Drosophila (olika betydelser) Äggsamling och dechorionation: En metod för att ta bort det yttersta äggskiktet

- Låt Drosophila lägga ägg över natten på en maträtt som innehåller agar kompletterad med druvsaft för att visualisera ägg och belagd med jäst för att uppmuntra flugor att kompisera och lägga ägg. För att ta bort äggen, tillsätt destillerat vatten till skålen och torka försiktigt ytan med en pensel. Häll sedan blandningen genom ett nylonnät placerat i en plastbussning för att samla äggen.

Äggen sitter nu fast på sidan av bussningen. Tvätta dem tre gånger med vatten för att ta bort blekmedlet. Slutligen, använd en pensel för att överföra äggen från bussningen till injektionsflaskan för att fortsätta utvecklingen eller för omedelbar användning i ett experiment.

- Placera nylonnätet i en plastbussning för att förbereda sikten för äggsamling. Om samma flugor kommer att användas nästa dag, överför dem omedelbart till en ny bur som innehåller nyjäst druvjuice agarplattor. Druvjuiceplattan i den tidigare buren innehåller fruktflugaäggen. Ta bort döda flugor med en ren pensel och var försiktig så att du inte bryter upp agar. Skölj agarplattan med destillerat vatten och borsta försiktigt äggen från agarens yta och häll sedan slammet över nätet för att samla äggen.

Sterilisera biosäkerhetsskåpet med 70% etanol och slå sedan på UV-ljuset. Spraya alla icke-biologiska förnödenheter med 70% etanol och placera dem omedelbart i biosäkerhetsskåpet och sterilisera dem sedan med UV-ljus.

- Det är viktigt att säkerställa att god aseptisk teknik används vid arbete inom eller vid tillsats eller avlägsnande av nya material till biosäkerhetsskåpet.

- Överför bussningen med äggen till en 120 milliliter provkopp och häll långsamt 90 milliliter 0,6% natriumhypokloritlösning, eller 7% blekmedel, i bussningen, strax under kanten.

I slutet av den andra blekbehandlingen ska äggen börja klibba sig på sidorna av bussningen. Kassera blekmedlet och skölj helt bussningen med sterilt vatten.

Använd en steril pensel, överför äggen från sidan av bussningen till den sterila kosten. Lämna locken lösa för att tillåta syre att komma in i röret. De överförda äggen kommer att vara synliga på kostens yta.