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TransFLP — A Method to Genetically Modify Vibrio cholerae Based on Natural Transformation and FLP-recombination
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TransFLP - un metodo per modificare geneticamente<em> Vibrio cholerae</em> Sulla base di trasformazione naturale e FLP-ricombinazione

DOI:
10.3791/3761-v

•

12:13 min

•

October 08, 2012

•

1Global Health Institute, School of Life Sciences,Ecole Polytechnique Fédérale de Lausanne (EPFL)

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:16Preparation of Chitin Flakes
  • 01:39Oligonucleotide Design and Polymerase Chain Reaction
  • 03:45Chitin-induced Natural Transformation
  • 04:59Removal of Selective Cassette(s) by FLP-recombination
  • 05:46Plasmid Curing
  • 06:21Results: Representative TransFLP Modifications of V. cholerae
  • 11:34Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Un metodo rapido per modificare il genoma di<em> V. cholerae</em> È descritto. Queste modifiche includono la cancellazione dei singoli geni, i cluster di geni e le isole genomiche, nonché l'integrazione di brevi sequenze (ad esempio, elementi promotori o per affinità tag sequenze). Il metodo si basa sulla trasformazione naturale e FLP-ricombinazione.

Tags

TransFLPGenetically ModifyVibrio CholeraeNatural TransformationFLP-recombinationBacterial ChromosomesReplicative PlasmidsHomology-mediated RecombinationInsertional MutantsPlasmid ExcisionGram-negative BacteriaLevan Sucrase EnzymeSacB GenePre-insertion GenotypeModified GeneTime-consumingCloningHorizontal TransferArtificial TransformationPositive SelectionRapid ManipulationChitin-mediated InductionNatural Competence

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