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Geração e Purificação de INO80 cromatina remodelação Complexos Humanos e subcomplexos
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Generation and Purification of Human INO80 Chromatin Remodeling Complexes and Subcomplexes

Geração e Purificação de INO80 cromatina remodelação Complexos Humanos e subcomplexos

DOI:
10.3791/51720-v

•

08:44 min

•

October 23, 2014

•

, , ,
1Stowers Institute for Medical Research, 2Department of Biochemistry & Molecular Biology,Kansas University Medical Center

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:23Isolation of Nuclei
  • 02:45Extracting Nuclei with Salt
  • 04:38Immunoaffinity Purification of the Human INO80 or INO80 Subcomplexes
  • 06:53Results: Analysis of the Composition of Immunopurified INO80 Complexes and Subcomplexes
  • 08:01Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Este protocolo descreve um procedimento para gerar e purificação de tipo selvagem e as versões mutantes do complexo remodelação INO80 cromatina humana. Marcada com epitopo versões de subunidades INO80 são estavelmente expressos em células HEK293, e complexos completos e complexos que faltam conjuntos específicos de subunidades são purificados por cromatografia de imunoafinidade.

Tags

INO80 Chromatin Remodeling ComplexNucleosome DynamicsDNA AccessibilityATP-dependent Nucleosome RemodelingIno80 ATPaseFLAG-tagged Ino80HEK 293 CellsSiRNA DepletionFLAG ImmunoprecipitationSubcomplexesMass SpectrometryChromatin Remodeling Assays

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