Journal
/
Biochemistry
/
Absolutt kvantifisering av Cell-fri protein syntese metabolisme av reversert-fase flytende kromatografi-Mass massespektrometri
JoVE Journal
Biochemistry
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biochemistry
Absolute Quantification of Cell-Free Protein Synthesis Metabolism by Reversed-Phase Liquid Chromatography-Mass Spectrometry

Absolutt kvantifisering av Cell-fri protein syntese metabolisme av reversert-fase flytende kromatografi-Mass massespektrometri

DOI:
10.3791/60329-v

•

08:06 min

•

October 25, 2019

•

, , , ,
1Robert Frederick Smith School of Chemical and Biomolecular Engineering,Cornell University

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:01Preparation for Aniline Tagging
  • 02:41Labeling Reaction and LC/MS Procedure
  • 06:06Results: Identification and Labeling Results of Metabolites
  • 07:02Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Her presenterer vi en robust protokoll for å kvantifisere 40 forbindelser involvert i Sentral karbon og energi metabolisme i celle-fri protein syntese reaksjoner. Den celle frie syntese blandingen er derivatized med anilin for effektiv separasjon ved hjelp av reversert-fase flytende kromatografi og deretter kvantifisert av masse massespektrometri bruker isotopically merket interne standarder.

Tags

Cell-free Protein SynthesisMetabolite QuantificationReversed-phase Liquid Chromatography-mass SpectrometryAniline TaggingIsotopic LabelingCentral Carbon MetabolismEnergy Metabolism

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Time-løst elektrospray-ionisering Hydrogen-deuterium Veksling massespektrometri for å studere Protein struktur og dynamikk

Løse affinitetsrenset protein komplekser av Blå Native PAGE og Protein korrelasjon Profiling

Et tandem-væskekromatografi-massespektrometri basert tilnærming for Metabolitt Analyse av<em> Staphylococcus aureus</em

Dyp proteom profilering av isobar merking, omfattende flytende Ture, massespektrometri og Software-baserte kvantifisering

Høy følsomhet måling av transkripsjon faktor-DNA Binding slektskap av konkurransedyktige titrering bruker fluorescens mikroskopi

Påvisning av protein ubiquitination nettsteder av peptid berikelse og masse spektrometri

Kvantitativ analyse av cellulær lipidom eav saccharomyces cerevisiae ved hjelp av flytende kromatografi kombinert med tandem massespektrometri

Opprette svært spesifikke kjemisk indusert protein Dimerization Systems av trinnvis Phage utvalg av Kombinatorisk single-Domain antistoff bibliotek

Umålrettet flytende kromatografi-massespektrometribasert metabolomikkanalyse av hvetekorn

Semi-kvantitativ analyse av peptidoglykan ved væskekromatografi, massespektrometri og bioinformatikk

Read Article