Ethanolfiksering og DAPI-farvning: En metode til at visualisere DNA i C. elegans
Published: April 30, 2023
Abstract
Kilde: Clarke, E.K., et al. Manipulation af ploidy i Caenorhabditis elegans. J. Vis. Exp. (2018).
Her beskriver vi en teknik, der bruges til at visualisere genomisk DNA i faste, intakte nematoder. Videoen indeholder et eksempel protokol til at tælle chromatin i ubefrugtede C. elegans oocytter.
Protocol
Denne protokol er et uddrag fra Clarke et al. Manipulation af ploidy i Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2018). Tetraploide stammer kan valideres ved at tælle antallet af kromosomer i deres ubefrugtede oocytter. Fluorescerende mikroskopi kan bruges til at screene for antallet af kromosompar i ubefrugtede diploid oocytter (før de meiotiske divisioner), hvis stammen ha…
Materials
| Dissecting Microscope | Motic Microscopy | SMZ171 | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Staining | |||
| Hoechst 33258, Pentahydrate | Biotium | 40045 | |
| DAPI | Biotium | 40011 | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Ethanol Fixation | |||
| Ethanol, Pure, 190 Proof (95%), USP | Koptec, VWR | 89125-166 | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| M9 Buffer | |||
| Sodium chloride, Biotechnology Grade | VWR | 97061-278 | |
| Potassium phosphate, Monobasic Anhydrous Grade | VWR | 97062-346 | |
| Sodium phosphate, monobasic dihydrate | Fisher Scientific | AC271750025 |
Cite This Article
Ethanol Fixation and DAPI Staining: A Method to Visualize DNA in C. elegans. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20136, doi: (2023).