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Cartographie du site de démarrage de la transcription à l'aide d'un transporteur-CAGE super-faible
JoVE Journal
Genetics
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JoVE Journal Genetics
Transcription Start Site Mapping Using Super-low Input Carrier-CAGE
DOI:

06:59 min

June 26, 2019

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Chapters

  • 00:04Title
  • 01:04Preparation of DNA Templates
  • 01:38Reverse Transcription
  • 02:24Purification of cDNA:RNA Hybrids Using Magnetic Beads
  • 03:42Cap-trapping
  • 05:16Control of Degradation Level and Determination of the Number of PCR Cycles
  • 05:39Results: DNA Quality and Validation of SLIC-CAGE Libraries
  • 06:26Conclusion

Summary

Automatic Translation

Cap Analysis of Gene Expression (CAGE) est une méthode de cartographie quantitative à l'échelle du génome de l'ARNm 5'ends pour capturer les sites de transcription de la polymérase II de l'ARN à une résolution à un seul nucléotide. Ce travail décrit un protocole à faible apport (SLIC-CAGE) pour la génération de bibliothèques de haute qualité utilisant des quantités de nanogrammes d'ARN total.

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