A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:00Title
- 00:05Introduction
- 01:01Cell Preparation
- 02:28Immunofluorescence Staining
- 05:00Microscopy
- 06:12Analysis Foci Counting
- 07:56Analysis Line Scan
- 08:39Analysis 3D-Image Reconstruction
- 09:09Conclusion
Mikroskopisk analys av γH2AX härdar, som utgör efter fosforyleringen av H2AX vid Ser-139 som svar på DNA dubbel-strängbrott, har blivit ett ovärderligt verktyg i strålningsbiologi. Här har vi använt en antikropp mot mono-metylerat histon H3 på lysin 4 som en epigenetisk markör för aktivt transkribera euchromatin, för att utvärdera den geografiska fördelningen av strålningsinducerad γH2AX bildning inom kärnan.
Tags
Spatial DistributionγH2AXIonizing RadiationDNA Double-strand Breaks (DSBs)Ser-139 ResidueHistone H2AXPhosphorylationPhosphatidyl-inosito 3-kinase (PI3K) FamilyAtaxia Telangiectasia Mutated (ATM)DNA-protein Kinase Catalytic SubunitATM And RAD3-related (ATR)Immunofluorescence MicroscopyγH2AX FociDSB Formation And RepairRadiation Modifying CompoundsCytotoxic CompoundsDNA Damage And RepairChromatin Templateγ-irradiation-induced γH2AX Foci
