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इन विट्रो लक्षित एपिजेनेटिक साइलेंसिंग के लिए इंजीनियर ट्रांसक्रिप्शनल रिप्रेसर्स का चयन
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Chapters
- 00:05Introduction
- 01:34Engineering a Fluorescence-Based Reporter Cell Line
- 03:10Designing gRNAs for CRISPR/dCas9-Based Epigenetic Silencing of Target Gene
- 04:13Arrayed Transient Delivery of CRISPR/dCas9-Based ETRs in Reporter Cell Line
- 07:19Analyzing Transcriptional Activity of Target Gene Over Time
- 08:11Results: dCas9 ETR-Mediated Epigenetic Silencing of Human B2M Gene by gRNAs
- 09:23Conclusion
यहां, हम उच्च, दीर्घकालिक, स्थिर, ऑन-टारगेट साइलेंसिंग दक्षता और कम जीनोम-वाइड, ऑफ-टारगेट गतिविधि के साथ इंजीनियर ट्रांसक्रिप्शनल रिप्रेसर्स (ईटीआर) के इन विट्रो चयन के लिए एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं। यह वर्कफ़्लो उम्मीदवार ईटीआर के प्रारंभिक, जटिल प्रदर्शनों को एक छोटी सूची में कम करने की अनुमति देता है, जो चिकित्सीय रूप से प्रासंगिक सेटिंग्स में आगे के मूल्यांकन के लिए उपयुक्त है।
