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Investigação da síntese do RNA usando 5-Bromouridine rotulagem e imunoprecipitação
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Investigation of RNA Synthesis Using 5-Bromouridine Labelling and Immunoprecipitation

Investigação da síntese do RNA usando 5-Bromouridine rotulagem e imunoprecipitação

DOI:
10.3791/57056-v

•

09:59 min

•

May 03, 2018

•

, , , ,
1DANDRITE – Danish Research Institute of Translational Neuroscience, Dept. of Biomedicine,Aarhus University, 2Dept. of Molecular Biology and Genetics,Aarhus University

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:37RNA Sample Preparation
  • 02:37Immunoprecipitation Bead Preparation
  • 04:51Binding BrU-labelled RNA to Beads
  • 05:46RNA Elution Purification
  • 08:29Results: Increase in Steady State RNA Caused by Increase in RNA Synthesis
  • 09:35Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Esse método pode ser usado para medir a síntese do RNA. 5-Bromouridine é adicionado às células e incorporado na RNA sintetizado. Síntese de RNA é medido pela extração do RNA imediatamente depois da rotulagem, seguido de 5-Bromouridine-alvo da imunoprecipitação de rotulados RNA e análise por transcrição reversa e reação em cadeia da polimerase quantitativa.

Tags

RNA Synthesis5-bromouridine LabelingImmunoprecipitationHEK293T CellsRNA ExtractionMagnetic BeadsBromouridine-IP Buffer

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