Denna video beskriver en metod för att testa lukt undersökande beteende i fruktflugan, kallad Y-labyrinten. Det presenterade protokollklippet visar hur du ställer in och utför analysen.
Protocol
Denna protokolltext är ett utdrag från Simonnet et al., Testing Drosophila Olfaction with a Y-maze Assay, J. Vis. Exp. (2014). 1. Innan du börjar Använd ett isogeniserat referenslager med stabila och robusta beteendemässiga fenotyper. Det finns ingen allmän regel för att välja detta lager, eftersom alla potentiella kontroller kan bära heterogena bakgrunds alleler. Använd denna kontrollstam för att backcross alla andra lager som behövs…
Representative Results
Figur 1: Manligt luktsvar bedömt med en Y-labyrintuppsättning. A) Delad enhet. B) Monterad enhet. C) Uppsättning i arbetsskick under vitt rött ljus. D) Kvantifiering av manliga luktsvar mot ättiksyra (AA) eller fenylacetikasyra (PAA) som båda späds ut i destillerat vatten (10 % v/v) (N = 11, vilket motsvarar totalt 110 flugor). Statistisk analys ut…
Materials
Drosophila Polystyrene tube
VWR europe
734-2255
30 x 25 mm Y-maze
Drosophila Borosilicate tube
Dijon verre
95 X 25 mm Y-maze
Foam stopper
Dutscher
999038
Y-maze
Y-shaped connector
Europrix
11020605
Y-maze
100-1,000 µl pipette tips
Corning
4868
Join the following pipette tips to the Y-shaped connector. Cut 2 pipette tips at 65 mm from the wide end, and connect the narrow end (with a ~2 mm opening) to 2 test vials. These openings will limit the U-turns once the flies enter the tubes containing the odors. Cut 1 pipette tip at 35 mm from the wide end, and connect it to the loading vial.