Journal
/
/
Avanceret Konfokal mikroskopi-teknikker til at undersøge Protein-protein interaktioner og kinetik ved DNA læsioner
JoVE Journal
Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biology
Advanced Confocal Microscopy Techniques to Study Protein-protein Interactions and Kinetics at DNA Lesions
DOI:

12:43 min

November 12, 2017

, , , ,

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:44Cultivation of HeLa-derived Cell Lines
  • 01:48Cell Transfection
  • 03:21Induction of Local DNA Lesions and Confocal Microscopy
  • 04:47Fluorescence Lifetime Image Microscopy
  • 06:24FRET Efficiency Using the FLIM-FRET Script
  • 07:48FRAP Analysis
  • 08:50Results: Analysis of Recruitment of mCherry-tagged PCNA and -53BP1 at DNA Lesions in HeLa Cells
  • 11:00Conclusion

Summary

Automatic Translation

Laser microirradiation er et nyttigt værktøj for studier af DNA reparation i levende celler. En metodisk tilgang til brug af UVA lasere til at fremkalde forskellige DNA læsioner er vist. Vi har optimeret en metode for lokale microirradiation, der opretholder den normale cellecyklus; således fortsætte bestrålede celler gennem mitosen.

Related Videos

Read Article