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Ein Multiplex-Luciferase-basierte Screening-Plattform zur Abfrage Krebs-assoziierte Signaltransduktion in kultivierten Zellen
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Medicine
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JoVE Journal Medicine
A Multiplexed Luciferase-based Screening Platform for Interrogating Cancer-associated Signal Transduction in Cultured Cells
DOI:

10:13 min

July 03, 2013

,

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:54Preparation of Cells for siRNA and Reporter Transfection
  • 03:19siRNA and Reporter Transfection of Cells
  • 03:22Preparing Reporter Construct DNA
  • 04:10Preparing siRNA/DNA Transfection Mixtures
  • 05:42Adding Transfection Mixtures to Cells
  • 06:21Determine Luciferase Activities from Cell Samples
  • 08:04Results: High-throughput Interrogation of Gene Function in Wnt/β-catenin, p53, and Kras Singaling
  • 09:53Conclusion

Summary

Automatic Translation

Das Erreichen einer Systemebene Verständnis zellulärer Prozesse ist ein Ziel der modernen Zellbiologie. Wir beschreiben hier Strategien zum Multiplexen Luciferase Reporter von verschiedenen zellulären Funktion Endpunkte zur Genfunktion mit genomweiten RNAi-Bibliotheken zu verhören.

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