I detta protokoll, vi strävar efter att beskriva en reproducerbar metod för att kombinera dissocierade mänskliga pluripotenta stamceller som härrör nervceller och astrocyter tillsammans i 3D sfär cocultures, bibehålla dessa sfärer i fri svävande villkor, och därefter mäta synaptic krets aktiviteten av sfärer med immunoanalysis och multielectrode array inspelningar.