Overview
Cette vidéo introduit l’analyse d’accoutumation tactile, une méthode comportementale C. elegans d’évaluer la mécanosensation et de quantifier le temps à l’accoutumabilité.
Protocol
Le protocole suivant est un extrait de Mersha et coll. Conséquences comportementales et reproductives à long terme de l’exposition embryonnaire aux substances toxiques à faible dose, J. Vis. Exp. (2018)
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Essai antérieur d’accoutumation de contact
- Transférez environ 10 vers synchronisés jeunes adultes vers de nouvelles plaques NGM non enseilées à l’aide d’un pic métallique de platine de 30 G stérilisé par le feu. Laissez les vers intacts pendant 5 minutes pour leur laisser le temps de s’acclimater à la nouvelle plaque.
- Pour la réponse d’accoutumation, utilisez un cheveu de sourcil attaché à l’extrémité d’une brochette en bois ou d’un cure-dent, et stérilisez en plongeant dans 70% d’éthanol. Essuyer avec un tissu propre sans peluche et attendre 1 min pour que l’éthanol s’évapore. Touchez doucement le ver sur la tête (antérieur de l’ampoule pharyngéale) à l’aide des poils des sourcils. Répétez les touches, en permettant 10 s entre les touches afin de permettre au ver de récupérer.
- Continuer à toucher (permettant des intervalles interstimulus de 10 s) jusqu’à ce que le ver ne se déplace plus vers l’arrière. À ce stade, le ver s’est habitué au stimulus. Enregistrez le num+ber des touches nécessaires à l’accoutumabilité du ver.
- Analyser la différence entre les taux moyens d’accoutumance des contrôles traités et non traités à l’aide d’ANOVA uni-sens suivi du test post-hoc de Tukey.
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Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| EtOH | Sigma-Aldrich | 64-17-5 | |
| N2 (Wild-type C. elegans) worms | CGC | Repository at U of Minnesota | |
| Platinum wire pick | Genesee Scientific | 59-AWP | |
| Petri plates | Fisher | 07-202-011 | |
| Dissection Microscope | AmScope | SM-2TYY |
