Encyclopedia of Experiments: Biology
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- केशिका फीडर, या कैफे परख के लिए तैयार करने के लिए, एक पूर्वाविस्थापित प्रयोगात्मक शीशी के शीर्ष पर पिपेट युक्तियों के माध्यम से रंगीन, तरल भोजन, नीचे अंत पहले से भरे वर्गीकृत या चिह्नित ग्लास केशिकाएं डालें। सुनिश्चित करें कि केशिकाओं को सुरक्षित रूप से एक ही ऊंचाई पर रखा गया है और उपकरण के संपर्क में नहीं हैं।
प्रत्येक केशिका में मेनिस्कस के शुरुआती स्तर को चिह्नित करें। फिर जरूरत के अनुसार केशिकाओं की जगह प्रयोग की अवधि के लिए तापमान, आर्द्रता और हल्के नियंत्रित वातावरण में शीशियों को घर दें। कैफे परख के दौरान, मोबाइल मक्खियां अनर्गल होती हैं और माइक्रोपिपेट के नीचे खुले छोर तक मुफ्त पहुंच होती हैं। मक्खियां स्वेच्छा से फ़ीड करती हैं क्योंकि वे अपनी सूंड सेवन और तरल का विस्तार करते हैं, कैपरी के अंदर माध्यम को कम करते हैं।
एक निर्धारित समय अवधि के लिए भोजन की खपत और वरीयता को ट्रैक करने के लिए, केशिकाओं को अर्हता प्राप्त करने से उस अवधि के अंत में शुरुआती निशान से स्तर तक मेनिस्कस के वंश को रिकॉर्ड करें । उदाहरण प्रोटोकॉल में, हम नकदी से भरे केशिकाओं से कम वाष्पीकरण प्राप्त करने के लिए संशोधित विधानसभा के साथ कैफे परख देखेंगे ।
- बाहरी उद्घाटनों में से एक को बंद करने वाले पिपेट टिप को सावधानी से हटा दें, और एक भरे हुए ग्लास केशिका, नीचे के अंत में पहले डालें। पिपेट टिप को केशिका के बगल में वापस रखकर केशिका को सुरक्षित करें। सभी खाद्य समाधानों के लिए इस कदम को दोहराएं।
इसके बाद, केशिका को एक ही स्तर पर सभी शीशियों के अंदर रखें, ढक्कन से 3 से 4 सेंटीमीटर। केशिका को लीक होने से रोकने के लिए फिल्टर पेपर के बीच कुछ दूरी छोड़ दें। रंगीन तरल के ऊपरी छोर को लेबल करने के लिए मार्कर पेन का उपयोग करें। यह सुनिश्चित करने के लिए उन्हें व्यक्तिगत रूप से धारी कोड का उपयोग करके लेबल करें कि विभिन्न केशिकाओं की पहचान की जा सकती है।
तैयार किए गए कैफे कीख को प्लास्टिक बॉक्स में एक रील्ड इनले के साथ रखें । नमी को परख के अंदर स्थिर रखने के लिए हर 24 घंटे में १०० माइक्रोलीटर ताजे पानी को लागू करने के लिए स्पंज डाट का उपयोग करें । आर्द्रता उपकरणों के रूप में डबल-आसुत H2O के 30 मिलीलीटर से भरी चार अलग शीशियों का उपयोग करें, और उन्हें प्लास्टिक बॉक्स में कैफे परख के बगल में रखें ।
प्रयोग के दौरान आर्द्रता नियंत्रित वातावरण बनाने के लिए प्लास्टिक बॉक्स को कवर करें। प्रयोगात्मक अवधि के लिए तापमान, प्रकाश और आर्द्रता नियंत्रित जलवायु कक्ष में बॉक्स को सुरक्षित स्थिति में स्थानांतरित करें। प्रत्येक 24 घंटे के अंतराल से पहले, मृत मक्खियों पर ध्यान दें, और निम्नलिखित अवधि के लिए प्रति फ्लाई खपत की गणना करने के लिए जीवित मक्खियों की संख्या का उपयोग करें।
परख के अंत में और केशिका को बदलने से पहले, कैफे परख को ईमानदार स्थिति में रखें। ढक्कन को न हटाएं, और केशिका के निचले मेनिस्कस को चिह्नित करें। यदि निशान का अंत प्रारंभिक निशान से नीचे नहीं है तो डेटा को त्यागें। इस्तेमाल किए गए केशिकाओं को हर 24 घंटे में दीर्घकालिक प्रयोगों के लिए ताजा भरे केशिकाओं से प्रतिस्थापित करें।
मेनिस्कस की गिरावट को मापें। फिर पुरानी केशिकाओं को त्यागें. फिर केशिकाओं को परख से सावधानी से निकालें और उन्हें डेटा संग्रह के लिए संग्रहीत करें. जांच करें कि क्या केशिका के अंदर का तरल निचले छोर तक नहीं पहुंचा। यदि केशिका के अंदर कासिलरी के अंदर का तरल निचले छोर तक नहीं पहुंचा, तो डेटा को त्याग दें।
प्रयोग के बाद, सेटअप को खत्म करें, और साबुन स्नान में शीशियों, ढक्कन और स्पंज बंग्स को धोएं। फिर उन्हें आगे के उपयोग के लिए कमरे के तापमान पर रात भर सुखाएं। कम से कम तीन अलग-अलग दिनों पर एक ही जीनोटाइप के साथ प्रयोग दोहराएं। एक कैलिपर का उपयोग करके, केशिका पर मार्क-शुरुआत और मार्क-एंड के बीच की दूरी को माप के बाद छोड़ें।
