Etanolfiksering og DAPI-farging: En metode for å visualisere DNA i C. elegans
Published: April 30, 2023
Abstract
Kilde: Clarke, E. K., et al. Manipulering av ploidy i Caenorhabditis elegans. J. Vis. Utt. (2018).
Her beskriver vi en teknikk som brukes til å visualisere genomisk DNA i faste, intakte nematoder. Videoen inneholder et eksempelprotokoll for å telle kromatin i unfertilized C. elegans oocytes.
Protocol
Denne protokollen er et utdrag fra Clarke et al, Manipulation of Ploidy in Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2018). Tetraploide stammer kan valideres ved å telle antall kromosomer i deres unfertilized oocytter. Fluorescerende mikroskopi kan brukes til å screene for antall kromosompar i unfertilized diploid oocytter (før de meiotiske divisjonene), hvis stammen har en…
Materials
| Dissecting Microscope | Motic Microscopy | SMZ171 | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Staining | |||
| Hoechst 33258, Pentahydrate | Biotium | 40045 | |
| DAPI | Biotium | 40011 | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Ethanol Fixation | |||
| Ethanol, Pure, 190 Proof (95%), USP | Koptec, VWR | 89125-166 | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| M9 Buffer | |||
| Sodium chloride, Biotechnology Grade | VWR | 97061-278 | |
| Potassium phosphate, Monobasic Anhydrous Grade | VWR | 97062-346 | |
| Sodium phosphate, monobasic dihydrate | Fisher Scientific | AC271750025 |
Cite This Article
Ethanol Fixation and DAPI Staining: A Method to Visualize DNA in C. elegans. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20136, doi: (2023).