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Sequenziamento di MicroRNA retrospettiva: Protocollo di preparazione libreria DNA complementare utilizzando campioni di RNA di paraffina-incastonato formalina-fisso
JoVE Journal
Genetics
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JoVE Journal Genetics
Retrospective MicroRNA Sequencing: Complementary DNA Library Preparation Protocol Using Formalin-fixed Paraffin-embedded RNA Specimens
DOI:

12:24 min

May 05, 2018

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Chapters

  • 00:04Title
  • 00:393′ Barcoded Adapter Ligations with 18 Individual RNA Samples
  • 02:00Ligated Small RNA Purification
  • 05:265′ Ligated and 3′ Barcoded Purified Small RNAs Reverse Transcription
  • 08:12Pilot PCR and Large-scale PCR Amplification
  • 10:46Results: Protocol Robust Whether Fresh, Frozen, or Aged
  • 12:01Conclusion

Summary

Automatic Translation

Esemplari di paraffina-incastonati formalina-fisse rappresentano una preziosa fonte di biomarcatori molecolari delle malattie umane. Qui presentiamo un protocollo di preparazione libreria cDNA laboratorio-basato, inizialmente progettato con RNA congelato fresco e ottimizzato per l'analisi dei microRNA archiviati dai tessuti stored fino ai 35 anni.

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