JoVE Science Education
Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Science Education Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
Passaging Cells
  • 00:00Overview
  • 00:40Basic Principles of Subculturing Cells
  • 02:59Common Equipment/Reagents for Passaging Cells
  • 06:36How to Passage Cells
  • 08:03Applications
  • 09:36Summary

העברת תאים

English

Share

Overview

קווי תאים משמשים לעתים קרובות בניסויים ביו-רפואיים, שכן הם מאפשרים תרבות מהירה והתרחבות של סוגי תאים לניתוח ניסיוני. קווי התאים מתורבתים בתנאים דומים בהשוואה לתאים מבודדים טריים, או ראשוניים, אך עם כמה הבדלים חשובים בסיסיים: (i) קווי תאים דורשים קוקטיילים של גורם גדילה ספציפי משלהם ו- (ii) הצמיחה שלהם חייבת להיות מנוטרת באופן הדוק יותר מאשר תאים ראשוניים, שכן המוטציות המאפשרות להם לגדול ללא הגבלת זמן גם יכולות להוביל במהירות לצמיחתם. לכן, כאשר קו תא מגיע לנקודת הצמיחה בתרבות שבה הוא מכסה את רוב החלק התחתון של מיכל התרבות, או על 90% השפעה, התאים חייבים להיות resuspended, שטף, בשימוש ניסיוני, קפוא לשימוש מאוחר יותר, או מחדש זרע להתרחבות נוספת במיכלי תרבות חדשים.

וידאו זה ידגים כיצד להשתמש במדדי מדיה כדי לקבוע את תקינות תרבית התא, אשר ריאגנטים וציוד שימושיים להסרת קווי תאים דבקים מתרבות, ושיטות שונות להעברת תאים אלה המתרחבים בחוזקה לתרבויות חדשות יידונו. כמו כן הוכחו שיטות כיצד לתרבות תאים מזינים (חשוב לספק גורמי גדילה חיוניים לקווי תאים) וכיצד להרחיב מספר גדול של תרביות קו התא בבת אחת.

Procedure

העברת תאים, או תת-תרבות, היא הליך נפוץ שבו תאים מתרבית נתונה מחולקים, או “מפוצלים”, לתרבויות חדשות וניזונים ממדיה טרייה כדי להקל על התרחבות נוספת. בעוד הרעיון עצמו הוא פשוט יחסית, בסרטון זה נדון בכמה מהצעדים החשובים יותר לתחזוקה מוצלחת והרחבה של קווי תאים. מטבוליטים רעילים …

Disclosures

No conflicts of interest declared.

Transcript

Tags

Cite This
JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Passaging Cells. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

Related Videos