触摸习惯测定：研究C.elegans非关联学习的方法

Overview

本视频介绍了触摸习惯测定，这是一种评估机械感官和量化习惯时间的 C. elegans 行为方法。

Protocol

以下协议是梅尔沙等人的摘录 。 胚胎接触低剂量毒剂的长期行为和生殖后果 ，J.Vis.Exp.(2018)

1. 前触摸习惯分析
   1. 使用火消毒的 30 G 铂金线采摘将大约 10 种同步的年轻成人蠕虫转移到新的非种子 NGM 板中。让蠕虫不受干扰5分钟，让他们有时间适应新的盘子。
   2. 对于习惯反应，使用附着在木制绞盘或牙签末端的眉毛毛，并浸入 70% 乙醇进行消毒。用干净的无绒组织擦拭，等待1分钟，乙醇蒸发掉。使用眉毛轻轻触摸头部的蠕虫（咽泡前部）。重复触摸，允许在触摸之间 10 s，以便蠕虫恢复。
   3. 继续触摸（允许10s间歇间隔），直到蠕虫不再向后移动。在这一点上，蠕虫已经习惯于刺激。记录蠕虫习惯所需的接触数量。
   4. 使用单向 ANOVA 分析治疗和未处理控制的平均习惯率之间的差异，然后是 Tukey 的临时测试。

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
EtOH	Sigma-Aldrich	64-17-5
N2 (Wild-type C. elegans) worms	CGC		Repository at U of Minnesota
Platinum wire pick	Genesee Scientific	59-AWP
Petri plates	Fisher	07-202-011
Dissection Microscope	AmScope	SM-2TYY