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Genetics

ड्रोसोफिला का उपयोग करके हेट्रोक्रोमेंटिन-को बढ़ावा देने वाली दवाओं की पहचान के लिए एक स्क्रीनिंग विधि

Published: March 12, 2020 doi: 10.3791/60917

Summary

ड्रोसोफिला कैंसर थेरेपी के लिए संभावित अनुप्रयोगों के साथ दवाओं की स्क्रीनिंग के लिए उपयुक्त एक व्यापक रूप से उपयोग किया जाने वाला प्रयोगात्मक मॉडल है। यहां, हम हेट्रोक्रोमाटिन गठन को बढ़ावा देने वाले छोटे अणु यौगिकों की स्क्रीनिंग के लिए एक विधि के रूप में ड्रोसोफिला विविध आंखों के रंग फेनोटाइप के उपयोग का वर्णन करते हैं।

Abstract

ड्रोसोफिला एक उत्कृष्ट मॉडल जीव है जिसका उपयोग उन यौगिकों को स्क्रीन करने के लिए किया जा सकता है जो कैंसर थेरेपी के लिए उपयोगी हो सकते हैं। यहां वर्णित विधि ड्रोसोफिलाका उपयोग करके विषमक्रोच्टोमैटिन-को बढ़ावा देने वाले यौगिकों की पहचान करने के लिए वीवो विधि में एक लागत प्रभावी है। ड्रोसोफिला का DX1 तनाव, एक विविध आंख रंग फेनोटाइप है जो विषमता के गठन की सीमा को दर्शाता है, जिससे हेट्रोक्रोमेंटन को बढ़ावा देने वाली दवा स्क्रीन के लिए एक उपकरण प्रदान करता है। इस स्क्रीनिंग विधि में, आंखों के कुछ हिस्सों पर कब्जा लाल वर्णक के सतह क्षेत्र के आधार पर आंख ों में भिन्नता है और 1 से 5 तक के पैमाने पर बनाए जाते हैं। स्क्रीनिंग विधि सीधी और संवेदनशील है और वीवो में यौगिकों के परीक्षण के लिए अनुमति देता है। इस विधि का उपयोग कर दवा स्क्रीनिंग विषमता को बढ़ावा देने वाली दवाओं की पहचान करने के लिए एक तेज और सस्ता तरीका प्रदान करती है जो कैंसर चिकित्सा विज्ञान में लाभकारी प्रभाव डाल सकती है। विषमता के गठन को बढ़ावा देने वाले यौगिकों की पहचान करने से कैंसर के विकास के एपिजेनेटिक तंत्र की खोज भी हो सकती है ।

Introduction

हेट्रोक्रोमाटिन डीएनए का एक गाढ़ा रूप है जो जीन अभिव्यक्ति में, कोशिका विभाजन के दौरान गुणसूत्र अलगाव को विनियमित करने में, और जीनोम अस्थिरतासेबचाने में एक केंद्रीय भूमिका निभाता है 1 । हेट्रोक्रोमाटिन को जीन दमन नियामक माना गया है और सेल माइटोसिस2,3के दौरान गुणसूत्र अखंडता की रक्षा करना है । यह वंश प्रतिबद्धता4,,5के दौरान हिस्टोन H3 lysine 9 (H3K9me) के di-और त्रिकोणीय मिथाइलेशन के साथ जुड़ा हुआ है । इसके अलावा, हेट्रोक्रोमेंटिन प्रोटीन 1 (एचपी1) क्रोमोडोमेन प्रोटीन की भर्ती को भी हेट्रोक्रोमोटिन और जीन अभिव्यक्ति6के एपिजेनेटिक दमन से जुड़ा माना जाता है । ये प्रोटीन आवश्यक घटक और विषमता के गठन के मार्कर हैं।

चूंकि जीनोमिक अस्थिरता कोशिकाओं को आनुवांशिक परिवर्तन प्राप्त करने में सक्षम बनाती है जो कार्सिनोजेनेसिस को बढ़ावा देते हैं, इसलिए हेट्रोक्रोमेंटिन कैंसर के विकास में अधिक पहचाना जा रहा है और इसे कैंसर उपचार7,,8के लिए लक्षित किया जा सकता है । वर्तमान में, कोई दवा नहीं है जो हेट्रोक्रोमैटिन गठन की सहायता करने में अच्छी तरह से स्थापित है। यहां, हम छोटे अणु यौगिकों की स्क्रीनिंग के लिए एक सरल और त्वरित अभी तक कुशल विधि पेश करते हैं जो विषमता के गठन को बढ़ावा देते हैं। यह स्क्रीनिंग ड्रोसोफिला को छोटे अणु दवाओं की लाइब्रेरी से इलाज कराकर की जाती है। यह विधि डीएक्स1ड्रोसोफिला तनाव में एक विविध आंख ों के रंग फेनोटाइप का लाभ लेती है जो विषमता के स्तर से प्रभावित होती है। DX1 मक्खियों में सात पी [लाख-डब्ल्यू] ट्रांसजीन की एक समानसरणी होती है, जिसमें विषमता के आधार पर विविध अभिव्यक्ति/अवसाद होता है, इसलिए, आंखों के रंग में विविधता की सीमा विषमता के स्तर को दर्शाती है । विशेष रूप से, बढ़ते विषमता का पता विविध आंखों के रंग (सफेद आंख) के बढ़ते अनुपात से लगाया जा सकता है। इसके विपरीत, हेट्रोक्रोमेंटिन कम होने का पता पी [लाख-डब्ल्यू] ट्रांसजीन अभिव्यक्ति (लाल आंख)9,,10,,11,,12के बढ़ते अनुपात से लगाया जाएगा।

इसलिए, हम इस ड्रोसोफिला ट्रांसजीन सिस्टम का लाभ उठाते हैं जो एक विविध आंखों के रंग फेनोटाइप का उत्पादन करता है क्योंकि इसकी अभिव्यक्ति सीधे वर्तमान विषमता की मात्रा से सहसंबद्ध है। विषमता के गठन को बढ़ावा देने के लिए संदिग्ध यौगिकों की खोज पर, हम पश्चिमी दाग जैसे अन्य तरीकों का उपयोग करके इस संदेह की पुष्टि कर सकते हैं। इन विषमता को बढ़ावा देने वाले पदार्थों को भविष्य में रोगियों में नैदानिक परीक्षणों के लिए और विकसित किया जा सकता है।

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Protocol

1. दवा पुस्तकालय तैयार

  1. एक वांछित एकाग्रता (जैसे, डीएमएसओ में 10 एमएम) पर उपयुक्त विलायक का उपयोग करके जांच की जाने वाली दवा लाइब्रेरी की पहचान करें और तैयार करें।
    नोट: एक दवा पुस्तकालय के लिए एक विशिष्ट उदाहरण राष्ट्रीय कैंसर संस्थान (एनसीआई) विकास चिकित्सा कार्यक्रम (डीटीपी) से ऑन्कोलॉजी सेट III है। इस सेट में यौगिकों को दो 96-अच्छी पीपी यू-बॉटम प्लेटों में 100% डीएमएसओ में 10 एमएम पर 20 माइक्रोन के रूप में प्रदान किया जाता है और -20 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत किया जाता है। एनसीआई प्लेट नक्शे, और प्रत्येक दवा के बुनियादी रासायनिक डेटा निम्नलिखित वेबसाइटों पर पाया जा सकता है:
    एनसीआई प्लेट नंबर 4740
    एनसीआई प्लेट संख्या 4741

2. ड्रोसोफिला का उपयोग करके विषमचिकित्सा-बढ़ावा देने वाली दवाओं के लिए स्क्रीन

  1. ड्रोसोफिला प्रजनन रणनीति(चित्रा 1ए)
    1. 1 दिन: क्रॉस तीन डब्ल्यू१११८/Y; DX1/CyO पुरुष मक्खियों और तीन या अधिक कुंवारी डब्ल्यू१११८ महिला एक 25 मिमी x ९५ मिमी भोजन शीशी में मानक ड्रोसोफिला खाद्य मीडिया (ब्लूमिंगटन नुस्खा) के 9 mL के साथ मक्खियों । प्रत्येक दवा के लिए तीन प्रतिकृति शीशियों और स्क्रीन के लिए एक नियंत्रण स्थापित करें।
      नोट: DX1 मक्खियों कृपया जेम्स बिर्चलर (मिसौरी विश्वविद्यालय)9,,13द्वारा प्रदान किए गए थे ।
    2. दिन 2 और दिन 3: मक्खियों को कमरे के तापमान (22 डिग्री सेल्सियस) पर 2 दिनों के लिए अंडे डालने की अनुमति दें।
    3. 4 दिन: माता-पिता मक्खियों को एनेस्थेटिज़ करने और "फ्लाई मुर्दाघर" (70% अल्कोहल वाली बोतल) में माता-पिता मक्खियों का निपटान करने के लिए सीओ2 गैस के एक छोटे फट का उपयोग करें।
  2. जांच के लिए ड्रोसोफिला को दवाएं खिलाएं।
    1. मूल स्टॉक से प्रत्येक दवा यौगिक को पतला करें (96-अच्छी तरह से पीपी यू-बॉटम प्लेट्स में 100% डीएमएसओ में 10 एमएम पर 20 माइक्रोन) पानी में 33% DMSO के साथ 10 माइक्रोएम अंतिम एकाग्रता के लिए। नियंत्रण के रूप में किसी भी दवा के बिना पानी में 33% DMSO का प्रयोग करें।
      नोट: कुछ दवाओं पानी में खराब घुलनशील है और DMSO में भंग कर रहे थे । 100% डीएमएसओ मक्खियों के लिए विषाक्त है। 33% सहनीय है।
    2. 4 दिन: एक 10 μM दवा समाधान या मक्खी भोजन के शीर्ष पर नियंत्रण के पिपेट 60 μL। इस बिंदु पर, सुनिश्चित करें कि माता-पिता मक्खियों को हटा दिया गया है और भोजन पर अंडे उड़ने और रेंगने वाले पहले-इंस्टार लार्वा हैं।
    3. 6 दिन: खाद्य शीशी के लिए एक ही 10 μM दवा समाधान के 60 μl दोहराएं।
      नोट: चूंकि फ्लाई फूड में दवाओं को जोड़ा गया था, इसलिए शीर्ष सतह के भोजन में लगभग 10 माइक्रोन एकाग्रता होती है और नीचे के भोजन को पूरी तरह से प्रवेश नहीं किया जा सकता है। सभी मक्खियां भोजन के शीर्ष पर अंडे डालती हैं और शीर्ष सतह का भोजन खाती हैं।
  3. आंखों के रंग में परिवर्तन का निरीक्षण करें और स्कोर करें।
    1. एफ 1 मक्खियों के उभरने के दो दिन बाद (लगभग 14 दिन) मक्खियों की जांच करें। F1 मक्खियों को एनेस्थेटिज़ करने के लिए सीओ2 के एक छोटे से फट का उपयोग करें और एक फिल्टर पेपर के नीचे से सीओ2 के साथ एक असुरक्षित विच्छेदन पैड पर अपनी शीशी से मक्खियों को हटा दें।
    2. एक विच्छेदन माइक्रोस्कोप के तहत इस पैड पर मक्खियों का निरीक्षण करें। पूरी मक्खी की जांच करें और सभी डब्ल्यू1118/Y की पहचानकरें; DX1/+ विषमता पुरुषों उनकी कमी से CyO प्रमुख घुंघराले पंख फेनोटाइप ।
    3. डब्ल्यू1118/वाईमें से प्रत्येक की आंखों का रंगस्कोर; DX1/+ विषमता पुरुष 1 से 5 के पैमाने पर उड़ता है(चित्रा 1बी)। सफेद आंखों के रंग का प्रतिशत इस प्रकार आंका गया था:
      1. & 5% लाल बिखरे हुए आंख कुल सतह क्षेत्र
      2. 6% - 25% लाल धब्बे आंख कुल सतह क्षेत्र
      3. 26% - 50% लाल धब्बे आंख कुल सतह क्षेत्र
      4. 51% - 75% लाल धब्बे आंख कुल सतह क्षेत्र
      5. >75% लाल धब्बे आंख कुल सतह क्षेत्र
      नोट: वैकल्पिक रूप से, 100% मेथनॉल में फ्लाई हेड्स को समरूप करें और ओडी 450 एनएम पर आंखों के पिगमेंटेशन को मापने के लिए स्पेक्ट्रोमीटर का उपयोग करें। केवल पुरुषों का चयन करें क्योंकि PEV DX1 पुरुषों में अधिक सर्वोक्त है। प्रत्येक शीशी में 10 से अधिक पुरुषों का स्कोर करें।
    4. प्रत्येक शीशी से सभी पुरुषों के मतलब रंग सूचकांक की गणना करें। प्रत्येक यौगिक(चित्रा 1सी)के लिए ट्रिपलिकेट्स करें।
      नोट: चूंकि उम्र के साथ आंखों का रंग बदलता रहता है, इसलिए यह एक समय-संवेदनशील कदम है। आंखों के रंग की गणना एक ही उम्र में की जानी चाहिए - 2 दिन पुराना। आमतौर पर प्रत्येक शीशी में 10 मक्खियों को बनाए जाना चाहिए।
    5. इस बात की पुष्टि करने के लिए कि यौगिक वास्तव में विषमताके गठन को बढ़ावा देते हैं, मान्य करने के लिए पश्चिमी ब्लॉटिंग जैसी एक अलग तकनीक का उपयोग करें(चित्रा 1जी)।

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Representative Results

इस प्रोटोकॉल का सफलतापूर्वक उन यौगिकों को स्क्रीन करने के लिए इस्तेमाल किया गया था जो ड्रोसोफिलामें विषमता के गठन को बढ़ावा देते हैं, जो दवा विकास के लिए वीवो सिस्टम में एक कुशल और कम लागत वाला है(चित्रा 1)। हमने एक छोटे-अणु दवा पुस्तकालय, ऑन्कोलॉजी सेट III की जांच की, जो ड्रोसोफिला मेलानोगैस्टर (चित्रा 1बी)के DX1 तनाव का उपयोग करके 97 एफडीए अधिकृत ऑन्कोलॉजी दवाओं से बना है। एक महत्वपूर्ण दवा के परिणामों को बार ग्राफ(चित्रा 1सी, डी)में दर्शाया गया था। स्क्रीनिंग परख के अनुसार, मेथोट्रेक्सेट (4-aminopteroylglutamic एसिड), जो पुस्तकालय में E7 के रूप में कोडित है, DX1 तनाव में सबसे अधिक विविधता का कारण बना, सुझाव है कि मेथोट्रेक्सेट भविष्य के कैंसर लक्षित-चिकित्सा के लिए सबसे होनहार विषमता को बढ़ावा देने दवा हो सकता है(चित्रा 1ई, एफ)। आगे की पुष्टि करने के लिए कि यह वास्तव में विषमताके गठन को बढ़ावा देने वाले यौगिकों का परीक्षण कर रहा है, पश्चिमी दाग डेटा से पता चलता है कि हेट्रोक्रोमेटिन गठन से जुड़े प्रोटीन H3K9me3 को अपरेच किया जाता है(चित्रा 1जी),आगे सत्यापित करता है कि मेथोट्रेक्सेट सबसे होनहार हेट्रोक्रोमेटिन-बढ़ावा देने वाली दवा हो सकती है।

Figure 1
चित्रा 1: ड्रोसोफिलामें दवा स्क्रीनिंग का एक उदाहरण । (A) ड्रोसोफिला स्क्रीन पद्धति। ड्रोसोफिला मॉडल का उपयोग करके विषमरूपोमैटिन-प्रोवोत्तेर स्क्रीनिंग के लिए योजना का अवलोकन। तीन डब्ल्यू1118/वाई; DX1/CyO पुरुषों और तीन कुंवारी w१११८ कमरे के तापमान पर पार कर रहे हैं । फिर, चार दिन में वयस्क मक्खियों को हटा दें और क्रमशः दिन के चार और छह दिन में फ्लाई फूड के शीर्ष पर 33% DMSO समाधान में भंग 10 माइक्रोएम दवा के 60 माइक्रोन जोड़ें। 33% DMSO समाधान एक नियंत्रण के रूप में इस्तेमाल किया गया था। F1 पुरुष पीढ़ी के आंखों का रंग (सफेद से लाल) अनुपात देखा गया। (B)आई कलर फेनोटाइप एनालिसिस और स्कोर । आंखों के रंग की प्रतिनिधि छवियां विविध फेनोटाइप दिखाती हैं। विविध आंखों के रंग का प्रतिशत निम्नलिखित के रूप में मूल्यांकन किया गया था: कुल सतह क्षेत्र में 1, 1-5% लाल धब्बे; कुल सतह क्षेत्र में 2, 6-25% लाल धब्बे; कुल सतह क्षेत्र में 3, 26-50% लाल धब्बे; कुल सतह क्षेत्र में 4, 51-75% लाल धब्बे; और कुल सतह क्षेत्र में 5, और 75% लाल धब्बे। (स्केल बार = 200 माइक्रोन) (ग)प्रत्येक दवा को तीन स्वतंत्र प्रयोगों ± एस.डी. (मानक विचलन) से औसत मूल्यों के रूप में परख दिया गया था। लाल पट्टी नियंत्रण दिखाती है। (D)दवा E7 और नियंत्रण में किए गए पैमाने के परिणाम। यदि छात्र के टी-टेस्ट द्वारा पी-मूल्य और एलटी;0.05 (*) थे तो E7 और नियंत्रण समूहों के बीच मतभेद ों को महत्वपूर्ण माना जाता था।(ई)एक रासायनिक यौगिक की आणविक संरचना जिसे उदाहरण दवा पुस्तकालय में उपयोग किया जाने वाला E7 कहा जाता है। (एफ)E7 में मक्खी आंखों की प्रतिनिधि छवियां और उपचार समूह को नियंत्रित करें । (स्केल बार, 200 माइक्रोन) (जी)पश्चिमी दाग एचrd 3K9me3,एच3,या α-Tubulin के लिए विशिष्ट एंटीबॉडी के साथ 3 इंस्टार लार्वा कुल प्रोटीन के बिना या संकेत सांद्रित सांद्रता पर मेथोट्रेक्सेट उपचार के साथ उपयोग करके किया गया था । इस आंकड़े को लोयोला एट अल14से संशोधित किया गया है । कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

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Discussion

हेट्रोक्रोमाटिन डीएनए का एक गाढ़ा रूप है जो जीन अभिव्यक्ति को विनियमित करने में केंद्रीय भूमिका निभाता है। यह कैंसर में तेजी से अधिक पहचाना जा रहा है और कैंसर चिकित्सा के लिए एक संभावित लक्ष्य के रूप में काम कर सकता है15,16,1717,18। मानव शरीर में निर्माण, संरक्षण और चयापचय में लाभ के कारण छोटे अणु यौगिकों का उपयोग आमतौर पर दवा विकास में किया जाता है। हेट्रोक्रोमाटिन को बढ़ावा देने वाले छोटे अणु यौगिकों की पहचान करने के लिए, DX1ड्रोसोफिला तनाव का उपयोग करके एक कुशल विधि डिजाइन और प्रस्तुत की गई थी, जो विषमोक्रोमिन-निर्भर तरीके से मक्खियों की आंखों के रंग को प्रभावित करने के लिए साबित हुई है(चित्रा 1)।

हमारा स्क्रीनिंग प्रोटोकॉल दवा विकास के लिए वीवो सिस्टम में एक सरल, सस्ती और आसानी से पालन करने के लिए है। हालांकि, स्क्रीनिंग रणनीति की एक सीमा एक प्रभावी दवा एकाग्रता का निर्धारण कर रही है । मादा फल मक्खी अर्धठोस फ्लाई भोजन की सतह पर उसके अंडे देती है। दवा उपचार के लिए, हम भोजन की सतह के लिए दवा समाधान को पाइप करते हैं, जिसमें पूर्व निर्धारित एकाग्रता होती है। हालांकि, चूंकि विभिन्न दवाओं में भोजन के नीचे विसारित करने में अलग-अलग क्षमता हो सकती है, इसलिए दवा एकाग्रता को सतह के नीचे या भोजन के नीचे की ओर सुसंगत होने की गारंटी नहीं है। 10 μM एकाग्रता पर, घातकता शायद ही कभी लार्वा में देखा गया था पुस्तकालय में दवाओं में से किसी के साथ इलाज हम जांच की । हालांकि, अधिकांश दवाओं ने 100 माइक्रोन एकाग्रता पर लार्वा को गंभीर घातकता का कारण बना, सुझाव दिया कि दवा एकाग्रता को स्क्रीन के लिए एक महत्वपूर्ण कारक के रूप में भी माना जा सकता है।

यहां, हम देखते हैं कि यहां उपयोग किए जाने वाले लोगों के रूप में मिलकर दोहराता है, एक तंत्र द्वारा पीईवी को ट्रिगर कर सकता है जो कुछ में अलग है जो परिधि विषमता में देखा जाता है। भ्रूण और लार्वा विकास के दौरान पीईवी को प्रभावित करने वाली एक दवा (यहां वर्णित परीक्षण) केवल उन दवाओं की पहचान करेगी जो दैहिक कोशिकाओं में हेट्रोक्रोमाटिन के रखरखाव को प्रभावित करती हैं और उन दवाओं की पहचान नहीं करेंगी जो हेट्रोक्रोमेंटन के प्रारंभिक गठन को प्रभावित करती हैं, जो सबसे अधिक संभावना ब्लास्टोडेमम (परमाणु चक्र 10-14) के दौरान होती है। बहरहाल, यह एक त्वरित शुरुआती स्क्रीन के लिए एक उपयोगी परख हो सकता है।

यह प्रोटोकॉल इस ट्रांसजीन क्लस्टर(DX1)की संवेदनशीलता के कारण विषमता के गठन के लिए विश्वसनीय और लागत प्रभावी है, जो आंखों में मौजूद लाल पिगमेंटेशन की मात्रा से परिलक्षित होता है। इसके अतिरिक्त, ड्रोसोफिला की छोटी उम्र इस प्रोटोकॉल को जेब्राफिश या मानव कोशिकाओं जैसे अन्य मॉडल जीवों की तुलना में अधिक कुशल बनाती है। हालांकि संभावना है कि जेब्राफिश में मौजूद एक रिपोर्टर जीन प्रणाली हो सकती है जो विषमता के स्तर के प्रति संवेदनशील है, उनकी उम्र ड्रोसोफिला की तुलना में बहुत अधिक लंबी है और परिणाम प्राप्त करने में अधिक समय लगेगा। इसके अतिरिक्त, मानव कोशिकाओं का उपयोग करना संभव नहीं होगा क्योंकि यह प्रोटोकॉल विशेष रूप से विषमता के स्तर को निर्धारित करने के लिए एपिजेनेटिक विनियमन से फेनोटाइपिक परिवर्तनों का उपयोग करने पर केंद्रित है। इस प्रकार, यह प्रोटोकॉल यह निर्धारित करने के लिए वीवो विधि में एक कुशल प्रदान करता है कि कौन सी छोटी दवा अणु संभवतः कैंसर चिकित्सा विज्ञान में ऑनकोजीन को दबाने के लिए एक उम्मीदवार के रूप में काम कर सकता है। जबकि ड्रोसोफिला दवा स्क्रीनिंग विधि यौगिकों की पहचान करने के लिए एक धीमी गति से दृष्टिकोण है जब कुछ इन विट्रो स्क्रीनिंग विधियों के साथ तुलना में, यह अपेक्षाकृत संवेदनशील है और हमें वीवो में यौगिकों का परीक्षण करने की अनुमति देता है । सेल स्क्रीनिंग विधि के संयोजन में, जो अपेक्षाकृत सस्ती है, प्रदर्शन करने में आसान है और उच्च थ्रूपुट है, ड्रोसोफिला स्क्रीनिंग विधि का उपयोग पूरक विधि के रूप में हिट की पुष्टि करने के लिए भी किया जा सकता है।

संक्षेप में, आगे अनुसंधान के लिए यौगिकों की पहचान करने और कैंसर चिकित्सा के लिए विषमता को लक्षित करने में रुचि के साथ, हालांकि जिस तंत्र में यह हो रहा है, वह अभी तक पूरी तरह से समझ में नहीं आया है, पहचानकरने के लिए एक साधारण स्क्रीन का प्रदर्शन किया गया था हेट्रोक्रोमैटिन-दवाओं को बढ़ावा देने। एक कम एकाग्रता की खोज जिस पर एक दवा विषमता के गठन को बढ़ावा दे सकती है, अधिक अद्वितीय उपचार प्रदान कर सकती है जिसके परिणामस्वरूप आधुनिक कीमोथेरेपी उपचार की तुलना में कम दुष्प्रभाव हो सकते हैं।

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Disclosures

लेखकों के पास खुलासा करने के लिए हितों का कोई टकराव नहीं है ।

Acknowledgments

हम जे बिर्चलर, ई. बाख और ब्लूमिंगटन ड्रोसोफिला स्टॉक सेंटर को विभिन्न ड्रोसोफिला उपभेदों के लिए धन्यवाद देते हैं; ऑन्कोलॉजी सेट छोटे अणु दवा पुस्तकालय के लिए राष्ट्रीय कैंसर संस्थान (एनसीआई) विकासात्मक चिकित्सा कार्यक्रम; एमी चांग, Taesik तुम, जेसिका सिंह-बंगा, राहेल मेज़ा, और एलेक्स चावेज सहित UCSD स्नातक छात्रों । अनुसंधान इस प्रकाशन में रिपोर्ट अमेरिकी छाती सोसायटी से जेएल के लिए एक अनुसंधान अनुदान और NIH से धन द्वारा समर्थित था: R01GM131044 W.X.L.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Drosophila DX1 strain DX1 flies were kindly provided by James Birchler (University of Missouri)
Drosophila food media UCSD fly kitchen
Methotrexate NCI drug library
Dimethyl sulfoxide (DMSO) Sigma D2650
Ethyl alcohol Sigma E7023-500ML

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References

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जेनेटिक्स इश्यू 157 हेट्रोक्रोमेंटिन ट्यूमर दमन छोटे अणु यौगिक दवा स्क्रीनिंग हेट्रोक्रोमेंटिन को बढ़ावा देने वाली दवा सेल प्रसार ड्रोसोफिला लार्वा ड्रोसोफिला कोशिकाएं वयस्क ड्रोसोफिला,स्थिति-प्रभाव विविधता
<em>ड्रोसोफिला</em> का उपयोग करके हेट्रोक्रोमेंटिन-को बढ़ावा देने वाली दवाओं की पहचान के लिए एक स्क्रीनिंग विधि
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Zhang, L., Dao, K., Kang, A.,More

Zhang, L., Dao, K., Kang, A., Loyola, A. C., Shang, R., Li, J., Li, W. X. A Screening Method for Identification of Heterochromatin-Promoting Drugs Using Drosophila. J. Vis. Exp. (157), e60917, doi:10.3791/60917 (2020).

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