Gene Knock-in by CRISPR/Cas9 and Cell Sorting in Macrophage and T Cell Lines

Lichen Zhang; Rong Huang; Liaoxun Lu; Rui Fu; Guo Guo; Yanrong Gu; Zhuangzhuang Liu; Le He; Marie Malissen; Yinming Liang

doi:10.3791/62328

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Immunology and Infection

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CRISPR/Cas9による遺伝子ノックインとマクロファージおよびT細胞株における細胞分類

Gene Knock-in by CRISPR/Cas9 and Cell Sorting in Macrophage and T Cell Lines

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JoVE Journal Immunology and Infection

Gene Knock-in by CRISPR/Cas9 and Cell Sorting in Macrophage and T Cell Lines

CRISPR/Cas9による遺伝子ノックインとマクロファージおよびT細胞株における細胞分類

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11:32 min

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November 13, 2021

DOI:

10.3791/62328-v

DOI:

10.3791/62328-v

•

11:32 min

November 13, 2021

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Lichen Zhang¹, Rong Huang¹, Liaoxun Lu¹, Rui Fu¹, Guo Guo¹, Yanrong Gu¹, Zhuangzhuang Liu¹, Le He¹, Marie Malissen², Yinming Liang¹

¹The Laboratory of Genetic Regulators in the Immune System, School of Laboratory Medicine,Xinxiang Medical University ²Centre d’Immunologie de Marseille-Luminy,Aix Marseille Université

Summary

このプロトコルは、蛍光レポーターと細胞分類を使用して、マクロファージおよびT細胞株におけるノックイン実験を簡素化します。これらの単純なノックイン実験、すなわちCRISPR/Cas9-およびDsRed2発現プラスミドと、免疫細胞内の Rosa26 遺伝子座に永久に統合されたEBFP2を発現する相同組換えドナープラスミドの2つのプラスミドが使用されます。