Etanol Fiksasyonu ve DAPI Boyama: C. elegans'ta DNA'yı Görselleştirmek için Bir Yöntem

Published: April 30, 2023

Abstract

Kaynak: Clarke, E. K., vd. Caenorhabditis elegansPloidy manipülasyonu. J. Vis. Exp. (2018).

Burada, genomik DNA’yı sabit, bozulmamış nematodlarda görselleştirmek için kullanılan bir tekniği tarif ediyoruz. Video, döllenmemiş C. elegans oositlerindeki kromatinleri saymak için örnek bir protokol içerir.

Protocol

Bu protokol Clarke ve ark . Tetraploid suşları, kısırlaştırılmamış oositlerindeki kromozom sayısı sayılarak doğrulanabilir. Floresan mikroskopi, suşun kromozomlar için floresan bir işaretleyicisi varsa, döllenmemiş diploid oositlerdeki (meiotik bölünmelerden önce) kromozom çiftlerinin sayısını taramak için kullanılabilir. Floresan kromozom beli…

Materials

Dissecting Microscope Motic Microscopy SMZ171
Name Company Catalog Number Comments
Staining
Hoechst 33258, Pentahydrate Biotium 40045
DAPI Biotium 40011
Name Company Catalog Number Comments
Ethanol Fixation
Ethanol, Pure, 190 Proof (95%), USP Koptec, VWR 89125-166
Name Company Catalog Number Comments
M9 Buffer
Sodium chloride, Biotechnology Grade VWR 97061-278
Potassium phosphate, Monobasic Anhydrous Grade VWR 97062-346
Sodium phosphate, monobasic dihydrate Fisher Scientific AC271750025

Play Video

Cite This Article
Ethanol Fixation and DAPI Staining: A Method to Visualize DNA in C. elegans. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20136, doi: (2023).

View Video