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Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
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JoVE Science Education Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
Passaging Cells
  • 00:00Overview
  • 00:40Basic Principles of Subculturing Cells
  • 02:59Common Equipment/Reagents for Passaging Cells
  • 06:36How to Passage Cells
  • 08:03Applications
  • 09:36Summary

基本的组织培养:细胞传代

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Overview

生物医学实验中常常会用到细胞系,因为它们可以快速生长和扩增提供实验分析要用到的细胞。细胞系与新分离的或原代细胞的培养条件相类似,但也有一些基本不同的地方:(1)每个细胞系需要其特定的生长因子混合物(2)与原代细胞相比,它们的生长需要更严密的监测,因为使它们无限生长的突变同时也会造成它们很快达到过度生长。因此,当细胞系生长到了几乎覆盖整个培养器皿底部,也就是90%的密度时,细胞需要重悬洗涤用于实验或冻存以备将来使用,或者重新接种到新的培养器皿进一步扩增。

本短片将演示如何使用培养液指示剂来判断细胞培养的健康程度,安全转移贴壁细胞所需要的试剂和仪器,并将讨论转移这些快速增殖的细胞到新培养液中的不同方法。还将同时演示如何培养饲养细胞(这对提供细胞必需的生长于因子很重要)和如何大规模培养细胞系的方法。

Procedure

细胞传代或续代培养是将细胞从现有的培养物分开或分出来开始新的培养,并加入新鲜培养液来促进扩增的常用手段。尽管它的概念本身相对简单,本短片中我们将讨论能成功保存和扩增细胞系的一些更重要的步骤。 代谢的有毒物质随时间在细胞培养液中累积。当扩增细胞时,尤为重要的是经常更换培养液以维持细胞健康和监测细胞扩增情况以避免细胞生长过度。 ?…

Disclosures

No conflicts of interest declared.

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Passaging Cells. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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