Protokoller for vurdering Radiofrekvens Interaksjoner med gull Nanopartikler og biologiske systemer for ikke-invasiv hypertermi Cancer Therapy

Medicine

Your institution must subscribe to JoVE's Medicine section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

Welcome!

Enter your email below to get your free 10 minute trial to JoVE!





We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.

If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.

 

Summary

Vi beskriver protokollene som brukes for å undersøke samspillet mellom 13.56 MHz radiofrekvens (RF) elektriske-felt med gull nanopartikkel kolloider i både ikke-biologiske og biologiske systemer (in vitro / vivo). Disse interaksjonene er under etterforskning for applikasjoner i kreftbehandling.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Corr, S. J., Cisneros, B. T., Green, L., Raoof, M., Curley, S. A. Protocols for Assessing Radiofrequency Interactions with Gold Nanoparticles and Biological Systems for Non-invasive Hyperthermia Cancer Therapy. J. Vis. Exp. (78), e50480, doi:10.3791/50480 (2013).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Kreft terapier som er mindre giftig og invasiv enn sine eksisterende kolleger er svært ønskelig. Anvendelse av RF-elektriske felter som trenger dypt inn i kroppen, forårsaker minimal toksisitet, blir for tiden studert som et levedyktig middel for non-invasiv kreft terapi. Det er tenkt at samspillet av RF-energi med internalisert nanopartikler (NPS) kan frigjøre varme som deretter kan føre til overoppheting (hypertermi) av cellen, til slutt endte i celle nekrose.

I tilfellet av ikke-biologiske systemer, presenteres detaljerte protokoller vedrørende kvantifisere varmen frigjort av høyt konsentrerte NP kolloider. For biologiske systemer, i tilfelle av in vitro eksperimenter beskrives teknikker og betingelser som må overholdes for effektivt å eksponere kreft celler for RF-energi uten bulkmateriale varme gjenstander vesentlig obscuring dataene. Til slutt gir vi en detaljert metodikk feller in vivo musemodeller med ektopisk leverkreftsvulster.

Introduction

Absorpsjonen av RF-energi av biologisk vev (på grunn av deres iboende elektriske permittivitet) resulterer i forhøyede temperaturer vev som en funksjon av tid, som til slutt fører til celledød ved hypertermi. Det er en hypotese at kreft hypertermi kan optimaliseres ved hjelp av målrettet nanomaterialer som internal i kreftcellen, og fungerer som en RF-termiske transdusere, slik at de nærliggende sunne, normale celler intakt. Flere rapporter har allerede vist seg at en rekke av NPS kan fungere som effektive RF varmekilder som hjelpemiddel i kreft nekrose 1-4.

I disse forhold, gull NPs (AuNPs) 3-5, karbon nanorør en, og kvanteprikker seks, syv har utstilt spennende egenskaper når de brukes i både in vitro og in vivo RF eksperimenter. Selv om den eksakte art av varmemekanismen av disse NPS når eksponert for en RF-feltet er fortsatt blir diskutert, en seriegrunnleggende eksperimenter med AuNPs har lagt stor betydning på både NP størrelse og aggregering stater. Det ble vist at bare AuNPs med diametre <10 nm vil varme når de utsettes for en RF-felt åtte. Dessuten er dette oppvarming mekanisme betydelig svekket når de AuNPs aggregeres. Dette aggregering tilstand ble også validert innen in vitro modeller som plasserte betydning ved å optimalisere AuNP kolloidalt stabilitet innen endolysomal intracellulære rom for effektiv RF terapi fire. Imidlertid kan de teknikker og forsøks prinsipper som brukes til å samle inn og vurdere disse dataene er problematisk, spesielt i tilfellet med å validere RF varmeprofiler fra NP kolloider.

Flere rapporter har vist at Joule oppvarming av bakgrunnen ionisk suspensjon at NPs er suspendert i kan være den viktigste kilden til RF varmeproduksjon og ikke NPS selv 9-12. Selv om vår nyere artikkel 8 har validert than bruke av RF-interaksjoner i å generere varme fra AuNPs av diameter mindre enn 10 nm, har vi som mål å beskrive disse protokollene i mer detalj i denne artikkelen.

Vi har også demonstrere protokoller og teknikker for å evaluere effekten av AuNPs som hyperthermic termiske agenter i både in vitro og in vivo eksperimenter for leverkreft modeller. Selv om vi først og fremst fokusere på enkle kolloider av citrate-avkortet AuNPs, kan de samme teknikkene brukes på andre AuNP hybrider som antistoff-og kjemoterapi-konjugert komplekser. Ved å følge disse prinsippene i experimentalist skal forhåpentligvis være i stand til raskt å vurdere potensialet for noen nanomaterial for å være en effektiv RF-indusert termisk hyperthermic agent.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

En fullstendig oversikt over forsøks er avbildet i figur 1.

Ytterligere detaljer er vist i trinn 1-3 nedenfor.

En. Vurdere RF Oppvarming av NP Kolloider: AuNPs som et eksempel

  1. Generelt, for hver NP prøven som undersøkes, først vaske prøven flere ganger gjennom et sentrifugefilter med deionisert (DI) vann for å fjerne bakgrunns ioner og forurensninger. Alle ioner og forurensninger skal ha blitt fjernet fra AuNP suspensjon når væsken blir vasket ut har lignende RF oppvarming priser (HRS) som DI vann. Denne renseprosess gir også mulighet for høyere konsentrasjoner av NPS å bli oppnådd. Det er verdt å merke seg at selv om du bruker AuNPs i dette eksempelet, kan de grunnleggende prinsippene brukes på andre NP materialer.
  2. Som et eksempel, å rense en 500 ml flaske med kommersielt tilgjengelige AuNPs av diameter 5 nm og deretter utsette dem for en 13.56 MHz RF-felt for elektrisk-field styrke 90 kV / m.
    1. Ta ~ 125 ml fra aksje AuNP løsning og delt mellom seks 50 kDa sentrifuge filter rør. Sentrifuger ved 3000 rpm. i 2 min 5 sek. Fjern filtrert buffer og refill filtre med mer lagerløsning. Gjenta til alle 500 ml er blitt filtrert.
    2. Sett filtrert buffer med en tilsvarende volum av DI vann og gjenta omtrent 8 ganger (eller helt til de filtrerte buffer RF HRS er ekvivalent med DI-vann). Legg merke til, UV-Vis-analysen kan også bli brukt for å overvåke forurensnings absorpsjonstopper. Når buffer forurensninger har blitt fullstendig fjernet, pipette omtrent 0,5 ml DI-vann inn i hvert filter og resuspender AuNPs ved gjentatt pipettering. Dette bør helt fjerne AuNPs fra filteret og tillater full blandet godt. Kombiner alle seks suspensjoner i en 15 ml Eppendorf tube.
    3. Når AuNPs har blitt renset og konsentrert, analysere prøven ved hjelp av ICP-OES og / eller ICP-MS, UV-vis og Zeta potensial for data om-konsentrasjonenn og NP stabilitet, respektivt. SEM-og / eller TEM-analyse kan også bli anvendt for å oppnå morfologiske data. Detaljert prøvepreparering for disse teknikker kan finnes i litteraturen 4..
  3. Ved hjelp av Kanzius RF-systemet er beskrevet i tidligere studier 8, eller avledninger av dette systemet, plasserer en 1,3 ml sylindrisk kvarts kuvette slik at RF elektrisk felt i luft (uten prøve tilstede) være ~ 90 kV / m på innsiden av kyvetten. For en standard saltløsning prøve (0,9% NaCl) det elektriske felt vil bli redusert til ca 1,1 kV / m. Disse er de omtrentlige betingelser som benyttes for sammenligning gjøres mellom forskjellige systemer.
    1. Pipetter 1,3 ml av en 1000 mg / l prøve av renset AuNP kolloid inn i kvartskuvette, og innføre denne ned i RF-feltet. Dette kan gjøres ved hjelp av en spesialbygd Teflon prøveholderen. Eksponere prøven til RF-feltet i et tidsrom på 120 s eller inntil prøven har nådd 70 ° C for å hindre at elektrisk overslag eller kraftig koking. Capture de termiske (samt kontrollområder) data ved hjelp av en IR-kamera og tilhørende programvare. Gjenta denne prosedyren tre ganger.
    2. Filtrer prøven gjennom en annen 50 kDa sentrifuge filter for å pakke ut AuNPs fra DI vann buffer. Re-eksponere buffer til RF-feltet, på nytt tre ganger. Forskjellen i HRS mellom AuNP kolloid og bakgrunnen DI-vann-buffer bestemmer HR grunn av AuNPs selv. Forvente å få timer med ~ 0,3 ° C / sek, og 0,05 ° C / sek for å gi en AuNP avhengig HR på ~ 0,25 ° C / sek. Susp de rester AuNPs fra filteret i 1,3 ml vann for in vitro / vivo eksperimenter.

2. Nanopartikkel-assistert RF-indusert hypertermi: In vitro-studier

  1. Disse in vitro-studier kan anvendes på alle typer kreft celletype som danner 2D monolag. I dette eksperimentet bruke menneskelige leverkreft avledet Hep3B celler.
    1. Plate ~ 50000 cells i ford tre brønner på en 12-brønn plate med 1 ml vekstmedier. Gjenta dette seks ganger (bruke tre plater for NP studier og tre plater som kontroller). Inkuber ved 37,5 ° C i 24 timer før innføring av NPs. Steril NPs første bruker BioSafety Cabinet UV-lys eksponering for 5 min.
    2. Inn i hver brønn å innføre 0,1 ml av en 1,000 mg / L AuNP løsningen og la stå i ytterligere 24 timer. Til 0,1 ml vann i hver brønn av de tre kontrollcelleplatene og også gitt i 24 timer.
    3. Etter 24 timer har gått, aspirer celle media og vask med PBS for å fjerne overflatebundet AuNPs. Erstatt cellen media. Cellene er nå klar for RF-stråling.
  2. Plasser hver 12-brønns cellepakke innenfor RF-feltet. Vent til cellene er avkjølt til 31 ° C. Slå på RF-generatoren og utsettes i 3,5 min. Den endelige temperatur av cellemateriale vil være ~ 37 ° C. Slå av RF-felt. Fjern cellene og legg dem i en inkubator for 24 timer før analyse.
      <li> Fjern celler fra inkubatoren og aspirer cellemedier. Til 1,6 ml av cellemateriale til hver brønn i tillegg til 0,4 ml av MTT-reagens. Inkuber cellene i 4 timer. Sug media og erstatte med 2 ml dimetylsulfoksyd (DMSO). Plasser celleplatene på en benk rocker og la stå i 10 minutter for å la DMSO å oppløse MTT reagenser. Endelig pipette 100 ul fra hver brønn inn i en 96-brønns plate og optisk leser brønnen ved 570 nm ved bruk av en plateleser som SPECTROstar Nano plateleser.

Tre. Nanopartikkel-assistert RF-indusert hypertermi: In vivo studier

  1. Disse in vivo studier kan brukes på alle typer kreft som former solide svulster i en orthotopic eller utenfor livmoren murine modell. Dette eksperimentet bruker Hep3B leverkreftceller i en ektopisk tumor BALB-C Nude mus modell.
  2. Merk: Alle in vivo eksperimenter er utført i samsvar med alle relevante retningslinjer, forskrifter og kontrollorganer. Også protokollen blir demonstrert ble utført under veiledning og godkjenning av University of Texas MD Anderson Cancer Centers Institutional Animal Care og bruk Committee (IACUC).
    1. Dyrk et passende antall celler (~ 100 k) i en vevskultur kolbe med det passende vekstmedium. Inkuber i en 37 ° C inkubator med 5% CO2 i løpet av cellekultur.
    2. Behandle cellene med trypsin (for å løsne fra kolben), og en oppløsning på 2 millioner celler for hver 25 pl. Til en lik mengde av Matrigel (på is), og bland grundig for å forberede det endelige injeksjonsoppløsningen. Sprøyt løsningen inn i den ønskede posisjon på musens tilbake og vente en passende tidsperiode for tumorer til å vokse til den ønskede størrelse (2-4 uker for de fleste celler). Før RF eksponering, bør BALB-C Nude mus bære solide ektopiske tumorer 0,5-1 cm diameter.
    1. Forbered musene som skal brukes (i dette tilfellet BALB-C nakne mus) av anaesthetizing dem med en oppløsning av ketamin og xylazin ved IP-injeksjon. Mens musene er å sovne, holde dem i et temperaturkontrollert kammer ved 37 ° C. 20 mus i totalt vil være nødvendig, alle bærende lignende størrelse tumorer. Ti mus vil bli brukt i forbindelse med og uten AuNPs (sistnevnte er bare PBS-injeksjoner), mens de gjenværende 10 mus vil bli delt mellom RF-eksponerte og ikke-eksponerte RF-kontroller: begge grupper med ingen AuNP injeksjoner.
    2. Når den skal bedøves, injisere AuNPs direkte inn i tumoren ved hjelp av en en-cc sprøyte med en 27 G nål. Den AuNP løsning bør være på en Au konsentrasjon på 200 mg / L i 0,1 ml PBS. Etter injeksjon, bruk en kirurgisk pinne for å absorbere blod og tørk av injeksjonsstedet med en spritoppløsning.
    3. Deretter monteres mus som skal behandles på den mottagende leder av RF-generator. Musen plasseres slik at tumoren er nærmest overføringshodet. Shield de områder som ikke skal behandles, samt sensitive områder som øyne, ører og tær, med kobbertape. Vær sikker på at kobber tape er hensiktsmessig å kontakte jordplanet slik at ingen kostnad buildup oppstår. Dessuten må eksponeringsområde har en avstand på minst 1 cm større enn størrelsen av den ønskede behandlingsstedet.
    4. Posisjon IR varmekamera slik at svulsten og behandlingsområdet er synlig. Slå på RF for 5 min. Spill den resulterende temperaturkurve. Hvis terapi oppnår temperaturer høyere enn 42 ° C stopper behandling umiddelbart.
    1. Etter RF eksponering gjenopprette musene fra anestesi i en varm kammer før de er bevisst.
    2. Gjenta eksperimentet med samme mus 48 timer senere (trinn 3.3.1 - 3.4.1).
    3. Etter forsøket avlive musene i samsvar med institusjonelle protokoller og prosedyrer. Noter vekten av svulsten. For histologisk analyse fikse svulster ved hjelp av formalin og legge dem i parafin. Tumor seksjoner er vanligvis farget viddh hematoxylin og eosin og for mål som er relevante for å måle terapeutisk effekt, f.eks Ki-67, kløyvde caspase-3, etc.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

En. Vurdere RF oppvarming av NP kolloider: AuNPs som et eksempel.

Etter å ha fulgt avsnitt 1.1 - 1.2.3 forventer å ha en svært konsentrert, stabil, og renset løsning av 5 nm og 10 nm diameter AuNPs. Fra 500 ml as-kjøpt stamoppløsning forvente å oppnå minst 4 ml oppløsning ved en konsentrasjon på 1,000 mg / L. Forskjellen i HRS mellom AuNPs og bakgrunnen DI-vann-buffer-oppløsning ved denne konsentrasjon bør være ~ 0,25 ° C / sek og 0,1 ° C / sek til 5 nm og 10 nm AuNPs, henholdsvis, slik det er vist i figur 2..

2. Nanopartikkel-assistert RF-indusert hypertermi: In vitro studier

Resultatene bør ideelt viser at celler eksponert for en RF-felt som er internalisert AuNPs er mindre levedyktig enn de ikke-AuNP RF eksponerte celler. Et eksempel på slike forventede resultater er uthevet i figur 3.

Tre. Nanoticle-assistert RF-indusert hypertermi: In vivo studier

Ved injeksjon av PBS-suspendert AuNPs og etter eksponering for RF-behandling av ~ 2-3 uker, bør posthumous analyse avslører kontrollert tumorvekst og / eller en reduksjon i tumorstørrelse / masse (som vist i figur 4). Det kan også være tegn på en direkte cellulær termisk ablasjon. Imidlertid kan dette ikke være tilfelle som enkle citrate-capped AuNPs er langt fra å bli optimalisert og har en tendens til å aggregere i svulstvev. Som man kan se i de senere publikasjoner, må AuNPs være ikke-aggregert i løpet av intracellulære organ for å forbedre RF-indusert cytoxicity. Også har nyere studier vist at bøying av kjemoterapi narkotika som gemcitabin til AuNPs optimaliserer RF terapi. Etterforskeren kan fortsatt bruke disse protokollene imidlertid å direkte sammenligne effektiviteten av sine egne AuNP-kompleks i forhold til våre grupper tidligere arbeid.


Figur 1. Experimental oversikt. AuNP oppvarming vurdering: As-kjøpt AuNPs (1.a) er plassert i en 50 kDa filter (1.b) og sentrifugeres ned for å skille AuNPs fra filtratet (1.c). Dette gir mulighet for svært konsentrerte og rensede AuNPs som skal dannes (1.d). Prøven blir deretter plassert inn i RF-systemet ved hjelp av en Teflon prøveholderen er montert på en justerbar rotasjonstrinn (1.e). De AuNPs oppvarming priser, samt fire øvrige kontrollområder, er tatt opp med et IR-kamera (1.f) In vitro protokoller:. Hep3B leverkreftceller dyrket i de fremre tre-brønner på flere 12-brønners celle pakker som vist i 2.a (mengden celle-packs brukes dep ender på hva experimentalist ønsker å undersøke i forhold til anvendt RF power, AuNP konsentrasjon, kontroller, etc.). Hver 12-brønn-plate blir deretter utsatt for RF-feltet (2.b). Selv om det ikke er nødvendig som den optimale RF eksponeringstiden har allerede blitt bestemt medietemperaturen kan også registreres ved hjelp av IR-kamera (2.c) In vivo-protokoller:. BALB-c mus peiling ektopiske leversvulster (3.a) var utsatt for intra-tumoral injeksjon av AuNPs og utsatt for RF-system (3.b) i flere minutter. Kobber båndet ble brukt til jord musene for å forhindre hud-brenning. En kvartskuvette fylt med AuNPs vises også ved siden av musen til å validere RF eksponering. Tumorområdet bør ha en høyere temperatur enn resten av mus og vanligvis er rødt i IR-bildet (3.c).

ys "> Fig. 2
Figur 2. Oppvarming priser (° c / sek) på 5 nm og 10 nm diameter AuNPs løsninger. Per protokoll instruksjoner, er oppvarming satser fastsatt for AuNPs med supernatant (AuNPs + SN), AuNPs filtrert ut slik at bare supernatanten er til stede (SN) , og forskjellen i oppvarming priser mellom disse to (forskjellen). Gjennomsnittlig oppvarming priser er fra tre ulike eksperimenter (A, B, og C).

Figur 3
Figur 3. . Idealisert Hypertermi cytotoksisitet levedyktighet (MTT assay) Vist er fire celleforsøk: kontroll (ingen RF), bare AuNP (ingen RF), RF bare, og RF med tillegg av mobilnettet internalisert AuNPs (A, B, C og D, henholdsvis ).

"> Figur 4
Figur 4 Posthumous analyse av ektopiske muse svulster.. Den venstre svulst er hva som forventes fra både kontrollprøver dvs. ingen RF og ingen AuNP injeksjon). Den midtre tumor viser en svak reduksjon i størrelse når det utsettes for RF-feltet alene. Imidlertid viser den høyre tumor at RF + AuNP kombinert terapi kan minske / kontrollere tumorvekst ytterligere.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Disse protokollene tillater experimentalist å fullt ut analysere i hvilken grad nanomaterialer (i dette tilfellet AuNPs) kan øke RF-indusert hypertermi for kreftbehandling. Den første protokollen spesifikt omhandler analysere varmeproduksjon fra svært konsentrert og renset AuNP prøver. Selv om andre grupper har rapportert varmeproduksjon hovedsakelig fra bufferne som AuNPs er suspendert i, og ikke de AuNPs selv 9-11, deres RF-systemer anvendes lavere konsentrasjoner av AuNPs med diameter> 10 nm, så vel som lavere RF-drifts krefter med elektrisk feltstyrker <90 kV / m som er for lave til å se noen merkbar RF oppvarming effekter fra AuNPs. Bare ved å følge protokoller og parametre oppført i denne rapporten kan experimentalist observere nanoskala varme fenomen.

In vitro delen lar utvikling av cellular-RF-NP grensesnitt for å bli utredet for optimert RF / NP-indusert hypertermi. BEFmalm tillegg av AuNPs og RF-stråling, bør du forvente å ha en levedyktig 2D-lag vekst av de aktuelle kreftcellelinjer (i dette tilfellet Hep3B). Imidlertid må den riktige RF-eksponeringstiden for hver cellelinje som skal forutbestemt før disse eksperimentene ved å eksponere cellene til RF-feltet ved ulike tidspunkt, f.eks 2 -8 min) og ser på deres levedyktighet profilen etter 24 timer. Den korrekte RF eksponeringstiden du bruker bør være der cellene er ~ 80% levedyktig. I tilfelle av Hep3B celler dette ble funnet å være ~ 3,5 min.

Den enkleste analysen av valget for levedyktighet er standard 3 - (4,5-dimethylthiazol2-yl)-2.5-difenyltetrazoliumbromid (MTT) assay, selv om et annet assay kan være nødvendig dersom det er forventet at NPS skal samvirke med analysereagensene (slik tilfellet var med MTT-analysen reagerer med CNTs 13 var). Andre mer avanserte og detaljerte analyser kan anvendes for å vurdere celledød mekanisme slik som FACS-analyse med Annexin V-og propidium iodide (PI) farging. Future in vitro system utviklingen innenfor vår gruppe vil se på å plassere cellene i en temperaturregulert inkubator RF-inert å fullstendig utelukke eventuelle mulige kilder til hypertermi grunn av bulk oppvarming av cellematerialet. Også mengden av AuNPs som trenger å bli internalisert i en celle for maksimal celledød, så vel som deres stabilitet i intracellulære organeller, vil bli undersøkt i nærmere detalj. Dette er i samsvar med nyere arbeider som viste at AuNPs må være ikke-aggregert i lysosomer for forbedret RF-terapi 4..

Endelig in vivo-fremgangsmåte ble beskrevet for å tillate fullstendig bio-analyse av AuNPs i ektopiske leverkreft muse-modeller for deres evne til å kontrollere eller redusere tumorvekst og / eller størrelse i kombinasjon med RF-terapi. Et viktig poeng for diskusjonen er muligheten for RF-feltet for å indusere hudforbrenninger på musen på grunn av feil jordingsprosedyrer. Bruken av properly jordet og plassert kobberbånd, som nevnt i protokoll delen, er et krav for å stoppe disse brannskader.

Future in vivo arbeid i vår lab vil arbeide med å vurdere selve mekanismen av tumor død / størrelse kontroll fra RF-AuNP eksponering. Selv om det er en hypotese at hypertermi spiller en avgjørende rolle, må dette bli validert selv om bruken av slike kontroller som direkte innsetting av optisk-fiber termiske følere inn i svulsten, og omkringliggende friske celler for å se på den RF-induserte temperaturrespons for slike vev . Dessuten ville utvikling av en intracellulær fluorescerende fargestoff som har termisk emisjonsbølgelengde er en direkte funksjon av temperaturen er et utmerket verktøy for validering og kan også bli anvendt for in vitro-modeller.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Vi har ingenting å avsløre.

Acknowledgements

Dette arbeidet ble finansiert av NIH (U54CA143837), NIH MD Anderson Cancer Center Support Grants (CA016672), V Foundation (SAC), og en ubegrenset forskningsstipend fra Kanzius Research Foundation (SAC, Erie, PA). Vi takker Kristine Ask fra Institutt for Kirurgisk Oncology, MD Anderson Cancer Center, for administrativ bistand.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Reagent/Material
500 ml gold nanoparticles (5 nm) Ted Pella, INC 15702-5
Amicon Ultra-4/-15 Centrifugal Filter Units (50 kDa) Millipore UFC805024/UFC910096 (4 ml and 15 ml volumes)
MEM X1 Cell Culture Media Cellgro 10-101-CV (add extra nutrients as necessary)
Fetal Bovine Serum Sigma F4135-500 ml
Copper Tape Ted Pella 16072
Equipment
Kanzius RF System (13.56 MHZ) ThermMed, LLC, Inc. (Erie, PA, USA)
IR Camera FLIR SC 6000, FLIR Systems, Inc. (Boston, MA, USA) Contact FLIR
1.3 ml Quartz Cuvette ThermMed, LLC, Inc. (Erie, PA, USA)
Teflon Sample holder with Rotary Stage ThermMed, LLC, Inc. (Erie, PA, USA)
SPECTROstar Nano Microplate reader BGM Labtech
UV-Vis spectrometer Applied Nanofluorescence, Houston, TX) NS1 NanoSpectralyzer
ICP-–S PerkinElmer Optima 4300 DV
Zetasizer Malvern Zen 3600 Zetasizer

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Gannon, C. J., et al. Carbon nanotube-enhanced thermal destruction of cancer cells in a noninvasive radiofrequency field. Cancer. 110, 2654 (2007).
  2. Curley, S. A., Cherukuri, P., Briggs, K., Patra, C. R., Upton, M., Dolson, E., Mukherjee, P. Noninvasive radiofrequency field-induced hyperthermic cytotoxicity in human cancer cells using cetuximab-targeted gold nanoparticles. J. Exp. Ther. Oncol. 7, 313 (2008).
  3. Gannon, C. J., Patra, C. R., Bhattacharya, R., Mukherjee, P., Curley, S. A. Intracellular gold nanoparticles enhance non-invasive radiofrequency thermal destruction of human gastrointestinal cancer cells. Journal of Nanobiotechnology. 6, 2 (2008).
  4. Raoof, M., et al. Stability of antibody-conjugated gold nanoparticles in the endolysosomal nanoenvironment: implications for noninvasive radiofrequency-based cancer therapy. Nanomedicine. 8, 1096 (2012).
  5. Glazer, E. S., Massey, K. L., Zhu, C., Curley, S. A. Pancreatic carcinoma cells are susceptible to noninvasive radio frequency fields after treatment with targeted gold nanoparticles. Surgery. 148, 319 (2010).
  6. Glazer, E. S., Curley, S. A. Radiofrequency field-induced thermal cytotoxicity in cancer cells treated with fluorescent nanoparticles. Cancer. 116, 3285 (2010).
  7. Glazer, E. S., Curley, S. A. Non-invasive radiofrequency ablation of malignancies mediated by quantum dots, gold nanoparticles and carbon nanotubes. Therapeutic Delivery. 2, 1325 (2011).
  8. Corr, S. J., Raoof, M., Mackeyev, Y., Phounsavath, S., Cheney, M. A., Cisneros, B. T., Shur, M., Gozin, M., McNally, P. J., Wilson, L. J., Curley, S. A. Citrate-Capped Gold Nanoparticle Electrophoretic Heat Production in Response to a Time-Varying Radiofrequency Electric-Field. J. Phys. Chem. C. 116, 24380 (2012).
  9. Kruse, D. E., et al. A Radio-Frequency Coupling Network for Heating of Citrate-Coated Gold Nanoparticles for Cancer Therapy: Design and Analysis. IEEE Transactions on Biomedical Engineering. 58, 10 (2011).
  10. Li, D., et al. Negligible absorption of radiofrequency radiation by colloidal gold nanoparticles. J. Colloid Interf. Sci. 358, 47 (2011).
  11. Liu, X., Chen, H. J., Chen, X., Parini, C., Wen, D. Low frequency heating of gold nanoparticle dispersions for non-invasive thermal therapies. Nanoscale. (2012).
  12. Sassaroli, E., Li, K. C. P., O'Neill, B. E. Radio frequency absorption in gold nanoparticle suspensions: a phenomenological study. J. Phys. D App. Phys. 45, 075303 (2012).
  13. Worle-Knirsch, J. M., Pulskamp, K., Krug, H. F. Oops they did it again! Carbon nanotubes hoax scientists in viability assays. Nano Lett. 6, 1261 (2006).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics