Summary
Heterotopik abdominal fare kalp nakli modelinde kan devresi rekonstrüksiyonu için yeni bir teknik gösterilmiştir.
Abstract
Farelerde heterotopik abdominal kalp naklinin cerrahi tekniği transplantasyon immünolojisinde araştırma için standart bir modeldir. Burada heterotopik abdominal kalp nakli modelinde modifiye kan devresi rekonstrüksiyonu için kurulan teknik sunulmuştur. Bu yöntem, alıcının alt vena kavasına anastomoz için donör kalbin pulmoner arteri yerine intratorasik inferior vena kavasını (IIVC) kullanır. Farelerde karın kalp nakli için başarı oranlarını kolaylaştırıyor ve iyileşiyor.
Introduction
Farelerde heterotopik abdominal kalp naklinin cerrahi tekniği transplantasyon immünolojisinde araştırma için standart bir modeli temsil eder1,2,3. Ancak, gerçekleştirmek çok zordur ve bu modelin yaygın kullanımına bir kısıtlama getirmektedir4,5.
Geleneksel fare kalbi naklinde (THTx), donör aort ve alıcı abdominal aort anastomos edilirken pulmoner arter alıcıya inferior vena kava6,7,8anastomos edilir.
Bu modifiye fare kalp nakli tekniğinde donör aort alıcı abdominal aorta ve donör IIVC alıcı inferior vena kava(3 , 4,6) ( Şekil2 ve Şekil 3)anastomosed edilir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Tüm hayvan deneyleri, Avrupa Parlamentosu'nun 2010/63/AB sayılı bilimsel amaçlarla kullanılan hayvanların korunmasına ilişkin direktifinin yönergelerine uygun olarak yapılmıştır (Etik kurul onaylı, #G1071/09).
NOT: Ön hazırlık, anestezi, ameliyat sonrası bakım ve izleme çalışmaları geleneksel cerrahi yöntemlerde yapılanla aynıdır1,2,4. BALB/c fareleri kalp bağışçısı, C57BL/6J ise nakil alıcısı olarak görev yaptı. Fareler 8-12 haftalıktı, transplantasyonda ~ 30 g ağırlığındaydı ve standart koşullar altında barındırıldı.
1. Hazırlık adımları
- Anestezi için farelere inhalatif izofluran verin (%2) uykuya dalana kadar, ardından ketamin (100 mg/ kg) + ksilazin (10 mg / kg) + asepromazin (2 mg / kg) intraperitoneal enjeksiyonları. Ameliyat sonrası analjezi için Metamizol (200 mg/kg) p.o. ve Carprofen (5 mg/kg) s.c.
NOT: Bu maddeler immünolojik yanıtları etkileyebileceğinden antibiyotik uygulaması kasıtlı olarak çekimser kaldı. - Ameliyat için mikro makas, mikro forseps, iğne tutucu ve mikro hemostatik kelepçeler dahil olmak üzere bir dizi mikroskobik alet kullanın. Elektrocerrahi bir kalem de gereklidir. 7/0er, 10/0er ve 4/0er naylon tiplerini kullanarak dikişleri gerçekleştirin.
- Fareyi izofluran soluma için bir kutuya yerleştirin (%2) 40-60 saniye boyunca. Pençeyi cımbızla sıkarak anestezinin derinliğini belirleyin. Bu uyaran için tam bir yanıt eksikliği varsa, bir sonraki adıma geçin.
- Fare uykuya daldığında, fareyi tartın.
- Uyuşturulmuş fareye ketamin (100 mg/kg) + ksilazin (10 mg/kg) + asepromazin (2 mg/kg) intraperitoneal enjeksiyon uygulayın.
- Karın kürkü kırpın ve fareyi ameliyat masasına yerleştirin. 3 kez povidone iyodür kullanarak dezenfeksiyon gerçekleştirin, ardından fenestrated cerrahi havlu kullanarak fareyi düzgün bir şekilde örtün.
2. Donör operasyon prosedürü
- Cildi boyundan alt karın bölgesine kesmek için makas kullanın ve cildin tam tabakasını her iki aksillanın orta çizgisine kadar soyun.
- Karın duvarının kaslarını kesmek için makas kullanın ve visserayı yavaşça sola doğru hareket ettirin (operatörün görüşüne göre). İç organları, alt vena kavayı güvenli bir şekilde ortaya çıkarmak için tuzlu imbibed gazlı bezle sarın.
- Heparin çözeltisinin 0,4 mL'lik kısmını (500 U heparin içerir) yavaşça alt vena kavasına enjekte etmek için 1 mL şırınga kullanın ve iğneyi çıkarmadan önce 1 dakika bekleyin.
- İğneyi çekin ve eksanguinasyonu hızlandırmak için hem alt vena kavayı hem de abdominal aortu kesmek için bir mikro makas kullanın.
- U şeklinde bir kesim yaparak göğüs boşluğunu açmak için makas kullanın; kalbi, akciğerleri ve tüm göğüs kan damarlarını tamamen açığa çıkarır.
- Torasik aortu aort süzül, lümenin 1/2'sini kesin ve ardından sulama ve drenajı kolaylaştırmak için pulmoner damarı kesin.
- Torasik aortun açıklığı içine bir sulama tüpü yerleştirin, pulmoner damar çıkışı tamamen temizleninceye ve kalp tamamen durana kadar en az 2 mL 4 °C soğuk histidin-triptofan-ketoglutarat kardiyopleji çözeltisi (Custodiol HTK çözeltisi)9 enjekte edin.
- Sulama tüpünü çıkarın ve sternumu ayırın.
- Timus çıkarmak ve aort kemerinin etrafındaki yağı hafifçe soymak için mikro makas kullanın.
- Arteri pulmonalis gövdesini (aort kemerinin sağ tarafında) 10/0 dikişle ortaya çıkarmak ve ligate etmek için düz ve kavisli önlük kullanın.
- IIVC'ye bağlı yağ ve bağ dokusunu ayırmak, üstün vena kavayı (aort kemerinin sol tarafında) 7/0 dikişle ortaya çıkarmak ve ligatlamak için mikro makas kullanmak için mikro tokmak kullanın.
- Aort kemerinin, IIVC'nin ve her iki kulak kepçesinin altındaki kalbin tabanı etrafında 7/0 dikiş yapın. Daha sonra pulmoner arter dallarını ve venöz akciğer damarlarını ligat.
- Aort kemerini mümkün olduğunca distal, bağın altındaki akciğer damarlarını ve diyaframın yakınındaki IIVC'yi transekte etmek için mikro makas kullanın. Kalbi göğsünden çıkar.
- Ekilen donörün kalbini 4 °C soğuk HTK kardiyopleji çözeltisine yerleştirin ve geçici olarak koruyun.
3. Alıcı operasyon prosedürü
NOT: İlk operasyon adımları, anestezi ve dezenfeksiyon da dahil olmak üzere donör fare için daha önce gösterilenlere benzer.
- Karın derisinin enine bir şekilde kesilmesini gerçekleştirin, tuzlu su çözeltisi kullanarak karın organlarını ıslak bir gazlı bezle örtün.
- Alt vena kava ve abdominal aortu ortaya çıkarmak ve onları çevreleyen yağ dokusundan kurtarmak için mikro tokmaklar kullanın.
- Yan dal damarlarını (yanal veya damar/aort altında) renal damarların altında lige etmek veya elektrokouterize etmek için mikro tokalar kullanın.
- Klips aplikatör forsepsleri, her iki aort/ damar için de 1 cm'den fazla mesafe bırakarak sağdan gelen venin / aortun karın kısmına iki mikro hemostatik kelepçe yerleştirmek için, aralarında anastomozun inşası için alan sağlamak için kullanın.
- Aort içine bir kesi yapmak için mikro makas kullanın alt kelepçeye üst kelepçeye göre biraz daha yakın. Alternatif olarak, küçük bir delik açmak ve mikro makasla açmak için 30 G'lik bir iğne kullanın.
- Alıcı fareyi, aort diğer tarafta vena kava ile operatöre bakacak şekilde konumlandırın. Daha sonra kalbi karın boşluğuna yerleştirin ve küçük bir ıslak gazlı bezle örtün.
- Donör aortunu alıcı aorta kaudally başlayarak uyarlamak ve dikmek için 10/0 dikiş kullanın, bir düğüm yapın ve kesiğin tepesine (yaklaşık 4-5 dikiş) çalışan bir dikişle devam edin. Daha sonra, kalbi sağa çevirin (öznenin görüşüne göre), tekrar örtün ve kaudal uca ulaşana kadar sol tarafta dikişe devam edin ve düğüm atın.
- Donörün IIVC'sını yıkamak için en az 0,5 mL 4 °C HTK kardiyopleji çözeltisi enjekte etmek için bir sulama tüpü kullanın.
- Alıcının karın inferior vena kavasında aynı boyutta donör IIVC lümenine sahip olması gereken yuvarlak bir delik açmak için mikro makas kullanın. Kesi aort anastomoz açıklığın üzerinde bulunmalıdır. Damar kesisini aort kesisinden daha büyük hale getirin.
- Donör IIVC'yi alıcı vena cava'ya dikmek için 10/0 dikiş kullanın. Bir düğüm bağlayın ve kesiğin tepesine ulaşılana kadar akan bir dikiş gerçekleştirin. Beş dikiş kullanın ve soldaki dikişe devam edin. Son olarak, kuyruk köşesine bir düğüm bağlayın ve dikkatlice sıkın (çok sıkı çekmemeye dikkat edin).
- Hemostatik süngerin küçük kısımlarını damarın ve aort anastomozlarının etrafına yerleştirin.
- Önce alt ve sonra üst mikro-hemostatik kelepçeleri çıkarmak ve karın boşluğunu 38.0 °C temperli% 0.9 sodyum klorür ile durulamak için klips aplikatör tokalarını kullanın.
- Hemostatik süngeri almak için mikroasipler kullanın.
- Nakledilen kalbin kalp atışını gözlemleyin.
- Bağırsakları tekrar karın boşluğuna koymak için önseçimleri ve karın yarasını 4/0 dikişle kapatmak için iki katmanlı dikişleri (karın kasları ve ardından cilt) kullanın.
- Nakledilen farelerin iyileşmesi için sıcak ve oksijen bakımından zengin bir ortam sağlamak için fareleri bir oksijen ve sıcaklık kontrol iş istasyonu odasına (örneğin INVIVO2-400) koyun, farelerin uyanmasını bekleyin.
- Ameliyat sonrası analjezi için, operasyondan sonra metamizol'e doğrudan os başına 200 mg/kg verin. Operasyondan dört ve 16 saat sonra Metamizol'e os+ Carprofen (5mg/kg) s.c başına 200 mg/kg verin. Daha sonraki takipte, operasyondan sonraki üç gün boyunca her 24 saatte bir nakledilen farelere Carprofen (5 mg / kg) s.c verin.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Burada, daha önce laboratuvarımızda geliştirilen ve son 16 yıldır yararlı olduğu kanıtlanmış farelerde heterotopik abdominal kalp naklinin değiştirilmiş bir tekniği sunulmaktadır. Daha önce, genel olarak 40 vena kava olgusunda vena cava (V-V grubu) geleneksel pulmoner arterden vena cava (P-V grubu) anastomoz prosedürü4 (Tablo 1)'yekıyasla, anastomoz damarının V-V grubunda 20.8±1.3 dakika sürdüğü bildirilmiştir. P-V grubundan önemli ölçüde daha kısaydı (27.5±1.3 dk, p<0.01). Sırasıyla 25.5.5±1.2 dk, 42.0±1.5dk ve ±1.1.0.2 dk olan sıcak iskemi süresi, toplam alıcı operasyon süresi ve ameliyat sonrası kalp tekrarlama süresi de geleneksel P-V grubunda (hepsi p<0.05) gözlenenden önemli ölçüde kısaltıldı(Şekil 1). Bu modelde uzun süre hayatta kalma oranları için herhangi bir fark olmasa da10,11, modifiye teknik farelerde karın kalbi naklini kolaylaştırdı ve hem ılık iskemi hem de aşılı kalp rebeating süresi ile sonuçlandı.
Daha önce yayınlanan bu veriler ve son 16 yıl içinde bu modelle olan deneyimimiz ile ilgili olarak, önemli işlem adımlarının% 90 >4başarı oranı sağlamak için sınırlı bir süre almasını öneririz. Bu nedenle, donör kalbin toplanması 60 dakikadan uzun sürmezse, soğuk iskemi süresi maksimum 40 dakika ile sınırlandırılmalı ve IIVC anastomozunun inşası 15 dakikadan uzun sürmemelidir, çünkü bu doğrudan azaltılmış sıcak iskemi süresi ile ilişkilidir.
Şekil 1. İki işlem tekniği arasındaki işlem sürelerinin karşılaştırılması (n =40'ın her biri, ortalama + SE) Bu şeklin daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 2. Geleneksel (a, sol üst) ve modifiye (b, sol alt) fare kalp nakli modelini kullanarak donör kalp hazırlığı. A ve b panellerindeki fotoğraflar donör kalbin aort (A), pulmoner arter (PA), sağ atriyum (RA), sol atriyum (LA) ve intratorasik inferior vena kavasını (IIVC) tasvir eder. PA'nın iivc ile karşılaştırıldığında damar uzunluğu farkına dikkat edin. Panel c, heterotopik abdominal HTX için hazırlanan alıcı situs'u gösterir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 3. Modifiye modelin vasküler anastomoz: aort (A), intratorasik inferior vena kava (IIVC), abdominal inferior vena cava (aivc), abdominal aort (aa). Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 4. Pulmoner arter (PA) ve intratorasik inferior vena kava (IIVC) için damar uzunluğu gösterimi. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 5. İntratorasik inferior vena kavanın sonunda fizyolojik trompet şekli. Aort (A), intratorasik inferior vena kava (IIVC), sağ atriyum (RA), sol atriyum (LA). Soldaki sol kırmızı çift ok çapı ve sağdaki kırmızı daireyi trompet şeklinin yapısını vurgular. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
| Vena cava için vena cava (yeni yöntem) | Pulmoner A to vena cava (geleneksel yöntem) | |
| Donör temini (min) | 12.8 + 0.3 | 11.4 + 0.4 |
| Alıcı işlemi (min) | 42.0 + 1.5 | 48.6 + 1.4** |
| Damar anastomoz (dk) | 20.8 + 1.3 | 27,5 + 1,3** |
| Soğuk iskemi (dk) | 32.8 + 0.6 | 34.2 + 0.7 |
| Sıcak iskemi (dk) | 25.5 + 1.2 | 32.6 + 1.3** |
| Ameliyat sonrası yeniden gönderme (dk) | 1.1 + 0.2 | 2.1 + 0.4* |
| Başarı oranı | 92.50% | 90.00% |
| *P < 0,05 | ||
| **P < 0.01. |
Tablo 1. İki operasyonda zaman dağılımları ve ilk sonuçların karşılaştırılması (n - 40, ortalama + SE)
Wu, K., Zhang, J., Fu, J., Wu, S., Philipp, T., Uwe, H., Kribben, A. ve Witzke'den yeniden basıldı, fare kalp nakli modelinde kan devresi rekonstrüksiyonu için O. Novel tekniği. mikrocerrahi. 26, 594-598 (2006).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Farelerde heterotopik abdominal kalp naklinin cerrahi tekniği çok zordur ve bu, bu modelin yaygın kullanımına bir kısıtlama getirmekle ilgilidir.
Konvansiyonel tekniğin dezavantajlarından biri, donörün pulmoner arterinin (PA) sınırlayıcı uzunluğudur. Genellikle yaklaşık 2 mm uzunluğundadır, modelimizde kullanılan donör kalbin IIVC uzunluğu genellikle yaklaşık 1 cm'dir (Şekil 2). Bu, modifiye modelde, IIVC anastomozunun, anastomozların daha iyi ameliyatını sağlayan ve çok katı dikişlerin istenmeyen gelişimini ve hatta damarların lezyonlarına zarar vermesini önleyen operasyon situsunun daha net bir görüntüsünü sunduğu anlamına gelir(Şekil 4). Hem PA'nın hem de IIVC anastomozunun inşası deneyimli operatörler için bile zordur. PA çok hassas ve ince duvarlı ve IIVC farelerde daha ince ve potansiyel olarak daha kırılgan. Bu nedenle, operatörlerin bu kısıtlamanın farkında olmaları ve IIVC'yi dikirken dikkatli olmaları gerekir. Bununla birlikte, bu noktada, IIVC damar duvarının çok ince olmasına rağmen, damar uzunluğunun kan damarı bağlantısına gerginlikle ilişkili olmamasının büyük avantaja sahip olduğunu ve böylece hassas bir dikişin uygulanmasını daha kolay ve hasara daha az eğilimli hale getirdiğini vurgulamak önemlidir. Başarılı bir çalışma sonucu için damar dikişlerinin temkinli ve güvenli bir şekilde uygulanması çok kritik olduğundan, situsun 10 ila 20 kat büyütülmesi önerilir.
Ek olarak, IIVC'nin torasik segmentinin sonu tipik trompet şeklinde bir yapı oluşturur (Şekil 5). Daha büyük açıklık çapı, IIVC'nin seçilebilmesinin önemli ve faydalı nedenlerinden birini temsil eder. Kullanımı yeterli bir anastomozun uygulanmasını kolaylaştırır. Bu hem operasyonun zorliğini hem de çalışma süresini azaltır.
Nakil prosedürünün sonucunu tehlikeye atabilecek olası bir olay, genellikle bir darlık tarafından beslenen damar anastomozunun trombozini temsil eder. Modelimizde geminin uzunluğu bilerek artsa da, bu trombunun oluşumu ile ilişkili değildi. IIVC'nin trompet şeklindeki anastomozu da anastomik darlık oluşumunu büyük ölçüde azaltırken olumlu bir etki gösterebilir. Bu nedenle, bu prosedür için posttransplant heparinizasyon gerekli değildir.
IVC-aivc anastomosis yönteminin önceki bir analizi, geleneksel teknik10ile karşılaştırıldığında çeşitli avantajlar ve iyileştirmeler ortaya koydu. Bu sonuçlarla ilgili olarak ve uzun süredir devam eden deneyimimiz4, 10,12,13'ünretrospektif açısından, bu teknik hem ılık iskeminin azalması hem de aşılı kalbin rebeating süresi ile sonuçlanır. Bu model10için uzun süre hayatta kalma oranları için herhangi bir fark olmasa da, burada sunulan modifiye teknik, anostomotik damar rekonstrüksiyonu kolaylaştırmaktadır, böylece farelerde karın kalp naklinin zorliğini azaltır. Bu nedenle bu modelin eğitimi ve uygulanması, immünolojik ve kardiyak araştırma amacıyla farelerde abdominal kalp naklinin erişilebilirliğini ve yaygın uygulamasını artırabilir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
hiç kimse.
Acknowledgments
Seslendirme sanatçısı olarak yardımları için Dr. Yun Xu'ya, video düzenlemedeki yardımları için Dr. med. Jianhua Peng'e ve yorumları ve desteği için Dr. Annika Kuckhahn'a teşekkür ederiz. Bu çalışma kısmen Alman Araştırma Vakfı (DFG) tarafından uluslararası işbirliklerini (HO2581/4-1'den AH'ye) ve Çin Ulusal Bilim Vakfı (NSFC; FJ'ye #81760291) tarafından desteklendi.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 30G-needles | Braun | 456300 | |
| acepromazine | CP Pharma | Tranquisol P | |
| BALB/c AnNCrl mice | Charles River. Germany | no catalog number | |
| Bepanthen eye ointment | Haus-Apotheke | PZN 01578675 | |
| Bonn Micro Forceps | FST | 11083-07 | |
| Box for insulation and oxygen supply device | RUSKINN | INVIV | |
| C57BL/6J mice | Charles River. Germany | no catalog number | |
| Carprofen | Zoetis | Rimadyl 50 mg/ml | |
| CATHETER-FEP 26G | TERUMO | Surflo-W | |
| Clip Applicator Forceps Style | FST | 18057-14 | |
| Curved forceps | WPI | 14114-G | |
| custodiol/HTK | Dr. Franz Köhler Chemie | no catalog numer | |
| Cutasept skin disinfection | VWR | BODL980365 | |
| electrosurgical pen | Bovie | CHANGE-A-TIP | |
| gauze pads, cotton swabs | Lohmann-Rauscher | 13353 | |
| Heating mat | THERMO MAT PRO 30W | HTP-30 | |
| Hemostatic sponge | CuraSpon | J1276A | |
| heparine-solution | Haus-Apotheke | PZN 03029820 | |
| Ice box | PETZ | No Catalog Number available | |
| Inhalation anesthesia device | GROPPLER | BKGM 0616 | |
| insulation and oxygen supply device | RUSKINN | INVIV | |
| isoflurane | CP Pharma | Isofluran CP 1 ml/ml | |
| ketamine | Zoetis | no catalog numer | |
| metamizole | WDT | no catalog numer | |
| Micro scissors | FST | 15000-00,15000-10 | |
| Micro Serrefine ( Clamp ) Angled / 16 mm | FST | 18055-06 | |
| Microscope | Leica | LEICAMZ6 | |
| Microscope light | SCHOTT | KL2500LED | |
| Saline solution (NaCl 0.9%) | Haus-Apotheke | PZN 06178437 | |
| Scissors | Peha Instruments | 991083/4 | |
| small Petri dish | Sarstedt | 833900 | |
| Straight forceps | WPI | 14113-G | |
| surgical tape | BSN | 4120 | |
| Suture Tying Forceps - 10 cm | FST | 18025-10 | |
| Sutures(10-0) | Medtronic | N2540 | |
| Sutures(4-0) | ETHILON | V4940H | |
| Sutures(7-0) | ETHILON | 1647H | |
| Syringe (0.3 mL) | BD | 324826 | |
| Syringe (1 mL) | BD | 320801 | |
| xylazine | Bayer | Rompun |
References
- Corry, R., Winn, H., Russell, P. Primarily vascularized allografts of heart in mice. Transplantation. 16, 343-350 (1973).
- Habertheuer, A., et al. Donor tissue-specific exosome profiling enables noninvasive monitoring of acute rejection in mouse allogeneic heart transplantation. Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 155 (6), 2479-2489 (2018).
- Plenter, R. J., Zamora, M. R., Grazia, T. J. Four decades of vascularized heterotopic cardiac transplantation in the mouse. Journal of Investigative Surgery. 26, 223-228 (2013).
- Wu, K., et al. Novel technique for blood circuit reconstruction in mouse heart transplantation model. Microsurgery. 26, 594-598 (2006).
- Alamran, F. G., Shahkolahi, M. M. Total arterial anastomosis heterotopic heart transplantation model. Transplantation Proceedings. 45, 625-629 (2013).
- Melanie, L., et al. Potential of Heterotopic Cardiac Transplantation in Mice as a Model for Elucidating Mechanisms of Graft Rejection. Cardiac Transplantation. Moffatt-Bruce, S. D., et al. , IntechOpen (2012).
- Westhofen, S., et al. The heterotopic heart transplantation in mice as a small animal model to study mechanical unloading - Establishment of the procedure, perioperative management and postoperative scoring. PLoS One. 14 (4), 0214513 (2019).
- Wang, C., Wang, Z., Allen, R., Bishop, G. A., Sharland, A. F. A Modified Method for Heterotopic Mouse Heart Transplantion. Journal of Visualized Experiments. (88), e51423 (2014).
- Mokbel, M., et al. Histidine-Tryptophan-Ketoglutarate Solution for Donor Heart Preservation Is Safe for Transplantation. Annals of Thoracic Surgery. 109 (3), 763-770 (2020).
- Song, S., et al. Modified Suture Technique in a Mouse Heart Transplant Model. Asian Journal of Surgery. 34 (2), 86-91 (2011).
- Martins, P. N. Assessment of graft function in rodent models of heart transplantation. Microsurgery. 28 (7), 565-570 (2008).
- Wu, K., et al. cold storage using a new histidine-tryptophan-ketoglutarate-based preservation solution in isogeneic cardiac mouse grafts. European Heart Journal. 32 (4), 509-516 (2011).
- Türk, T. R., et al. Reduction of chronic graft injury with a new HTK-based preservation solution in a murine heart transplantation model. Cryobiology. 64 (3), 273-278 (2012).
