Journal
/
Bioengineering
/
In vitro Val av konstruerade transkriptionsrepressorer för riktad epigenetisk avstängning
JoVE Journal
Bioengineering
This content is Free Access.
JoVE Journal Bioengineering
In Vitro Selection of Engineered Transcriptional Repressors for Targeted Epigenetic Silencing
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

In vitro Val av konstruerade transkriptionsrepressorer för riktad epigenetisk avstängning

DOI:
10.3791/64403-v

•

10:44 min

•

May 05, 2023

•

, , , , , , ,
1San Raffaele Telethon Institute for Gene Therapy (SR-Tiget),IRCCS San Raffaele Scientific Institute, 2Center for Omics Sciences,IRCCS San Raffaele Institute, 3Institute for Biomedical Technologies,National Research Council, 4Vita-Salute San Raffaele University

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 01:34Engineering a Fluorescence-Based Reporter Cell Line
  • 03:10Designing gRNAs for CRISPR/dCas9-Based Epigenetic Silencing of Target Gene
  • 04:13Arrayed Transient Delivery of CRISPR/dCas9-Based ETRs in Reporter Cell Line
  • 07:19Analyzing Transcriptional Activity of Target Gene Over Time
  • 08:11Results: dCas9 ETR-Mediated Epigenetic Silencing of Human B2M Gene by gRNAs
  • 09:23Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Här presenterar vi ett protokoll för in vitro-selektion av konstruerade transkriptionsrepressorer (ETR) med hög, långsiktig, stabil, on-target avstängningseffektivitet och låg genom-wide, off-target aktivitet. Detta arbetsflöde gör det möjligt att reducera en inledande, komplex repertoar av ETR-kandidater till en kort lista, lämplig för vidare utvärdering i terapeutiskt relevanta miljöer.

Tags

Keywords: Epigenetic SilencingGene SilencingArtificial NucleasesEngineered Transcriptional RepressorsChromatin CompactionTranscriptional InhibitionGene DisruptionRNA InterferenceB2M GeneCRISPR Cas9Nucleofection

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

check_url/64403?article_type=v

Cellular Lipid Extraction för riktade Stabil isotoputspädning Vätskekromatografi-masspektrometri Analys
check_url/64403?article_type=v

Kirurgisk teknik för implantation av vävnadstekniska kärlimplantat och efterföljande<em> In Vivo</em> Övervakning
check_url/64403?article_type=v

Produktion, karakterisering och potentiella användningsområdena för en 3D vävnadstekniska Human Esophageal Mucosal Modell
check_url/64403?article_type=v

Ögonirritationstest (EIT) för Hazard Identifiering av Eye irriterande kemikalier med hjälp av rekonstruerad Human Cornea liknande Epithelial (RHCE) Tissue Modell
check_url/64403?article_type=v

Engineered vaskulariserade Muskel Flap
check_url/64403?article_type=v

En kombinerad 3D vävnadstekniska<em> In Vitro</em> /<em> In silico</em> Lungtumör modell för att förutsäga läkemedelseffektivitet i specifika Mutations bakgrunder
check_url/64403?article_type=v

Riktade Plasma Membrane Leverans av en hydrofob Cargo inkapslad i en Liquid Crystal nanopartiklar Carrier
check_url/64403?article_type=v

En<em> In Vitro</em> Organ Kultur Modell av murina mellankotskivan
check_url/64403?article_type=v

Produktion av genmanipulerade gyllene syriska hamstrar genom pronukleär injektion av CRISPR/Cas9 komplexet
check_url/64403?article_type=v

Ompressning gentranskription genom att omdirigera cellulära maskineriet med kemiska epigenetiska modifierare

Read Article