Journal
/
/
CRISPR-Cas9-gebaseerde genoom Engineering voor het genereren van Jurkat verslaggever modellen voor HIV-1 infectie met geselecteerde proviraal integratie Sites
JoVE Journal
Immunology and Infection
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Immunology and Infection
CRISPR-Cas9-based Genome Engineering to Generate Jurkat Reporter Models for HIV-1 Infection with Selected Proviral Integration Sites
DOI:

14:27 min

November 14, 2018

, , ,

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:42Choice of Targeted Locus, Guide RNA (gRNA), and Targeting Vector Design
  • 03:08CRISPR-Cas9-based Targeting of Jurkat Cells
  • 04:36Generation of Clonal Lines and Screening for Correct Targeting
  • 07:50Screening of Single-cell Clones by Flow Cytometry and PCR
  • 11:46Results: Screening and Analysis of Single-cell Clones for Correct Reporter Integration
  • 13:16Conclusion

Summary

Automatic Translation

We presenteren een genoom engineering workflow voor de generatie van nieuwe in vitro modellen voor HIV-1 infectie die recapituleren proviraal integratie op geselecteerde genomic sites. Doelgerichtheid van HIV-afgeleide verslaggevers wordt vergemakkelijkt door CRISPR-Cas9-gemedieerde, site-specific genoom manipulatie. Gedetailleerde protocollen voor eencellige kloon generatie, screening en juiste targeting verificatie worden geleverd.

Related Videos

Read Article