Gene Knock-in by CRISPR/Cas9 and Cell Sorting in Macrophage and T Cell Lines

Lichen Zhang; Rong Huang; Liaoxun Lu; Rui Fu; Guo Guo; Yanrong Gu; Zhuangzhuang Liu; Le He; Marie Malissen; Yinming Liang

doi:10.3791/62328

Journal

/

Immunology and Infection

/

MACROPHAGE ve T Hücre Hatlarında CRISPR/Cas9 ve Hücre Sıralama tarafından Gen Knock-in

Gene Knock-in by CRISPR/Cas9 and Cell Sorting in Macrophage and T Cell Lines

JoVE Journal
Immunology and Infection
Author Produced

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Immunology and Infection

Gene Knock-in by CRISPR/Cas9 and Cell Sorting in Macrophage and T Cell Lines

MACROPHAGE ve T Hücre Hatlarında CRISPR/Cas9 ve Hücre Sıralama tarafından Gen Knock-in

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

10,448 Views

•

11:32 min

•

November 13, 2021

DOI:

10.3791/62328-v

DOI:

10.3791/62328-v

•

11:32 min

November 13, 2021

•

10424 Views

Lichen Zhang¹, Rong Huang¹, Liaoxun Lu¹, Rui Fu¹, Guo Guo¹, Yanrong Gu¹, Zhuangzhuang Liu¹, Le He¹, Marie Malissen², Yinming Liang¹

¹The Laboratory of Genetic Regulators in the Immune System, School of Laboratory Medicine,Xinxiang Medical University ²Centre d’Immunologie de Marseille-Luminy,Aix Marseille Université

Summary

Bu protokol, makrofaj ve T hücre satırlarındaki darbe denemelerini basitleştirmek için floresan muhabirleri ve hücre sıralamasını kullanır. Bu basitleştirilmiş knock-in deneyleri için iki plazmid kullanılır, yani CRISPR / Cas9- ve DsRed2 ifade eden plazmid ve bağışıklık hücrelerindeki Rosa26 lokusunda kalıcı olarak entegre edilen EBFP2'yi ifade eden homolog bir rekombinasyon donör plazmid.