A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:05Introduction
- 00:45S30 Ribosomal Protein Lysate Preparation
- 02:17Membrane Scaffold Protein 1E3D1 (MSP1E3D1) Nanodisc Assembly
- 03:243-mL Continuous Exchange Cell-Free (CECF) Reaction Setup
- 04:1060-Microliter CECF Reaction Setup
- 06:07Results: Representative Preformed Nanodisc-Modified Membrane Protein Characterization
- 07:40Conclusion
Co-translationel indsættelse i præformede nanodiscs gør det muligt at studere cellefrie syntetiserede membranproteiner i definerede lipidmiljøer uden kontakt med vaskemidler. Denne protokol beskriver forberedelsen af væsentlige systemkomponenter og de kritiske parametre til forbedring af ekspressionseffektivitet og prøvekvalitet.
