Journal
/
Biology
/
Generasjon og rensing av menneske INO80 Chromatin remodeling komplekser og Subcomplexes
JoVE Journal
Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biology
Generation and Purification of Human INO80 Chromatin Remodeling Complexes and Subcomplexes

Generasjon og rensing av menneske INO80 Chromatin remodeling komplekser og Subcomplexes

DOI:
10.3791/51720-v

•

08:44 min

•

October 23, 2014

•

, , ,
1Stowers Institute for Medical Research, 2Department of Biochemistry & Molecular Biology,Kansas University Medical Center

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:23Isolation of Nuclei
  • 02:45Extracting Nuclei with Salt
  • 04:38Immunoaffinity Purification of the Human INO80 or INO80 Subcomplexes
  • 06:53Results: Analysis of the Composition of Immunopurified INO80 Complexes and Subcomplexes
  • 08:01Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Denne protokollen beskriver en fremgangsmåte for generering og rensing av villtype og muterte versjoner av det menneskelige INO80 kromatin ombygging kompleks. Epitop merket versjoner av INO80 subenheter blir stabilt uttrykt i HEK293-celler og komplett komplekser og komplekser som mangler spesifikke sett av underenhetene blir renset ved immunoaffinitets-kromatografi.

Tags

INO80 Chromatin Remodeling ComplexNucleosome DynamicsDNA AccessibilityATP-dependent Nucleosome RemodelingIno80 ATPaseFLAG-tagged Ino80HEK 293 CellsSiRNA DepletionFLAG ImmunoprecipitationSubcomplexesMass SpectrometryChromatin Remodeling Assays

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Purification and Visualization of Influenza A Viral Ribonucleoprotein Complexes

Human Pancreatic Islet Isolation: Part II: Purification and Culture of Human Islets

Staining of Proteins in Gels with Coomassie G-250 without Organic Solvent and Acetic Acid

Visualization of the Interstitial Cells of Cajal (ICC) Network in Mice

Preparation, Purification, and Characterization of Lanthanide Complexes for Use as Contrast Agents for Magnetic Resonance Imaging

Kromatin Isolering av RNA Purification (kvitre)

Generasjon, rensing og karakterisering av Cell-invasive Disc1 Protein Arter

Generasjon av høy kvalitet Chromatin immunoprecipitation DNA Mal for High-throughput sekvensering (ChIP-seq)

Effektiv produksjon og rensing av rekombinant mus Kindlin-3 fra insektceller for biofysiske studier

Biokjemiske analyser for å analysere Aktiviteter i ATP-avhengige Kromatin Remo Enzymer

Read Article