमनी विभाजन के बीच आधे रास्ते तक विच्छेदन को अलग-अलग बढ़ाएं, ताकि अव-रेनल आईवीसी, अपस्ट्रीम और डाउनस्ट्रीम दोनों को स्टेनोसिस के लिए पश्चात देखा जा सके।
नोट: आईवीसी और ओर्टा के बीच ब्लंट विच्छेदन तुरंत distal से बाएं गुर्दे की नस जहां आईवीसी और माओरटा के बीच संयोजी ऊतक अपेक्षाकृत ढीला है प्रदर्शन किया जाना चाहिए. - आईवीसी को उस स्तर पर ऑर्टा से अलग करने और आईवीसी को आसपास के ऊतकों से अलग करने के लिए एक खिड़की बनाएं। एक 8-0 प्लेस बहुमत् एकप्रकार े वष!को सर्वप्रथम आईवीसी तथा आवटा के नीचे सीवन (चित्र 1क) को खिड़की के माध्यम से सीवन को खींचकर केवल आईवीसी (चित्र 1ख) के नीचे की स्थिति में स्थान दें.
नोट: चूंकि आईवीसी नाजुक है, महाधमनी adventitia के साथ विच्छेदन के लिए एक खिड़की बनाने के लिए आईवीसी के रूप में के रूप में अच्छी तरह से छोटे आईवीसी या महाधमनी शाखाओं को क्षतिग्रस्त होने से रोकने के लिए उपयोगी है. यदि रक्तस्राव होता है, तो यह बेकाबू होने की संभावना है। यदि आईवीसी की अलग-अलग शाखाएं हैं, तो 8-0 रखें शाखाओं को सीवन अलग करते हैं।
- इन्फ्रा-रेनल आईवीसी और ओर्टा के बीच तुरंत बाएं गुर्दे की नस को अलग कर दें। बाएँ गुर्दे की नस और महाधमनी विभाजन के बीच आधे रास्ते तक विच्छेदन को अलग-अलग बढ़ाएं, ताकि अव-रेनल आईवीसी, अपस्ट्रीम और डाउनस्ट्रीम दोनों को स्टेनोसिस के लिए पश्चात देखा जा सके।
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AVF निर्माण
- सुई टिप से एक बिंदु पर 25 ग सुई को 45-60 डिग्री कोण पर मोड़ें।
- एक microsurgical क्लिप लागू करने से बुनियादी-रेनल ओर्टा और आईवीसी दबाना.
- ऑर्टा को मध्यातरी घुमाएं और विभाजन के आस-पास के संयोजी ऊतक को पकड़कर, वाता के पंचर स्थल को प्रकट करने के लिए इसे अधर की ओर थोड़ा फैलादिया।
- वाता को उपयुक्त स्थिति में धारण करके, तैयार 25 जी सुई का उपयोग करते हुए आरोटा के माध्यम से आईवीसी में पंचर कर दें (चित्र 1ब्) ।
- ओर्टा रिलीज करें और आसपास के ऊतकों के साथ पंचर साइट को कवर करें जो ओरटा के बाईं ओर से खींच रहा है। सुई बाहर ले लो और hemostasis के लिए एक कपास की पट्टी झाड़ू का उपयोग कर पंचर साइट धीरे दबाएँ.
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आईवीसी स्टेनोसिस का निर्माण
- आईवीसी पर एक 22 जी चतुर्थ कैथेटर की एक टिप प्लेस (सामग्री की मेजदेखें)। एक 8-0 के साथ चतुर्थ कैथेटर और आईवीसी एक साथ लिगेट सीवन (चित्र 1D), और फिर चतुर्थ कैथेटर निकालें।
- प्राथमिक हेमोस्टेसिस की पुष्टि करें (चित्र 1E) और फिर ऑर्टा और आईवीसी को अनक्लैम्प करें। हेमोस्टेसिस सुनिश्चित करने के लिए पंचर साइट 1 मिनट अधिक कवर करें।
नोट: बहुत लंबे समय के लिए दबाना नहीं है ताकि आईवीसी घनास्त्रता से बचने के लिए एक प्रकार का जीवन के लिए distal. - अंगों को उनकी मूल स्थिति में वापस करें और पेट को 6-0 टांके के साथ बंद करें।
3. पोस्ट-ऑपरेटिव प्रक्रियाओं
- पेट के घाव के बंद होने के बाद, बंद isoflurane साँस लेना. एक व्यक्ति बिस्तर मुक्त पिंजरे में माउस रखो और हाइपोथर्मिया को रोकने के लिए एक थर्मल समर्थन डिवाइस पर पिंजरे जगह है.
नोट: माउस मनाया जाता है जब तक वे प्राप्त करने और कठोर recumbency बनाए रखने. स्थानीय IACUC की सिफारिशों के अनुसार analgesia और घाव देखभाल सहित पोस्ट ऑपरेटिव देखभाल लागू करें। analgesia के लिए हम 0.1 mg/kg intrasmuscularly पर हर 12 एच 48 एच के लिए सर्जरी प्रक्रियाओं के बाद और उसके बाद की जरूरत के रूप में buprenorphine का उपयोग करें। - डॉपलर अल्ट्रासाउंड का उपयोग करके AVF patency पश्यंटिव पुष्टि करें (सामग्री की तालिकादेखें )। इसके अलावा, अन्य पोत और प्रवाह विशेषताओं के रूप में आवश्यक उपाय.
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Representative Results
पुरुष चूहों दोनों एक AVF और एक आईवीसी स्टेनोसिस बनाने के लिए ऊपर उल्लेख आपरेशन किया. नियंत्रण चूहों केवल laparotomy और आईवीसी के आसपास के ऊतकों के विच्छेदन लिया, जैसे, एक शर्म प्रक्रिया, या केवल एक AVF के एक साथ निर्माण के बिना एक आईवीसी एक प्रकार का रोग का निर्माण.
शल्य चिकित्सा प्रक्रिया के बाद 7 दिन पर डॉपलर अल्ट्रासाउंड के साथ आईवीसी मनाया गया (चित्र 2) . आईवीसी के फिस्टुला और स्टेनोसिस क्षेत्रों को देशांतरीय दृश्य में आसानी से पाया गया (चित्र 2ब्, ई) । नालव्रण और स्टेनोसिस के बीच आईवीसी को स्टेनोसिस के साथ एवीएफ वाले चूहों में फैला दिया गया था। अल्ट्रासाउंड तरंगों को एक प्रकार के दाने के बिंदु पर आईवीसी में जांच की गई (चित्र 2 डी,एफ) . अकेले एक एक एक स्टेनोसिस असर चूहों में, एक AVF के बिना, स्टेनोसिस खंड शर्म से संचालित चूहों की तुलना में अधिक वर्णक्रमीय व्यापक के साथ एक शिरापरक तरंग दिखाया लेकिन बहुत स्पंदन के बिना. हालांकि, चूहों में एक AVF के रूप में के रूप में अच्छी तरह से एक एक प्रकार का सेवन होने, एक प्रकार का आकार खंड वर्णक्रमीय व्यापक बनाने के अलावा एक स्पंदनशील तरंग दिखाया. एक एवीएफ वाले स्टेनोसिस वाले चूहों में स्टेनोसिस पर प्रवाह का समय-औसत अधिकतम वेग अकेले स्टेनोसिस वाले चूहों की तुलना में काफी अधिक था (तालिका 1)।
डॉपलर अल्ट्रासाउंड बी मोड का उपयोग अनुप्रस्थ विचारों में सर्जरी के बाद सात दिन आईवीसी का आकलन करने के लिए किया गया था (तालिका 1) . अकेले स्टेनोसिस वाले चूहों में स्टेनोसिस पर औसत आईवीसी व्यास एक AVF के साथ-साथ स्टेनोसिस वाले चूहों के समान था (तालिका 1)। आईवीसी के प्रतिशत स्टेनोसिस की गणना एनएएससीटी ई7 के अनुसार की गईथी. या तो अपस्ट्रीम खंड या संदर्भ के रूप में डाउनस्ट्रीम खंड का उपयोग करना, प्रतिशत स्टेनोसिस एक प्रकारका सेवन (तालिका 1) के अलावा एक AVF वाले चूहों में काफी अधिक था।
चित्र 1. शिरापरक स्टेनोसिस के साथ murine AVF मॉडल की ऑपरेटिव तस्वीरें. (ए) एक 8-0 प्लेस आईवीसी (नीले arrowheads) और महाधमनी (लाल arrowheads) के नीचे सीवन बाएं गुर्दे की नस (पीला arrowheads) और महाधमनी विभाजन के बीच आधे रास्ते, किसी भी बड़े आईवीसी शाखाओं के लिए distally यदि मौजूद है. (बी) आईवीसी के नीचे सीवन ही रखें। (सी) समीपस्थ क्लैम्पिंग के बाद, दोनों दीवारों के माध्यम से और आईवीसी में ऑर्टा को पंचर कर देता है। (घ) 22 जी IV कैथेटर और आईवीसी की एक टिप को रखा सीवन के साथ बाँधें। (ई) कैथेटर और unclamp निकालें. आईवीसी स्टेनोसिस के माध्यम से धमनी रक्त प्रवाह देखा जा सकता है। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
चित्र 2. शल्य चिकित्सा प्रक्रिया के बाद 7 दिन पर अल्ट्रासाउंड निष्कर्ष। ऊपर: एक दिखावा प्रक्रिया के साथ चूहों के प्रतिनिधि छवियों. (ए) बी-मोड छवि अनुदैर्घ्य दृश्य में आईवीसी को दर्शाती है। बाईं ओर कपाल की ओर है. (बी) अवरक्त आईवीसी की तरंग। मध्य: अकेले एक स्टेनोसिस के साथ चूहों के प्रतिनिधि छवियों. (ग) बी-मोड छवि अनुदैर्घ्य दृश्य में स्टेनोसिस (पीला तारांकन) सहित आईवीसी को दर्शाती है। बाईं ओर कपाल की ओर है. (घ) एक प्रकार के क्षेत्र में तरंग। नीचे: चूहों के प्रतिनिधि छवियों स्टेनोसिस के साथ AVF होने. (ई) बी-मोड छवि नालव्रण (सफेद तारांकन) और स्टेनोसिस सहित आईवीसी को दर्शाती है। बाईं ओर कपाल की ओर है. (च) एक प्रकार के क्षेत्र में तरंग। श्वेत स्केल बार 1 मिमी का प्रतिनिधित्व करता है पीला स्केल बार 100 ms का प्रतिनिधित्व करता है, कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
स्टेनोसिस | हाँ | हाँ | P मान |
एवीएफ | नहीं | हाँ | |
समय-औसत अधिकतम वेग (मिमी/ | 180 | 878 | 0.0023 |
स्टेनोसिस व्यास (मिमी) | 0.62 ] 0.01 | 0.63 ] 0.01 | 0.3558 |
% एक हो सकता है (upsteam) | 43% | 66% | 0.0159 |
% एक हो सकता है (डाउनस्टेम) | 42% | 56% | 0.0006 |
तालिका 1. प्रत्येक समूह के आईवीसी स्टेनोसिस क्षेत्र में अल्ट्रासाउंड माप। अल्ट्रासाउंड चूहों अकेले स्टेनोसिस होने के आईवीसी स्टेनोसिस क्षेत्र में माप व्युत्पन्न और चूहों सर्जरी के बाद 7 दिन पर स्टेनोसिस के साथ AVF होने. %stenosis (upstream) ] (1 - [व्यास पर एक प्रकार का संदर्भ खंड पर / %stenosis (डाउनस्ट्रीम) ] (1 - [नीचे की ओर संदर्भ खंड पर व्यास / %dilation ] (एक ही खंड पर पश्चात दिन 7 / preoperative व्यास पर व्यास) x 100%. P मान छात्र के t-परीक्षणों पर आधारित होते हैं, n ] 4-6.
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Discussion
मौरीन एवीएफ मॉडल का उपयोग बुनियादी तंत्रों और आणविक घटनाओं का अध्ययन करने के लिए किया गया है जिससे एवीएफ परिपक्वता13,14. इस अध्ययन में, हम एक स्थापित murine AVF मॉडल संशोधित करने के लिए एक उपन्यास murine aortocaval नालव्रण मॉडल के साथ एक आईवीसी stenosis नालव्रण के बहिर्वाह पथ में बनाने के लिए. हमारे लिगेशन मॉडल कई पहले से वर्णित murine मॉडल है कि संवहनी ligation का उपयोग करने के लिए समान है. गहरी शिरा घनास्त्रता का एक murine मॉडल एक 30 जी सुई स्पेसर15के साथ आंशिक आईवीसी लिगिंग का उपयोग कर बनाया गया था; हम एक छोटे स्टेनोसिस बनाने के लिए और इस तरह थ्रोम्बोटिक occlusion से बचने के लिए एक बड़ा 22 जी चतुर्थ कैथेटर स्पेसर का इस्तेमाल किया। आंशिक ग्रीवा धमनी लिगेशन के एक murine मॉडल परेशान प्रवाह प्रेरित करने के लिए इस्तेमाल किया गया था, atherosclerosis16के लिए अग्रणी; हमारे मॉडल इसी तरह एक आंशिक शिरापरक ligation इस्तेमाल किया और तदनुसार आंशिक ligation के क्षेत्र में आईवीसी में परेशान प्रवाह का प्रदर्शन किया.
नालव्रण शिरापरक स्टेनोसिस के कारण AVF परिपक्वता विफलता अंतर्निहित तंत्र का अध्ययन किया गया है। शीना प्रतिबल की अशांत आवृत्तियों सहित हीमोडायनामिक परिवर्तन ों को 17,18के महत्वपूर्ण कारक दर्शाए गए . एक कम्प्यूटेशनल तरल पदार्थ गतिशीलता सिमुलेशन शिरापरक एक प्रकार का पानी की नसों में परेशान प्रवाह दिखाया19, हालांकि शिरापरक स्टेनोसिस के साथ AVF के पशु मॉडल पहले सूचित नहीं किया गया है. इस संशोधित murine aortocaval नालव्रण मॉडल केंद्रीय शिरापरक स्टेनोसिस के साथ एक AVF अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. स्टेनोसिस में आईवीसी व्यास में इस मॉडल में कम भिन्नता और अधिक स्थिरता है; एक चतुर्थ कैथेटर का उपयोग कर आंशिक आईवीसी लिगेशन इस मॉडल की reproducibility बढ़ जाती है। केंद्रीय शिरा स्टेनोसिस के नैदानिक लक्षण और लक्षण प्राय : आइपिसिओरल एक्सट्रीमिटी 9 में फिस्टुला निर्माण के बाद ही विकसित होतेहैं. इस मॉडल में, चूहों एक आंशिक आईवीसी स्टेनोसिस होने (lt;50%) सामान्य प्रवाह था और स्पर्शोन्मुख थे, जबकि एक AVF के अलावा एक डिग्री है कि लक्षण पैदा कर सकता है करने के लिए एक प्रकार का रोग की डिग्री में वृद्धि हुई (gt; 50%) (चित्र 2, सारणी 1) . इन परिणामों केंद्रीय नस एक प्रकार का एक प्रकार का प्रकार नकल; नालव्रण की उपस्थिति के कारण बढ़ी हुई शिरापरक प्रवाह स्पर्शोन्मुख केंद्रीय नस एक प्रकार का रोग के अस्तित्व का अनावरण कर सकता है, जिससे शिरापरक उच्च रक्तचाप और नालव्रण परिपक्वता की विफलता हो सकती है।
वहाँ कुछ महत्वपूर्ण कदम और अंक सफलता की दर और प्रक्रिया की स्थिरता में सुधार कर रहे हैं. यदि आईवीसी की अलग-अलग शाखाएं हैं, तो 8-0 सीवन को शाखाओं को दूर (कौआ) रखा जाता है (चित्र 1)। मूल murine AVF मॉडल में, आईवीसी की ओर शाखाओं आम तौर पर नजरअंदाज कर रहे हैं क्योंकि शाखाओं के उच्च संवहनी प्रतिरोध शाखाओं में प्रवेश करने से नालव्रण प्रवाह रहता है. हालांकि, अगर आईवीसी स्टेनोसिस इस मॉडल में अलग पक्ष शाखाओं के लिए proximaly बनाया जाता है, नालव्रण प्रवाह नए रखा सीवन द्वारा संवहनी प्रतिरोध के कारण शाखाओं में बच सकता है. बड़े पैमाने पर रक्तस्राव से बचने के लिए, आईवीसी विच्छेदन तुरंत बाएं गुर्दे की नस के लिए inferiorly शुरू कर दिया है और आगे की ओर जहां आईवीसी ligated किया जाना है बिंदु के लिए और अधिक अवर बढ़ाया है. यह कदम इस सर्जरी का सबसे महत्वपूर्ण हिस्सा है; क्षतिग्रस्त आईवीसी या शाखाओं से खून बह रहा है बेकाबू होने की संभावना है। इसके अलावा, आईवीसी को छूने से बचने के लिए जब यह चारों ओर सीवन रखकर, और संभवतः यह फाड़, 8-0 सीवन शुरू में दोनों आईवीसी और aorta के आसपास रखा गया है, और फिर केवल आईवीसी के नीचे repositioned. अंत में, 8-0 की गाँठ सीवन आईवीसी के पक्ष में रखा गया है, नहीं सीधे पूर्वकाल, किसी भी कलाकृति है कि पश्चात अल्ट्रासाउंड परीक्षा को प्रभावित कर सकता है को रोकने के लिए.
इस अध्ययन की एक संभावित सीमा यह है कि इस मॉडल में आईवीसी स्टेनोसिस बाहरी यांत्रिक संपीड़न द्वारा बनाई गई है; सीवन और आईवीसी विच्छेदन की वजह से avenitial सूजन संभावित स्टेनोसिस क्षेत्र में शिरापरक remodeling को प्रभावित कर सकता है. इसके अलावा, इस मॉडल में नालव्रण महाधमनी और आईवीसी के बीच किया जाता है ताकि सभी नालव्रण प्रवाह आईवीसी स्टेनोसिस में निर्देशित किया जाता है, जबकि मानव ऊपरी हिस्सों में बनाया गया फिस्टुला अक्सर संपार्श्विक नसों को विकसित करने की अनुमति देता है, स्टेनोसिस को स्पर्शोन्मुख रखते हुए। इस मॉडल में केंद्रीय शिरापरक स्टेनोसिस जैसे डिस्टल एडीमा और संपार्श्विक गठन के भौतिक लक्षण नहीं दिखाए जाते हैं।
संक्षेप में, हम एक आईवीसी बहिर्प्रवाह एक स्टेनोसिस है कि प्रदर्शन और reproduible करने के लिए आसान है के साथ एक उपन्यास murine aortocaval नालव्रण मॉडल के लिए एक प्रोटोकॉल परिचय. हम उम्मीद करते हैं कि यह मॉडल एक केंद्रीय शिरापरक स्टेनोसिस द्वारा हेमोडायनामिक परिवर्तनों का अध्ययन करने के लिए उपयोगी होगा जो AVF परिपक्वता को प्रभावित कर सकता है।
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Disclosures
लेखकों को खुलासा करने के लिए कुछ भी नहीं है.
Acknowledgments
इस काम को अमेरिका के राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान (एनआईएच) अनुदान R01-HL128406 द्वारा समर्थित किया गया था; संयुक्त राज्य अमेरिका के दिग्गजों मामलों जैव चिकित्सा प्रयोगशाला अनुसंधान और विकास कार्यक्रम मेरिट समीक्षा पुरस्कार I01-BX002336 विभाग; के रूप में अच्छी तरह के रूप में संसाधनों और VA कनेक्टिकट हेल्थकेयर सिस्टम, वेस्ट हेवन, सीटी में सुविधाओं के उपयोग के साथ.
Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
20-60 Mhz scan head | VisualSonics Inc. | RMV-704 | |
8-0 Sterile Micro Suture, 6mm (140 µ), 3/8 Circle, TAP Point Needle | AROSuture | T06A08N14-13 | polyamide monofilament sutures |
Induction Chamber, 2 Liter 3.75"W x 9.00"D x 3.75"H |
VetEquip | 941444 | |
Isoflo, Isoflurane liquid | Zoetis | 26675-46-7 | |
Mice, C57BL/6J | The Jackson Laboratory | 664 | |
Pet Bed Microwave Heating Pad | Snuggle Safe | 6250 | |
PrecisionGlide Needle 25G | BD | 305122 | |
Surflo I.V. Catheter 22G | Terumo | SR-OX2225CA | 0.85mm outer diameter |
Vascular clamp | Roboz Surgical Instrument | RS-5424 | |
Vevo770 High Resolution Imaging System | VisualSonics Inc. | 770 |
References
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