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Identificação de reguladores de fatores de transcrição usando triagem de média-duração de bibliotecas arrayed e um repórter baseado em dupla-luciferase
JoVE Journal
Cancer Research
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JoVE Journal Cancer Research
Identification of Transcription Factor Regulators using Medium-Throughput Screening of Arrayed Libraries and a Dual-Luciferase-Based Reporter
DOI:

11:32 min

March 27, 2020

,

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:39Lentiviral Vector Library Preparation
  • 01:24Packaging of the Arrayed Lentiviral Library
  • 03:35Cell Infection for Screening
  • 04:48Cell Seeding for Transfection of Dual-Luciferase Reporter
  • 06:27Dual-Luciferase Reporter Transfection
  • 07:35Dual-Luciferase Activity Quantification
  • 09:02Results: Representative Arrayed Library Screening
  • 10:47Conclusion

Summary

Automatic Translation

Para identificar novos reguladores de fatores de transcrição, desenvolvemos uma abordagem para tela de bibliotecas RNAi lentivirais ou retrovirais usando um ensaio de repórter transcricional baseado em dupla luciferase. Esta abordagem oferece uma maneira rápida e relativamente barata de selecionar centenas de candidatos em um único experimento.

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