Journal
/
Biology
/
Análise de espectrometria de massa para identificar a ubiquização do CENP-A marcado pelo EYFP (EYFP-CENP-A)
JoVE Journal
Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biology
Mass Spectrometry Analysis to Identify Ubiquitylation of EYFP-tagged CENP-A (EYFP-CENP-A)

Análise de espectrometria de massa para identificar a ubiquização do CENP-A marcado pelo EYFP (EYFP-CENP-A)

DOI:
10.3791/61138-v

•

09:02 min

•

June 10, 2020

•

, , , , , , ,
1MOE Key Laboratory of Model Animal for Disease Study, Model Animal Research Center,Nanjing University, 2Jiangsu Key Laboratory of Molecular Medicine,Medical School of Nanjing University, 3Greehey Children’s Cancer Institute, Department of Molecular Medicine,UT Health Science Center San Antonio

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:44In Vivo Ubiquitylation Assays Using pQCXIP-EYFP-CENP-A
  • 02:19Mass Spectrometry to Identify the Ubiquitylation Site of the EYFP-CENP-A K124R Mutant
  • 04:55Data Analysis
  • 06:22Results: EYFP-CENP-A K124 Mutant is Ubiquitylated and Interacts with HJURP
  • 08:12Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

A ubiquização CENP-A é um importante requisito para a deposição do CENP-A no centromere, herdada por dimerização entre divisão celular e indispensável à viabilidade celular. Aqui descrevemos a análise da espectrometria em massa para identificar a ubiquização da proteína CENP-A (EYFP-CENP-A) marcada pela EYFP.

Tags

Mass SpectrometryUbiquitylationEYFP-CENP-AProtein IdentificationImmunoprecipitationGFP AntibodyLysate PreparationGel ElectrophoresisCoomassie Blue StainingProtein DigestionMass Spectrometry Analysis

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

MALDI preparação da amostra: o método de Camada Ultra Thin

Analisar grandes complexos de proteínas por espectrometria de massa estruturais

T-wave Ion Mobility Spectrometry massa: Basic Procedimentos para Análise Experimental Protein Complex

Análise direta de células individuais por Espectrometria de Massa à pressão atmosférica

Amida de hidrogênio / deutério Exchange & MALDI-TOF Análise Espectrometria de Massa de PAK2 Ativação

Profiling Proteome Redox tiol Usando Isótopos Espectrometria de Massa Tagging

Captura de Espectrometria de Massa Compound - uma ferramenta poderosa para identificar novos c-di-GMP efetoras Proteínas

Screening siRNA identificar Ubiquitin e ubiquitina-como reguladores do sistema de caminhos biológicos em células de mamíferos cultivadas

Enriquecimento de Proteínas da Matriz Extracelular a partir de tecidos e digestão em péptidos para Análise de Espectrometria de Massa

Aplicações da sonda Individual: Imagem Espectrometria de Massa e Análise única célula sob condições ambientais

Read Article