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Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
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JoVE Science Education Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
Passaging Cells
  • 00:00Overview
  • 00:40Basic Principles of Subculturing Cells
  • 02:59Common Equipment/Reagents for Passaging Cells
  • 06:36How to Passage Cells
  • 08:03Applications
  • 09:36Summary

細胞の継代

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Overview

細胞株は短時間で培養でき、実験解析に必要な細胞型を増殖可能であるため、生医学実験に頻繁に利用されます。初代細胞と同様の条件下で培養されますが、いくつかの重要な基本的な相違点があります。: (1) 各細胞株には特殊なサプリメントが必要となります。(2) 細胞株は突然変異により無限に増殖可能であり異常増殖が起こりやすいため、初代細胞に比べ厳密にモニターしなければなりません。そのため細胞株が培養容器の底面をほとんど覆う、あるいは約90%コンフルエントの状態になったら、細胞を再懸濁し、洗浄して実験に用います。後で使用するために冷凍保存、又は新たに増殖させるため新しい培養容器に播種することもできます。

このビデオでは、細胞の健康状態を確認するための指示薬の使い方、接着細胞を培地から剥離するための適切な試薬、器具の説明、適切に増殖させた細胞を実験用に準備するための様々な方法をご覧いただけます。さらに、支持細胞(細胞株へ必須成長因子を提供する役割をもつ)の培養方法、一度に大量の細胞株を増殖させる方法も紹介しています。

Procedure

分子クローニングとは、原核生物又は真核生物由来の組み換えDNAを”運び屋”となるプラスミドやウイルスベクターに挿入し宿主内で複製させる一連のテクニックです。クローニングとは、目的遺伝子のDNA断片を大量にコピーすることを意味します。このビデオでは、分子クローニングの様々な工程のセットアップ方法、またこのツールのいろいろな応用例を紹介していきます。 <div …

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No conflicts of interest declared.

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Passaging Cells. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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