Summary
在这里,我们描述了一种使用光学相干断层扫描的 体内 成像技术,以促进小鼠视网膜病变的诊断和定量测量。
Abstract
光学相干断层扫描(OCT)为视网膜病变的诊断提供了一种无创方法。OCT机器可以捕获视网膜横截面图像,从中可以计算视网膜厚度。虽然OCT在临床实践中应用广泛,但其在基础研究中的应用并不普遍,特别是在小鼠等小动物中。由于它们的眼球体积小,因此在小鼠中进行眼底成像检查具有挑战性。因此,需要专门的视网膜成像系统来适应小动物的OCT成像。本文演示了用于OCT检查程序的小动物特异性系统和图像分析的详细方法。介绍极低密度脂蛋白受体(Vldlr)敲除小鼠和C57BL / 6J小鼠的视网膜OCT检查结果。C57BL/6J小鼠的OCT图像显示视网膜层,而 Vldlr 敲除小鼠的OCT图像显示视网膜下新生血管形成和视网膜变薄。综上所述,OCT检查有助于小鼠模型中视网膜病变的无创检测和测量。
Introduction
光学相干断层扫描(OCT)是一种成像技术,可以为组织1,2,3,4,5,6,7,8提供体内高分辨率和横截面成像,特别是用于视网膜的无创检查9,10,11,12.它还可用于量化一些重要的生物标志物,如视网膜厚度和视网膜神经纤维层厚度。OCT的原理是光学相干反射法,它从样品反射的光的相干性中获得横截面组织信息,并通过计算机系统7将其转换为图形或数字形式。OCT广泛用于眼科诊所,是视网膜疾病患者诊断、随访和管理的重要工具。它还可以深入了解视网膜疾病的发病机制。
除了临床应用,OCT还被用于动物研究。虽然病理学是形态学表征的金标准,但OCT具有无创体内成像和纵向随访的优势。此外,已经表明OCT与视网膜病变动物模型中的组织病理学密切相关11,13,14,15,16,17,18,19,20。小鼠是生物医学研究中最常用的动物。然而,它的小眼球对小鼠进行OCT成像提出了技术挑战。
与最初用于小鼠视网膜成像的OCT相比21,22,小动物中的OCT现在已经在硬件和软件系统方面进行了优化。例如,OCT与跟踪器结合使用,可显着降低信噪比;OCT软件系统升级允许自动检测更多的视网膜层;集成的 DLP 光束器有助于减少运动伪影。
极低密度脂蛋白受体(Vldlr)是内皮细胞中的跨膜蛋白。它在视网膜血管内皮细胞、视网膜色素上皮细胞和外限制膜23、24周围表达。视网膜下新生血管形成是 Vldlr 敲除小鼠23的表型。因此, Vldlr 敲除小鼠用于研究视网膜下新生血管的发病机制和潜在治疗。本文演示了OCT成像在 Vldlr 敲除小鼠视网膜病变检测中的应用,希望为小动物模型中的视网膜病变研究提供一些技术参考。
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Protocol
这些手术是根据视觉和眼科研究协会关于在眼科和视力研究中使用动物的声明进行的。实验设计得到了机构动物伦理委员会(JSIEC医学伦理委员会,EC 20171213(4)-P01)的批准。本研究使用两个月大的C57BL / 6J小鼠和 Vldlr 敲除小鼠。每组有7只小鼠,均为雌性,体重20g至24g。
1. 实验条件
- 将小鼠分为两组:由 Vldlr 敲除小鼠组成的实验组和由C57BL / 6J小鼠组成的对照组。
- 用常规的食物和水喂养小鼠。
- 在室温(22°C),湿度(50-60%),明暗循环(12小时-12小时)和室光强度(350-400勒克斯)的稳定条件下在动物实验室中饲养小鼠。
- 准备实验设备:用于小动物的光学相干断层扫描与共聚焦扫描激光检眼镜(cSLO)(图1A)。
- 准备实验所需的所有材料(图1B)并称量小鼠(图1C)。
2. 信息记录
- 记录信息:组别、代码、出生日期、年龄、性别、体重和麻醉剂剂量。
3. 仪器启动和测试
- 打开计算机并启动软件。
- 单击“测试程序”按钮以完成 测试程序 。
- 打开恒温器并将其预热至37°C的温度。
- 程序测试后启动 OCT模块 过程。
- 创建一个新主题并填写鼠标信息。
- 预热电热毯并用手术毛巾盖住。
4. 麻醉
- 使用含有替他明和唑拉西泮的冻干麻醉粉制备麻醉剂混合物。
注意:遵循当地动物伦理委员会关于麻醉给药的选择、剂量和途径的建议。用麻醉剂麻醉动物,麻醉剂将提供至少1小时的不动和疼痛感知丧失,之后动物迅速恢复。剂量应根据实验时间的长短、动物体重和其他因素而定。 - 使用制备的麻醉剂混合物麻醉动物。确保在整个过程中保持动物温暖,直到恢复。
5.散瞳滴剂的应用
- 实现由肋骨对鼠标的手动约束,使眼球略微突出,一只眼睛朝上旋转鼠标头。
- 应用散瞳滴剂以扩张瞳孔(图2A)。
- 10分钟后检查瞳孔散大。
6. 鼠标的放置
- 将鼠标放在电热毯平台上。
- 用医用透明质酸钠凝胶涂覆双眼(图2B)。
- 在cSLO设备上拧上60 D双球面透镜(预设镜头)(图1A-5,6)。
- 将100 D隐形眼镜放在小鼠角膜上,凹面接触角膜表面上的透明质酸钠凝胶(图2C,D和图3A-II)。
- 将鼠标放在小型恒温动物平台上,并将眼睛与cSLO设备的镜头保持1-2毫米的距离(图3A)。
- 用镊子调整隐形眼镜的角度,使瞳孔保持在镜片的中心。
- 微调头部的调整,使眼睛面向正前方。
7. 共聚焦扫描激光检眼镜 (cSLO)
- 单击 OCT 按钮,选择 鼠标 模块,然后启动 cSLO 程序(图 4B)。
- 选择红外模式(光源:红光),并调整参数(范围:2047,图4D)。
- 选择要检查的眼睛(右眼:图4C-1;左眼:图4C-2)。
- 控制控制杆并将预设镜片缓慢移向隐形眼镜。
- 调整屈光度值,直到后极成像清晰(图4E)。
- 进一步调整以对齐视网膜后极的图像,将其集中在视神经头上。
8. 光学相干断层扫描 (OCT)
- 启动 OCT 程序(图 4G)。
- 向上和向下单击进度条,直到出现 OCT 图像(图 4H)。
- 调整参数:最小范围(图 4I)= 0-20,最大范围(图 4J)= 40-60。
- 调整预设镜头距离和位置方向,直到获得理想的OCT图像。
- 通过移动cSLO中的标准线来选择扫描位置(图4M)。
- 从视神经头开始扫描。
- 以相同的顺序为每只眼睛收集图像:水平线:视神经头→优→下;垂直线:视神经头→鼻→颞。
- 从四个方向收集图像。
- 单击平均值以叠加 cSLO 和 OCT 图像信号(图 4F 和图 4O)。
- 单击 拍摄 按钮以获取 SLO-OCT 图像(图 4P)。
- 保存并导出所有图像(图4Q,R)。
9.实验结束(OCT考试后)
- 将鼠标放在电热毯上以保持温暖,直到它醒来。
注意:应监测小鼠,直到它恢复足够的意识以维持胸骨卧位。术后应尽量减少暴露于强光下。 - 取下 100 D 隐形眼镜。
- 使用左氧氟沙星眼部凝胶保护角膜。
- 唤醒后将鼠标放回笼子中。
注意:确保在完全恢复之前,检查的鼠标不会返回给其他小鼠的公司。 - 关闭软件并关闭计算机。
- 用水清洁100D隐形眼镜;擦干镜片。
- 清洁和消毒环境。
10. 图像分析
- 将 Vldlr 敲除小鼠的OCT图像与C57BL / 6J小鼠的图像进行比较。
- 观察多个位置:垂直和水平扫描穿过视;上、下、鼻和颞扫描;和异常反射部位扫描。
- 观察每个图像中视网膜的厚度、形状、分层和异常反射率病变,以及视网膜和玻璃体的玻璃体界面。
- 记录病变的位置、特征和数量。
11.视网膜分层矫正
- 单击 OCT 界面上的 负载检查 (图 5A)。
- 从弹出窗口中调出鼠标的 OCT 图像。
- 选择图像:OCT图像水平或垂直扫描视。
- 双击 媒体容器 中的图像以将其显示在屏幕上(图 5C)。
- 单击 层检测 以完成视网膜上的自动分层(图 5D)。
- 选择准备用于分析的图层两侧的分界线(图 6D-10)。
- 选择一条单独的分界线(图 6B-6),然后单击编辑图层(图 6A-1),以便在出现红色圆圈时激活该线(图 6B-7)。
- 调整间距(图 6A-4,例如 50)和极限范围(图 6A-5,例如 50)。
- 通过移动红色圆圈修改分界线(比较图 6B 和图 6C 中的绿色分界线;图 6C 显示了修改后的结果)。
12.视网膜层压厚度
- 单击测量标记按钮(图 6D-9)。
- 选择要分析的层的分界线(例如,在外核层中,选择列表中的第 4 和第 5分界线)以在 OCT 图像上显示层的边界(图 6D-10)。
- 选择与图层连接(图 6D-11)并在移动时保持连接(图 6D-12)。
- 选择要显示结果的区域(所选列为彩色,图 6D-13)。
- 在OCT图像上单击要分析的位置以使测量线出现(垂直于水平轴并与结果区域的颜色一致)(图6D-14)。
- 单击下一列进行下一次测量并显示先前的数据(图6E-15)。
- 读取以μm(组织)为单位的长度行中的Vert值(测量位置的厚度)(图6E,红色矩形)。
- 单击删除标记(图6E-16)和新标记(图6E-17)重新测试,以便结果将涵盖原始数据(如果需要重新测量)。
- 按键盘上的 打印Scr 保存屏幕截图,或单击保存 检查 直接保存(图5H)。
- 将数据输入电子表格或统计软件进行统计分析。
13. 视网膜全厚度的测量
- 选择 线 1 (ILM,内限膜, 图 7B)和 线 7 (OS-RPE,OS:外部感光器段;RPE:视网膜色素上皮层, 图7C)在右上角的列表中。
注意:全视网膜厚度是指视网膜神经上皮层的厚度,即 OCT 时 ILM 和 OS-RPE 之间的视网膜)。 - 以特定间隔测量视两侧的视网膜厚度。
- 例如:从视边缘视网膜结构的外观来看,用水平尺的200μm间距测量4个值(图7G,H)。
- 将所有测量值记录在电子表格中。
- 使用多个 t 检验(每行一个)比较两组中每个对应位置的测量值。
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Representative Results
由于OCT的高分辨率扫描,可以观察到小鼠视网膜的层,并且可以识别异常反射及其确切位置。本研究比较了 Vldlr 敲除小鼠和C57BL / 6J小鼠的视网膜OCT图像。所有C57BL / 6J小鼠的OCT图像显示出具有不同反射率的各种视网膜层,并且分界清晰(图8D)。相比之下,所有 Vldlr 敲除小鼠在OCT图像上都显示出异常的高反射性病变(图8B)。
Vldlr 敲除小鼠中的不完全玻璃体脱离 (PVD)
OCT结果显示 Vldlr 敲除小鼠的视网膜表面有一些中间反射带(图8B,红色箭头)。这些中间反射带粘附在视网膜血管上(图8B,绿色箭头),对应于cSLO图像(图8A,绿色箭头)。这些特征与不完全玻璃体脱离的OCT特征一致。
Vldlr敲除小鼠视网膜下新生血管形成
结果表明, Vldlr 基因敲除小鼠视网膜下新生血管具有两种发育模式。
外核层的参与
OCT图像上具有自下三角形的高反射病变出现在视网膜下间隙并扩散到外核层。病变没有突破外丛状层(图8B,白色箭头)。
这种类型的视网膜下新生血管的OCT外观与图9A所示的病理发现一致。病理切片显示新生血管形成(图9A,粗绿色箭头)突破RPE,感光器内/外段(IS/OS)和外部限制膜(ELM)。它侵入了外核层(ONL),但没有突破外层丛状层(OPL)。
不涉及外核层
OCT图像上出现一条高反射病变带,位于视网膜下空间(图8B,黄色箭头)。cSLO图像显示了相应的位置(图8A,黄色箭头)。该位置周围视网膜的额外扫描(图8A,黄色箭头)显示了相同的发现。
与病理切片中的病变(图10A,粗蓝色箭头)一致,这种视网膜下新生血管没有突破ELM(图10A,细黄色箭头),而是部分涉及感光器IS/OS。
视网膜厚度结果
利用OCT的自动分层和厚度测量功能获得所有小鼠右眼的视网膜厚度。 Vldlr 敲除小鼠视网膜厚度(200.94±14.64μm)显著低于C57BL/6J小鼠(217.46 ± 10.21 μm,P < 0.001, t检验,7只右眼/组)。两组后极四个方向(颞、鼻、上和下)的视网膜厚度比较如图 11所示。
图1:实验材料和动物的制备 。 (一)设备:1.用于小动物视网膜成像的cSLO/OCT装置,2.计算机和显示器,3.小型恒温动物平台,4.恒温器,5.预设镜头,6.安装预设镜头。(B) 药品和小件物品:I. 聚维酮碘、II.微量注射器,III.麻醉混合物溶液,IV.计时器,V.散瞳滴眼液,VI。镊子,七。医用透明质酸钠凝胶,VIII。医用棉签,九.抗生素眼膏,X. 100 D隐形眼镜(两个)。(C) 数字天平上的重量测量。缩写:cSLO = 共聚焦扫描激光检眼镜;OCT = 光学相干断层扫描。 请点击此处查看此图的大图。
图2:小鼠OCT检查前的准备 。 (A)瞳孔散大滴眼液,(B)透明质酸钠凝胶包衣在角膜上,(C,D)放置100D隐形眼镜,凹面接触角膜。缩写:OCT = 光学相干断层扫描。 请点击此处查看此图的大图。
图3:OCT检查程序。 (A)鼠标位置放置,I.预设镜头,II.隐形眼镜,III.小型恒温动物平台。(B) cSLO/OCT机器的操作,IV.操作杆,V. 倾斜杆,VI.cSLO 设备。缩写:cSLO = 共聚焦扫描激光检眼镜;OCT = 光学相干断层扫描。 请点击此处查看此图的大图。
图 4:OCT 成像过程。 一.测量 模式,B.启动红外激光器的 Laser,C.眼图选择(C-1-OD;C-2-OS),D.红外激光范围,E.屈光度,F.cSLO图像的叠加,G.OCT扫描开始/停止激光按钮H.OCT图像的参考,I. 最小范围:0-20,J. 最大范围:50-60,K.图像的信号强度,L.扫描方向(例如,垂直扫描),M.通过移动绿色参考线选择的扫描位置(例如, 通过视垂直扫描),N.OCT图像的实时显示,O.OCT图像的叠加,P. 拍摄:图像采集,Q.已采集的SLO-OCT图像,R.保存 检查:保存检查结果。比例尺 = 200 μm。缩写:cSLO = 共聚焦扫描激光检眼镜;OCT = 光学相干断层扫描;IR = 红外线;OD = 右眼;OS = 左眼。 请点击此处查看此图的大图。
图 5:OCT 系统上的自动视网膜分层接口。 A. 负载检查按钮, B. 介质容器,显示所有 OCT 图像, C. 选择用于分析的 OCT 图像, D. 用于自动视网膜分层的层检测按钮, E. 分割线列表, F. 视网膜自动分层, G. 用于分层校正的编辑图层按钮, H. 保存检查 按钮用于保存结果。比例尺 = 200 μm。缩写:OCT = 光学相干断层扫描。请点击此处查看此图的大图。
图 6:分层校正 (A-C) 和厚度测量 (D-E)。 (A) 分层编辑激活界面: 1. 编辑图层按钮, 2.分界线列表(例如,选择所有线), 3.激活分界线, 4.间距调整,5.极限范围调整。(B) 激活分界线(例如,A中的第3行), 6.线 3,内层丛状层和内核层之间的线,7。分层错误的示例。(三)分层误差修改, 8.红色圆圈表示修改。(D)视网膜层层厚度测量的一个例子,9。测量标记按钮,10。外核层的分界线,11。与层连接(测量将根据分界线与层连接), 12.移动时保持连接(测量位置是手动点击停留的位置), 13.结果显示的位置 14。测量线(垂直于水平轴)。(五)测量结果获取, 15.测量结果(红色矩形:垂直值为厚度结果),16.删除用于删除测量记录的标记按钮, 17.用于重新测量的新 Marker 按钮(新结果将覆盖原始记录)。比例尺 = 200 μm。 请点击此处查看此图的大图。
图 7:全视网膜厚度的测量。 A. 测量标记按钮, B. 第 1 行 (ILM) 和 C. 第 7 行 (OS-RPE) 选择,用于显示全层视网膜的边界, D. 连接图层选择, E. 移动时保持连接选择, F. 标尺条(垂直和水平标尺条,长度均为 200 μm), G. 视网膜上的测量线(4 条线,每侧间距为 200 μm 的水平标尺长度 视),H.测量结果(结果通过不同的颜色区分,并与视网膜上测量线的颜色相对应),I.从长度(以μm为单位)(组织)行中的Vert值中提取数据。比例尺 = 200 μm。缩写:ILM = 内限膜;OS-RPE = 视网膜色素上皮的感光器外段。请点击此处查看此图的大图。
图8:Vldlr敲除和C57BL / 6J小鼠的cSLO和OCT图像的比较。 Vldlr敲除小鼠的cSLO(A)和OCT(B)图像与C57BL / 6J小鼠的cSLO(C)和OCT(D)图像进行比较。Vldlr敲除小鼠OCT的特征(B):1)视网膜内表面上的中间反射线(B,红色箭头),粘附在视网膜血管上(B,绿色箭头)。2)高反射病变,位于视网膜下间隙,有(B,白色箭头)或不(B,黄色箭头)外核层受累。cSLO 图像 (A) 上的箭头表示 OCT 图像 (B) 上相应颜色箭头的位置。比例尺 = 200 μm。缩写:cSLO = 共聚焦扫描激光检眼镜;OCT = 光学相干断层扫描;Vldlr = 极低密度脂蛋白受体。请点击此处查看此图的大图。
图 9:模式 1:在 Vldlr 敲除和 C57BL/6J 小鼠中用苏木精-伊红染色的视网膜石蜡切片。 (A)视网膜下新生血管侵入外核层(粗绿色箭头)的例子,位于Vldlr敲除小鼠视网膜的中间部分。(B)正常控制,C57BL / 6J小鼠视网膜的中间部分。比例尺 = 50 μm。 缩写:Vldlr = 极低密度脂蛋白受体;ILM = 内限膜;NFL = 视网膜神经纤维层;GCL = 视网膜神经节细胞层;IPL = 内部丛状层;INL = 内核层;OPL = 外层丛状层;ONL = 外核层;ELM = 外部限制膜;IS = 感光器内段;OS = 感光器外段;RPE = 视网膜色素上皮层。请点击此处查看此图的大图。
图 10:模式 2:在 Vldlr 敲除和 C57BL/6J 小鼠中用苏木精-伊红染色的视网膜石蜡切片。 (A)没有外核层(厚蓝色箭头)参与的视网膜下新生血管形成示例,完整ELM(细黄色箭头)位于Vldlr敲除小鼠的中周视网膜。(B)正常控制,C57BL / 6J小鼠的中周视网膜。比例尺 = 50 μm。缩写:VLDR =极低密度脂蛋白受体;ILM = 内限膜;NFL = 视网膜神经纤维层;GCL = 视网膜神经节细胞层;IPL = 内部丛状层;INL = 内核层;OPL = 外层丛状层;ONL = 外核层;ELM = 外部限制膜;IS = 感光器内段;OS = 外感光器段;RPE = 视网膜色素上皮层。请点击此处查看此图的大图。
图11:C57BL / 6J小鼠和 Vldlr 敲除小鼠之间的视网膜厚度比较(所有数据来自右眼)。 (A)通过OCT水平扫描通过视神经的视网膜厚度(μm)。(B)视网膜厚度(μm)通过OCT垂直扫描通过视神经。水平坐标表示间距为 200 μm 的测量位置*:P < 0.05,**:P < 0.01,***:P < 0.001。缩写:T = 时间;P = 视;N = 鼻腔;S = 优越;I = 劣等;OCT = 光学相干断层扫描;VLDR = 极低密度脂蛋白受体;OD = 右眼。 请点击此处查看此图的大图。
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Discussion
本研究采用小动物视网膜成像系统进行OCT成像,评估 Vldlr 敲除小鼠视网膜变化,显示玻璃体后部脱离不完全、视网膜下新生血管形成和视网膜厚度变薄。OCT是一种非侵入性成像方法,用于检查 体内视网膜的状况。大多数OCT设备都是为人眼检查而设计的。硬件设备的大小、焦距的设置、系统参数的设置、考生的定位要求都是基于人眼。需要修改镜头和系统设置,才能使用人类特定的OCT设备检查小动物。本文介绍了小动物OCT检查程序。
在对具有不同大小眼球的不同小动物进行图像扫描时,焦距是不同的。焦距的这种差异至关重要,必须解决以获得清晰准确的眼底图像。一种有效的方法是用不同曲率的透镜代替物镜。由于其眼球小,鼠标除了OCT设备的双球面60D预设镜片外,还需要在角膜前放置100D的隐形眼镜。
OCT 只能提供仅覆盖视网膜有限区域的线扫描。因此,必须标准化OCT扫描方案,以便对不同组的OCT结果进行定性和定量比较。这里进行了三次水平扫描和三次垂直扫描。本机提供实时cSLO图像,监控OCT扫描的位置,从而准确方便地调整扫描位置。当发现异常反射时,可以添加额外的扫描。
图像采集的参数需要仔细调整。在这里,建议最小范围为0-20,最大范围为50-60(图4I,J)。当参数过度调整时,图像的信号对比度会增强,低反射的视网膜的反射信号变低甚至变黑,一些形态信息会丢失。
以下是避免图像质量下降的一些提示: 1.麻醉后立即将隐形眼镜放在眼前,以避免白内障;2.确保预设镜片和隐形眼镜清洁;3.避免头发进入角膜和隐形眼镜之间;4. 确保OCT参数中的多普勒、对比度和亮度设置正确。
OCT图像可用于定性检测病变并定量测量视网膜厚度等指标。本文提出了一种在多个位置测量视网膜厚度的方法,其平均值可以计算为平均视网膜厚度。这是通过OCT系统的自动分层功能实现的。因此,也可以测量视网膜层的厚度。测量方法简单准确(图6 和 图7)。结果表明, Vldlr 敲除小鼠的视网膜厚度低于C57BL/6J小鼠,与文献一致25。两组之间视网膜厚度的差异可以通过多个位置的测量生成的图表清楚地显示出来(图11)。在Stargardt病小鼠模型26中也报道了类似的视网膜病变分析和视网膜厚度测量方法。然而,值得注意的是,视网膜玻璃体界面处的高反射带不属于视网膜组织,应在分层过程中去除。此外,如果视网膜下病变侵入视网膜,厚度测量应包括侵犯部分。
这种小动物视网膜成像系统有一些局限性。例如,尽管它可以提供35°以内的后极的清晰图像,但周边视网膜的图像采集仍然具有挑战性。此外,cSLO形成灰度图像,不如彩色眼底图像检测眼底病变(色素沉着,出血,渗出)。因此,需要进一步改进。综上所述,cSLO机器的OCT检查有助于小鼠模型中视网膜病变的无创检测和测量。
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Disclosures
作者声明没有潜在的利益冲突。
Acknowledgments
项目资料来源:广东省自然科学基金(2018A0303130306)。笔者感谢汕头大学眼科研究实验室、汕头市国际眼科联合中心和香港中文大学的资助和物资。
Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
100-Dpt contact lens | Volk Optical,Inc, Mentor, OH | Accessory belonging to the RETImap | |
Double aspheric 60-Dpt glass lens | Volk Optical,Inc, Mentor, OH | Accessory belonging to the RETImap | |
Electric heating blanket | POPOCOLA | CW-DRT-01 | 50 x 35 cm |
Injection syringe (1 mL) | Kaile | 0.45 x 16RWLB | |
Levofloxacin Hydrochloride Eye Gel | EBE PHARMACEUTICAL Co.LTD | 5 g: 0.015 g | |
Medical sodium hyaluronate gel | Alcon | 16H01E | |
Microliter syringes | Shanghai high pigeon industry and trade co., LTD | Q31/0113000236C001-2017 | 50 µL |
Povidone iodine solution | Guangdong medihealth pharmaceutical Co.,LTD | 100 mL | |
RETImap | ROLAND CONSULT | 19-99_50-2.1_1.2E | cSLO/ERG/VEP/FA/OCT/GFP |
Small animal ear studs | OSMO POCKET OT110 | INS1005-1S | |
Tropicamide Phenylephrine Eye Drops | Santen Pharmaceutical Co.,LTD | 5 mg/mL | |
Xylazin | Sigma | X1251-5G | 5 g |
Zoletil 50 | Virbac.S.A | 7FRPA | Tiletamine 125 mg + Zolazepam 125 mg |
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