Journal
/
Bioengineering
/
In Vitro Выбор инженерных транскрипционных репрессоров для таргетного эпигенетического подавления
JoVE Journal
Bioengineering
This content is Free Access.
JoVE Journal Bioengineering
In Vitro Selection of Engineered Transcriptional Repressors for Targeted Epigenetic Silencing
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

In Vitro Выбор инженерных транскрипционных репрессоров для таргетного эпигенетического подавления

DOI:
10.3791/64403-v

•

10:44 min

•

May 05, 2023

•

, , , , , , ,
1San Raffaele Telethon Institute for Gene Therapy (SR-Tiget),IRCCS San Raffaele Scientific Institute, 2Center for Omics Sciences,IRCCS San Raffaele Institute, 3Institute for Biomedical Technologies,National Research Council, 4Vita-Salute San Raffaele University

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 01:34Engineering a Fluorescence-Based Reporter Cell Line
  • 03:10Designing gRNAs for CRISPR/dCas9-Based Epigenetic Silencing of Target Gene
  • 04:13Arrayed Transient Delivery of CRISPR/dCas9-Based ETRs in Reporter Cell Line
  • 07:19Analyzing Transcriptional Activity of Target Gene Over Time
  • 08:11Results: dCas9 ETR-Mediated Epigenetic Silencing of Human B2M Gene by gRNAs
  • 09:23Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

В данной работе мы представляем протокол отбора in vitro инженерных транскрипционных репрессоров (ETR) с высокой, долгосрочной, стабильной, целевой эффективностью подавления и низкой общегеномной внецелевой активностью. Этот рабочий процесс позволяет свести первоначальный сложный репертуар кандидатов ETR к короткому списку, пригодному для дальнейшей оценки в терапевтически значимых условиях.

Tags

Keywords: Epigenetic SilencingGene SilencingArtificial NucleasesEngineered Transcriptional RepressorsChromatin CompactionTranscriptional InhibitionGene DisruptionRNA InterferenceB2M GeneCRISPR Cas9Nucleofection

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

check_url/64403?article_type=v

Сотовая Добыча липидов для целевой Стабильный изотопного разбавления жидкостной хроматографии-масс-спектрометрического анализа
check_url/64403?article_type=v

Хирургическая техника для имплантации тканей Engineered сосудистые протезы и последующих<em> В Vivo</em> Мониторинг
check_url/64403?article_type=v

Производственные, характеристики и потенциальные возможности использования в 3D тканевой инженерии человека пищевода слизистой модели
check_url/64403?article_type=v

Раздражение глаз тест (СПЭ) для идентификации опасности глазных Раздражает химических веществ с использованием реконструированного человеческой роговицы, как Эпителиальный (RHCE) тканей Модель
check_url/64403?article_type=v

Спроектированный васкуляризированных лоскута
check_url/64403?article_type=v

Комбинированный 3D Tissue Engineered<em> In Vitro</em> /<em> В Silico</em> Lung Опухоль модель для прогнозирования эффективности наркотиков в конкретных мутационные Backgrounds
check_url/64403?article_type=v

Целенаправленное плазматической мембраны Поставка гидрофобной Cargo инкапсулированы в жидком кристалле наночастицы Carrier
check_url/64403?article_type=v

<em> In Vitro</em> Орган культуры Модель мышиной межпозвонкового диска
check_url/64403?article_type=v

Производство генетически Золотой сирийских хомяков Pronuclear инъекции комплекса ТРИФОСФАТЫ/Cas9
check_url/64403?article_type=v

Репрессии транскрипции гена, перенаправив клеточными с химической эпигеномные модификаторы

Read Article