Etanolfiksering og DAPI-farging: En metode for å visualisere DNA i C. elegans

Published: April 30, 2023

Abstract

Kilde: Clarke, E. K., et al. Manipulering av ploidy i Caenorhabditis elegans. J. Vis. Utt. (2018).

Her beskriver vi en teknikk som brukes til å visualisere genomisk DNA i faste, intakte nematoder. Videoen inneholder et eksempelprotokoll for å telle kromatin i unfertilized C. elegans oocytes.

Protocol

Denne protokollen er et utdrag fra Clarke et al, Manipulation of Ploidy in Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2018). Tetraploide stammer kan valideres ved å telle antall kromosomer i deres unfertilized oocytter. Fluorescerende mikroskopi kan brukes til å screene for antall kromosompar i unfertilized diploid oocytter (før de meiotiske divisjonene), hvis stammen har en…

Materials

Dissecting Microscope Motic Microscopy SMZ171
Name Company Catalog Number Comments
Staining
Hoechst 33258, Pentahydrate Biotium 40045
DAPI Biotium 40011
Name Company Catalog Number Comments
Ethanol Fixation
Ethanol, Pure, 190 Proof (95%), USP Koptec, VWR 89125-166
Name Company Catalog Number Comments
M9 Buffer
Sodium chloride, Biotechnology Grade VWR 97061-278
Potassium phosphate, Monobasic Anhydrous Grade VWR 97062-346
Sodium phosphate, monobasic dihydrate Fisher Scientific AC271750025

Play Video

Cite This Article
Ethanol Fixation and DAPI Staining: A Method to Visualize DNA in C. elegans. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20136, doi: (2023).

View Video