Protokoller for vurdering radiofrekvens Interaktioner med Guld Nanopartikler og biologiske systemer til ikke-invasiv Hyperthermi Cancer Therapy

Medicine

Your institution must subscribe to JoVE's Medicine section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

Welcome!

Enter your email below to get your free 10 minute trial to JoVE!





We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.

If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.

 

Summary

Vi beskriver de protokoller, der anvendes til at undersøge samspillet mellem 13,56 MHz radiofrekvens (RF) elektriske felter med guld nanopartikel kolloider i både ikke-biologiske og biologiske systemer (in vitro / in vivo). Disse interaktioner bliver undersøgt til applikationer i kræftbehandling.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Corr, S. J., Cisneros, B. T., Green, L., Raoof, M., Curley, S. A. Protocols for Assessing Radiofrequency Interactions with Gold Nanoparticles and Biological Systems for Non-invasive Hyperthermia Cancer Therapy. J. Vis. Exp. (78), e50480, doi:10.3791/50480 (2013).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Behandlinger mod kræft, der er mindre giftige og invasiv end deres eksisterende modstykker er meget ønskeligt. Brugen af ​​RF elektriske felter, der trænger dybt ind i kroppen, der forårsager minimal toksicitet, er i øjeblikket ved at blive undersøgt som en levedygtig middel til ikke-invasiv kræftbehandling. Det er forudset, at samspillet mellem RF-energi med internaliserede nanopartikler (NPS) kan frigøre varme, som så kan forårsage overophedning (hypertermi) af cellen, i sidste ende ender i celle nekrose.

I tilfælde af ikke-biologiske systemer, præsenterer vi detaljerede protokoller om kvantificere varme befriet af højt koncentrerede NP kolloider. For biologiske systemer, i tilfælde af in vitro forsøg, beskriver vi de teknikker og betingelser, der skal overholdes for effektivt at udsætte kræftceller for RF-energi uden bulk-medier opvarmning artefakter betydeligt tilslører dataene. Endelig giver vi en detaljeret metode feller in vivo musemodeller med ektopiske hepatiske kræftsvulster.

Introduction

Absorptionen af ​​RF-energi ved biologisk væv (på grund af deres iboende elektrisk permittivitet) resulterer i forhøjede væv temperaturer som en funktion af tiden, hvilket i sidste ende fører til celledød ved hypertermi. Det antages, at kræft hypertermi kan optimeres gennem brug af målrettede nanomaterialer som internaliserer i kræftcellen og fungere som RF-termiske transducere, der forlader de omkringliggende sunde, normale celler intakt. Adskillige rapporter har allerede vist, at en bred vifte af NP'er kan fungere som effektive RF varmekilder, som hjælper i cancer nekrose 1-4.

I disse henseender guld NP (AuNPs) 3-5, kulstof-nanorør 1, og kvantepunkter 6, 7 har udstillet spændende egenskaber, når de anvendes i både in vitro og in vivo RF eksperimenter. Selv om den nøjagtige karakter af den opvarmning mekanisme af disse nationale parlamenters når de udsættes for et RF-felt stadig bliver debatteret, en rækkefundamentale eksperimenter ved hjælp AuNPs har lagt stor betydning på både NP størrelse og sammenlægning stater. Det blev vist, at kun AuNPs med diameter <10 nm vil varme, når de udsættes for et RF-felt 8. Også dette opvarmning mekanisme betydeligt svækket, når de AuNPs aggregeres. Denne sammenlægning tilstand blev også valideret indenfor in vitro-modeller, der placerede betydning ved at optimere AuNP kolloid stabilitet i endolysomal intracellulære rum til effektiv RF terapi 4. De teknikker og eksperimentelle principper, der anvendes til at indsamle og vurdere disse data, kan dog være problematisk, især i tilfælde af at validere RF varme profiler fra NP kolloider.

Adskillige rapporter har vist, at Joule-opvarmning af baggrunden ioniske suspension, NPS er ophængt i, kan være den vigtigste kilde til RF varmeproduktion og ikke NPS selv 9-12. Selvom vores seneste papir 8 er valideret than brug af RF-interaktioner i varmeproduktionens AuNPs diametre mindre end 10 nm, vi sigter mod at beskrive disse protokoller mere detaljeret i hele denne artikel.

Vi viser også de protokoller og teknikker er nødvendige for at vurdere effektiviteten af AuNPs som hypertermiske termiske agenter i både in vitro og in vivo forsøg for leverkræft modeller. Selvom vi primært fokusere på simple kolloider af citrat-udjævnede AuNPs kan de samme teknikker anvendes på andre AUNP hybrider såsom antistof-og kemoterapi-konjugeret komplekser. Ved at følge disse principper experimentalist forhåbentlig bør være i stand til hurtigt at vurdere potentialet for enhver nanomateriale at være en effektiv RF-induceret termisk hypertermisk agent.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

En komplet eksperimentelle oversigt er vist i figur 1.

Yderligere detaljer er afbildet i trin 1-3 nedenfor.

1.. Vurdere RF Opvarmning af NP Kolloider: AuNPs som et eksempel

  1. I almindelighed, for hver NP prøve at blive undersøgt, først vaske prøven flere gange gennem et centrifugering filter med deioniseret (DI) vand for at fjerne baggrunden ioner og forurenende stoffer. Alle ioner og forurenende stoffer er blevet fjernet fra AuNP suspensionen, når væsken udvaskes har tilsvarende RF opvarmning satser (timer) som DI vand. Denne rensning giver også mulighed for højere koncentrationer af NP'er, der opnås. Det er værd at bemærke, at selv bruge AuNPs i dette eksempel, kan anvendes de grundlæggende principper til andre NP materialer.
  2. Som et eksempel, rense en 500 ml flaske kommercielt tilgængelige AuNPs af diameter på 5 nm og derefter underkaste dem en 13,56 MHz RF inden for el-field styrke 90 kV / m.
    1. Tage ~ 125 ml fra bestanden AuNP løsning og delt mellem seks 50 kDa centrifuge filterrør. Centrifuger ved 3.000 rpm. 2 min 5 sek. Fjern filtreret buffer og refill filtre med mere stamopløsning. Gentag, indtil alle 500 ml er blevet filtreret.
    2. Udskift den filtrerede buffer med en lignende mængde DI vand og gentag ca 8 gange (eller indtil de filtrerede buffer RF HRs svarer til DI vand). Bemærk, UV-Vis-analyse kan også anvendes til at overvåge forurenende absorptionstoppe. Når bufferen forurenende stoffer er blevet fjernet fuldstændigt, pipette cirka 0,5 ml DI-vand i hvert filter og resuspender AuNPs ved gentagen pipettering. Dette bør helt at fjerne AuNPs fra filteret og mulighed for fuld resuspension. Kombiner alle seks suspensioner i en 15 ml Eppendorf-rør.
    3. Når AuNPs er blevet oprenset og koncentreret, analysere prøven ved hjælp af ICP-OES og / eller ICP-MS, UV-vis og Zetapotentialet for data om concentration og NP stabilitet hhv. SEM og / eller TEM-analyse kan også anvendes til at opnå morfologiske data. Detaljeret prøveforberedelse for disse teknikker kan findes i litteraturen 4.
  3. Brug af Kanzius RF-system, der er beskrevet i tidligere undersøgelser 8, eller afledning af dette system, placere en 1,3 ml cylindrisk kvartscuvette så RF elektrisk felt i luften (med ingen prøve stede) ville være ~ 90 kV / m inde i kuvette. For en standard saltvand prøve (0,9% NaCl) det elektriske felt ville blive reduceret til ~ 1,1 kV / m. Disse er de omtrentlige betingelser, der anvendes til at tillade sammenligninger mellem forskellige systemer.
    1. Pipetter 1,3 ml af en 1.000 mg / l prøve af renset AuNP kolloid i kvartskuvette og indføre denne i RF-felt. Dette kan gøres ved hjælp af en specialbygget Teflon prøveholderen. Expose prøve til RF-felt i en periode på 120 sek eller indtil prøven op på 70 ° C for at forhindre elektriske gnister eller hurtig kogning. Capture de termiske billeddiagnostiske data (såvel som kontrolområder), ved hjælp af en IR-kamera og tilhørende software. Gentag denne procedure tre gange.
    2. Der filtreres gennem et andet 50 kDa centrifugefilter at udtrække AuNPs fra DI vand buffer. Re-udsætte puffer til RF-feltet, igen tre gange. Forskellen i HRs mellem AuNP kolloid og baggrunden DI vand buffer bestemmer HR grund af AuNPs selv. Forvent at få timers ~ 0,3 ° C / sek og 0,05 ° C / sek til at give en AuNP afhængig HR på ~ 0,25 ° C / sek. Resuspendere de resterende AuNPs fra filtret i 1,3 ml vand til in vitro / in vivo eksperimenter.

2. Nanopartikel-assisteret RF-induceret hypertermi: In vitro-undersøgelser

  1. Disse in vitro-undersøgelser kan anvendes på enhver form for kræft celletype, der danner 2D monolag. I dette eksperiment anvende humant hepatocellulært carcinom afledt Hep3B celler.
    1. Plate ~ 50.000 cells i de forreste tre brønde i en plade med 12 brønde med 1 ml vækstmedier. Gentag dette 6 gange (bruge tre plader til NP undersøgelser og tre plader som kontrol). Inkuber ved 37,5 ° C i 24 timer, før der indføres NPS. Sterilisere NP'er først med biosikkerhed kabinet UV-lys eksponering i 5 min.
    2. I hver brønd introducere 0,1 ml af en 1.000 mg / L AuNP løsning og rejse til en anden 24 timer. Tilføj 0,1 ml vand i hver brønd af de tre kontrolpunkter celleplader og også lade i 24 timer.
    3. Efter 24 timer er gået, opsug celle medier og vask med PBS for at fjerne enhver overflade-bundne AuNPs. Udskift cellemedierne. Cellerne er nu klar til RF eksponering.
  2. Placer hver 12-brønds cellepakken i RF-felt. Vent indtil cellerne er afkølet til 31 ° C. Tænd RF generator og udsættes for 3,5 min. Den endelige temperatur af cellen medier vil være ~ 37 ° C. Sluk for RF-felt. Fjern cellerne og placere dem i en inkubator i 24 timer før analyse.
      <li> Fjern celler fra inkubatoren og aspirere celle medier. Tilføj 1,6 ml cellemedier til hver brønd samt 0,4 ml MTT-reagens. Cellerne inkuberes i 4 timer. Aspirer medier og erstatte med 2 ml dimethylsulfoxid (DMSO). Placer cellepladerne på en bænk rocker og orlov til 10 minutter for at tillade DMSO at opløse MTT reagenser. Endelig pipette 100 ul af hver brønd i en 96-brønds plade og optisk læser godt ved 570 nm under anvendelse af en pladelæser som SPECTROstar Nano pladelæser.

3. Nanopartikel-assisteret RF-induceret hypertermi: in vivo studier

  1. Disse in vivo-undersøgelser kan anvendes på enhver form for kræft, der danner solide tumorer i et ortotopisk eller ektopisk murine model. Dette eksperiment bruger Hep3B lever kræftceller i en ektopisk tumor BALB-C Nude musemodel.
  2. Bemærk: alle in vivo forsøg udføres i overensstemmelse med alle relevante retningslinjer, regler og reguleringsorganer. Også blev protokollen bliver demonstreret udføres under vejledning og godkendelse af University of Texas MD Anderson Cancer Centers Institutional Animal Care og brug Udvalg (IACUC).
    1. Grow et passende antal celler (~ 100 k) i en vævskulturkolbe med passende vækstmedium. Inkuberes i en 37 ° C inkubator med 5% CO 2 for varigheden af cellekultur.
    2. Behandle celler med trypsin (for at løsne sig fra kolben) og producere en opløsning af 2 millioner celler for hver 25 ul. Tilføj en tilsvarende mængde af Matrigel (på is), og bland grundigt at forberede den sidste injektion løsning. Sprøjt denne løsning i den ønskede position på musens tilbage og vente en passende mængde for tumorerne til at vokse til den ønskede størrelse (2-4 uger for de fleste celler). Før RF eksponering, bør BALB-C Nude mus bære solide ektopiske tumorer 0,5-1 cm i diameter.
    1. Forbered mus, der skal bruges (i dette tilfælde BALB-C Nude mus) ved at Anaesthetizing dem med en opløsning af ketamin og xylazin ved IP injektion. Mens mus falde i søvn, holde dem i et temperaturstyret kammer ved 37 ° C. 20 mus i alt vil være behov for, alle bærer lignende størrelse tumorer. Ti mus vil blive anvendt i forbindelse med og uden AuNPs (sidstnævnte er PBS kun injektioner), mens de resterende 10 mus vil blive delt mellem RF-eksponerede og ikke RF-eksponerede kontroller: begge grupper uden AuNP injektioner.
    2. Når ordentligt bedøvet, injicere AuNPs direkte ind i tumoren ved hjælp af en 1-ml sprøjte med en 27 G kanyle. Den AuNP opløsning skal være på en Au koncentration på 200 mg / L i 0,1 ml PBS. Efter injektion, skal du bruge en kirurgisk vatpind til at absorbere blod og tørre injektionsstedet med en spritserviet.
    3. Derefter monteres musen til at blive behandlet på den modtagende leder af RF-generator. Musen skal placeres således, at tumoren er tættest på transmission hovedet. Afskærme områder, der ikke skal behandles, samt følsommetive områder såsom øjne, ører og tæer med kobberbånd. Vær sikker på, at kobberbånd er behørigt kontakte jordforbindelse plan, således at ingen afgift oprustning opstår. Desuden skal eksponering området har en afstand på mindst 1 cm større end størrelsen af ​​det ønskede behandlingssted.
    4. Position IR termisk kamera, så tumor og behandling område er synlige. Tænd RF i 5 min. Optag den resulterende temperatur. Hvis behandlingen opnår temperaturer over 42 ° C stoppe behandlingen med det samme.
    1. Efter RF eksponering inddrive musene fra anæstesi i en varm kammeret, indtil de er bevidste.
    2. Gentag forsøget med den samme mus 48 timer senere (trin 3.3.1 - 3.4.1).
    3. Efter eksperimentet aflive musene i overensstemmelse med de institutionelle protokoller og procedurer. Noterer vægten af ​​tumoren. For histologiske analyse løse tumorer med formalin og indkapsle dem i paraffin. Tumorsnit typisk farves with hæmatoxylin og eosin og mål er relevante for at måle terapeutisk virkning, fx Ki-67, kløvet caspase-3 osv.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

1.. Vurdere RF opvarmning af NP kolloider: AuNPs som et eksempel.

Efter at have fulgt afsnit 1.1 - 1.2.3 forventer at have en meget koncentreret, stabilt og renset opløsning af 5 nm og 10 AuNPs diameter nm. Fra de 500 ml som indkøbte stamopløsning forventer at få mindst 4 ml opløsning i en koncentration på 1.000 mg / L. Forskellen i HRs mellem AuNPs og baggrunden DI vand pufferopløsning ved denne koncentration bør være ~ 0,25 ° C / s og 0,1 ° C / sek til 5 nm og 10 nm AuNPs henholdsvis som vist i figur 2.

2. Nanopartikel-assisteret RF-induceret hypertermi: In vitro-forsøg

Resultaterne bør ideelt viser, at celler udsat for et RF-felt, som har internaliseret AuNPs mindre hensigtsmæssige end de ikke-AuNP RF eksponerede celler. Et eksempel på sådanne forventede resultater er fremhævet i figur 3..

3. Nanoparkel-assisteret RF-induceret hypertermi: In vivo undersøgelser

Efter injektion af PBS ophængt AuNPs og efter RF eksponering behandling af ~ 2-3 uger, bør posthume analyse afsløre kontrolleret tumorvækst og / eller et fald i tumorstørrelse / masse (som vist i figur 4). Der kan også være tegn på direkte cellulær termisk ablation. Dog kan dette ikke være tilfældet, da simple citrat-udjævnede AuNPs er langt fra at blive optimeret og har tendens til at samle i tumorvæv. Som det kan ses i de seneste udgivelser, skal AuNPs være ikke-aggregeret indenfor intracellulære organeller at øge RF-induceret cytotoksicitet. Desuden har nyere undersøgelser vist, at konjugation af kemoterapi narkotika, såsom gemcitabin til AuNPs optimerer RF terapi. Investigator kan stadig bruge disse protokoller dog direkte at sammenligne effektiviteten af ​​deres egen AuNP-kompleks i forhold til vores grupper tidligere arbejde.


Fig. 1. Eksperimentel overblik. AuNP opvarmning vurdering: As-købt AuNPs (1.a) anbringes i en 50 kDa-filter (1.b) og centrifugeret ned at adskille AuNPs fra filtratet (1.c). Dette giver mulighed for meget koncentrerede og oprensede AuNPs at blive dannet (1.d). Prøven anbringes derpå i RF-systemet ved hjælp af en Teflon prøveholderen monteret på en indstillelig drejebord (1.e). De AuNPs opvarmning satser, samt fire andre kontrolområder, registreres ved hjælp af en IR-kamera (1.f) in vitro-protokoller:. Hep3B hepatiske kræftceller dyrkes i de forreste 3-brønde af flere 12-brønds celle pakker som vist i 2.a (mængden af celle-packs brugte dep slutter, hvad experimentalist ønsker at undersøge i form af anvendt RF-effekt, AuNP koncentration, kontroller osv.). Hver plade med 12 brønde underkastes derefter til RF-felt (2.b). Selvom det ikke er nødvendigt, da det optimale RF eksponeringstid er allerede blevet fastlagt i medierne temperaturen kan også registreres ved hjælp af IR-kamera (2.c) In vivo protokoller:. BALB-C mus med ektopiske levertumorer (3.a) blev udsat for intra-tumorale injektioner af AuNPs og udsat for RF-system (3.b) i flere minutter. Kobberbånd blev anvendt til at jorde mus for at forhindre forbrændthed. En kvartskuvette fyldt med AuNPs er også vist ved siden af ​​musen til at validere RF eksponering. Tumorområdet bør have en temperatur højere end resten af musen og normalt vises rødt i IR billede (3.c).

ys "> Figur 2
Figur 2. Opvarmning satser (° C / sek) på 5 nm og 10 nm diameter AuNPs løsninger. Som protokolpatienter anvisninger, er opvarmning satser fastsat for AuNPs med supernatant (AuNPs + SN), AuNPs filtreret ud, så kun supernatanten er til stede (SN) , og forskellen i opvarmning satser mellem disse to (forskel). Gennemsnitlige opvarmning satser er fra tre forskellige eksperimenter (A, B, og C).

Figur 3
Figur 3. . Idealiseret Hyperthermia cytotoksicitet levedygtighed (MTT assay) Vist er fire celle eksperimenter: kontrol (ingen RF), kun AuNP (ingen RF), RF kun vejledende, og RF med tillæg af cellulære internaliserede AuNPs (A, B, C, og D ).

"> Figur 4
Figur 4.. Posthum analyse af ektopiske mus tumorer. Den venstre tumor er, hvad der ville forventes fra begge kontrolprøver dvs ingen RF og ingen AuNP injektion). Den midterste tumor viser et svagt fald i størrelse når de udsættes for RF-feltet, alene. Højre tumor viser imidlertid, at RF + AuNP kombineret terapi kan mindske / styre væksten tumor yderligere.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Disse protokoller tillader experimentalist fuldt ud at analysere, i hvilket omfang nanomaterialer (i dette tilfælde AuNPs) kan øge RF-induceret hypertermi til behandling af cancer. Den første protokol specifikt beskæftiger sig med at analysere varmeproduktion fra stærkt koncentreret og oprenset AUNP prøver. Selv om andre grupper har rapporteret varmeproduktion primært fra bufferne som AuNPs er ophængt i og ikke AuNPs selv 9-11, deres RF-systemer, der anvendes lavere koncentrationer af AuNPs med diametre> 10 nm, samt lavere RF magtbeføjelser med elektriske feltstyrker <90 kV / m, som er for lav til at se nogen mærkbar RF opvarmning effekter fra AuNPs. Kun ved at følge de protokoller og parametre, der er nævnt i denne rapport kan det experimentalist observere nanoskala varme fænomen.

In vitro sektion tillader udvikling af cellulær-RF-NP grænseflader, der skal undersøges for Optimeret RF / NP-induceret hypertermi. Befmalm tilsætning af AuNPs og RF-eksponering, bør du forvente at have en levedygtig 2D vækstlag af de relevante cancer cellelinjer (i dette tilfælde Hep3B). Den korrekte RF eksponering for hver cellelinje skal dog være forudbestemt, før disse eksperimenter ved at udsætte celler til RF felt på forskellige tidspunkter, f.eks 2 -8 min) og ser på deres levedygtighed profil efter 24 timer. Den korrekte RF eksponering tid til at bruge bør være, hvor cellerne er ~ 80% levedygtige. I tilfælde af Hep3B celler viste dette sig at være ~ 3,5 min.

Den enkleste assay valg for levedygtighed standard 3 - (4,5-dimethylthiazol2-yl)-2.5-diphenyltetrazoliumbromid (MTT)-assay, selv om en anden analyse kan være nødvendig, hvis det forventes, at NPS vil interagere med assayreagenserne (som det var tilfældet med MTT-assay reagerer med CNTs 13). Andre mere avancerede og detaljerede analyser kan anvendes til at vurdere celledød mekanisme, som f.eks FACS-analyse med Annexin-V og propidium iodide (PI)-farvning. Future in vitro-system udviklinger inden for vores gruppe vil se på at placere cellerne i en temperatur-kontrolleret RF-inert inkubator til helt at udelukke eventuelle kilder til hypertermi grund til bulk opvarmning af cellen medier. Også mængden af ​​AuNPs som skal internaliseres i en celle for maksimal celledød, samt deres stabilitet i intracellulære organeller, vil blive undersøgt i større detaljer. Dette er i overensstemmelse med den seneste arbejde, som viste, at AuNPs skal være ikke-aggregeret inden lysosomer for øget RF-behandling 4.

Endelig blev in vivo-protokoller, der er beskrevet for at tillade fuld bioanalyse af AuNPs i ektopiske levercancer musemodeller for deres evne til at kontrollere eller reducere tumorvækst og / eller størrelse i kombination med RF terapi. Et vigtigt punkt for diskussion er muligheden for RF-feltet for at fremkalde forbrændinger på musen på grund af forkert jordforbindelse procedurer. Anvendelsen af ​​properly jordet og placeret kobberbånd, som nævnt i protokol afsnittet er et krav for at stoppe disse forbrændinger.

Future in vivo arbejde i vores laboratorium vil arbejde på at vurdere den faktiske mekanisme for tumor død / størrelse kontrol fra RF-AuNP eksponering. Selv om det er en hypotese, at hypertermi spiller en afgørende rolle, dette skal valideres selv om brugen af ​​sådanne kontroller som direkte indsættelse af optiske fibre termiske sonder ind i tumoren og de omkringliggende raske celler til at se på RF-induceret temperatur respons sådanne væv . Også, vil udviklingen af en intracellulær fluorescerende termisk farvestof, hvis emission bølgelængde er en direkte funktion af temperaturen være et udmærket redskab for denne validering og kan også anvendes til in vitro-modeller.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Vi har intet at afsløre.

Acknowledgements

Dette arbejde blev finansieret af NIH (U54CA143837), NIH MD Anderson Cancer Center Support Tilskud (CA016672), V Foundation (SAC), og en ubegrænset forskningsbevilling fra Kanzius Research Foundation (SAC, Erie, PA). Vi takker Kristine Aske fra Kirurgisk Afdeling Oncology, MD Anderson Cancer Center, for administrativ bistand.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Reagent/Material
500 ml gold nanoparticles (5 nm) Ted Pella, INC 15702-5
Amicon Ultra-4/-15 Centrifugal Filter Units (50 kDa) Millipore UFC805024/UFC910096 (4 ml and 15 ml volumes)
MEM X1 Cell Culture Media Cellgro 10-101-CV (add extra nutrients as necessary)
Fetal Bovine Serum Sigma F4135-500 ml
Copper Tape Ted Pella 16072
Equipment
Kanzius RF System (13.56 MHZ) ThermMed, LLC, Inc. (Erie, PA, USA)
IR Camera FLIR SC 6000, FLIR Systems, Inc. (Boston, MA, USA) Contact FLIR
1.3 ml Quartz Cuvette ThermMed, LLC, Inc. (Erie, PA, USA)
Teflon Sample holder with Rotary Stage ThermMed, LLC, Inc. (Erie, PA, USA)
SPECTROstar Nano Microplate reader BGM Labtech
UV-Vis spectrometer Applied Nanofluorescence, Houston, TX) NS1 NanoSpectralyzer
ICP-–S PerkinElmer Optima 4300 DV
Zetasizer Malvern Zen 3600 Zetasizer

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Gannon, C. J., et al. Carbon nanotube-enhanced thermal destruction of cancer cells in a noninvasive radiofrequency field. Cancer. 110, 2654 (2007).
  2. Curley, S. A., Cherukuri, P., Briggs, K., Patra, C. R., Upton, M., Dolson, E., Mukherjee, P. Noninvasive radiofrequency field-induced hyperthermic cytotoxicity in human cancer cells using cetuximab-targeted gold nanoparticles. J. Exp. Ther. Oncol. 7, 313 (2008).
  3. Gannon, C. J., Patra, C. R., Bhattacharya, R., Mukherjee, P., Curley, S. A. Intracellular gold nanoparticles enhance non-invasive radiofrequency thermal destruction of human gastrointestinal cancer cells. Journal of Nanobiotechnology. 6, 2 (2008).
  4. Raoof, M., et al. Stability of antibody-conjugated gold nanoparticles in the endolysosomal nanoenvironment: implications for noninvasive radiofrequency-based cancer therapy. Nanomedicine. 8, 1096 (2012).
  5. Glazer, E. S., Massey, K. L., Zhu, C., Curley, S. A. Pancreatic carcinoma cells are susceptible to noninvasive radio frequency fields after treatment with targeted gold nanoparticles. Surgery. 148, 319 (2010).
  6. Glazer, E. S., Curley, S. A. Radiofrequency field-induced thermal cytotoxicity in cancer cells treated with fluorescent nanoparticles. Cancer. 116, 3285 (2010).
  7. Glazer, E. S., Curley, S. A. Non-invasive radiofrequency ablation of malignancies mediated by quantum dots, gold nanoparticles and carbon nanotubes. Therapeutic Delivery. 2, 1325 (2011).
  8. Corr, S. J., Raoof, M., Mackeyev, Y., Phounsavath, S., Cheney, M. A., Cisneros, B. T., Shur, M., Gozin, M., McNally, P. J., Wilson, L. J., Curley, S. A. Citrate-Capped Gold Nanoparticle Electrophoretic Heat Production in Response to a Time-Varying Radiofrequency Electric-Field. J. Phys. Chem. C. 116, 24380 (2012).
  9. Kruse, D. E., et al. A Radio-Frequency Coupling Network for Heating of Citrate-Coated Gold Nanoparticles for Cancer Therapy: Design and Analysis. IEEE Transactions on Biomedical Engineering. 58, 10 (2011).
  10. Li, D., et al. Negligible absorption of radiofrequency radiation by colloidal gold nanoparticles. J. Colloid Interf. Sci. 358, 47 (2011).
  11. Liu, X., Chen, H. J., Chen, X., Parini, C., Wen, D. Low frequency heating of gold nanoparticle dispersions for non-invasive thermal therapies. Nanoscale. (2012).
  12. Sassaroli, E., Li, K. C. P., O'Neill, B. E. Radio frequency absorption in gold nanoparticle suspensions: a phenomenological study. J. Phys. D App. Phys. 45, 075303 (2012).
  13. Worle-Knirsch, J. M., Pulskamp, K., Krug, H. F. Oops they did it again! Carbon nanotubes hoax scientists in viability assays. Nano Lett. 6, 1261 (2006).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics