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TransFLP - Une méthode pour modifier génétiquement<em> Vibrio cholerae</em> Basé sur la transformation naturelle et FLP-recombinaison
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Chapters
- 00:05Title
- 01:16Preparation of Chitin Flakes
- 01:39Oligonucleotide Design and Polymerase Chain Reaction
- 03:45Chitin-induced Natural Transformation
- 04:59Removal of Selective Cassette(s) by FLP-recombination
- 05:46Plasmid Curing
- 06:21Results: Representative TransFLP Modifications of V. cholerae
- 11:34Conclusion
Une méthode rapide pour modifier le génome d'<em> V. cholerae</em> Est décrite. Ces modifications incluent la suppression de gènes uniques, des clusters de gènes et îlots génomiques ainsi que l'intégration de séquences courtes (par exemple des éléments de promoteur ou par affinité tag séquences). La méthode est basée sur la transformation physique et FLP-recombinaison.
Tags
TransFLPGenetically ModifyVibrio CholeraeNatural TransformationFLP-recombinationBacterial ChromosomesReplicative PlasmidsHomology-mediated RecombinationInsertional MutantsPlasmid ExcisionGram-negative BacteriaLevan Sucrase EnzymeSacB GenePre-insertion GenotypeModified GeneTime-consumingCloningHorizontal TransferArtificial TransformationPositive SelectionRapid ManipulationChitin-mediated InductionNatural Competence
